全自动细菌生化鉴定分析仪与细菌微量生化管鉴定细菌的结果

辽宁省抚顺市疾病预防控制中心 （辽宁 抚顺 113006）

内容提要： 目的：研究分析全自动细菌生化鉴定分析仪与细菌微量生化管鉴定细菌的结果。方法：2019年8月～2019年9月，选取本中心获取的50株肠杆菌科菌株为研究对象，其中大肠埃希菌23株，肺炎克雷伯菌12株，阴沟肠杆菌10株、不发酵和需氧革兰阴性杆菌5株，分别采用全自动细菌生化鉴定分析仪、细菌微量生化管进行鉴定，对比两种方法的鉴定结果。结果：全自动细菌生化鉴定分析仪的鉴定符合率与细菌微量生化管的鉴定符合率比较，不存在差异（P＞0.05）；两种鉴定方法鉴定大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌的准确率比较，不存在差异（P＞0.05）。全自动细菌生化鉴定分析仪鉴定不发酵和需氧革兰阴性杆菌的准确率高于细菌微量生化管鉴定（P＜0.05）。结论：全自动细菌生化鉴定分析仪与细菌微量生化管均可快速有效地鉴定常见肠杆菌科菌株，但在鉴定不发酵和需氧革兰阴性杆菌时，全自动细菌生化鉴定分析仪更具应用价值。

近年来，临床微生物样本中分离出的细菌多为革兰阴性菌，远远高于革兰阳性菌。从生物标本中分离出的革兰阴性菌里有33%的菌株是肠杆菌科细菌[1]。肠杆菌科细菌和人类有着非常密切的关系，在一定程度上可维持人体各项功能，若菌株数量发生异常变化，也会诱发胃肠道疾病，导致患者身体不适。再者，受近年来免疫抑制剂的广泛应用、临床医学技术的飞速发展等因素影响，因肠杆菌科细胞导致的医院感染事件发生率逐步升高[2]。准确鉴别细菌类型，可辅助临床对患者展开针对性治疗，可加速患者疾病的康复。基于此，本研究选取本中心获取的50株细菌为研究对象，对比全自动细菌生化鉴定分析仪、细菌微量生化管的细菌鉴定结果，现报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

2019年8月～2019年9月，选取本中心获取的50株肠杆菌科菌株为研究对象，其中大肠埃希菌23株，肺炎克雷伯菌12株，阴沟肠杆菌10株、不发酵和需氧革兰阴性杆菌5株，（其中铜绿假单胞菌有3株、军团菌2株）。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂。全自动细菌生化鉴定分析仪（北京兰伯瑞生物技术有限责任公司生产）以及配套的鉴定卡、细菌微量生化管（北京陆桥技术股份有限公司）。

1.2.2 方法。50株肠杆菌科菌株分别采用：①全自动细菌生化鉴定分析仪鉴定：取相应菌株转种在麦康凯琼脂平板、血琼脂平板等平板培养24h后，挑取可疑菌落接种在营养琼脂平板上进行纯培养。在平板上挑选纯菌落，并制备成具有一定浓度的活菌悬液，并将悬液填充至生化卡中，将生化卡置入检测箱进行有效鉴定。②细菌微量生化管进行鉴定：取相应菌株转种在麦康凯琼脂平板、血琼脂平板等平板培养24h后，挑取可疑菌落接种在营养琼脂平板上进行纯培养。根据OF试验、氧化酶、革兰染色等试验结果，依次将大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌，阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、军团菌分别转种在相应的微量生化鉴定管中进行有效鉴定。

1.3 观察指标

①两种方法的鉴定符合率；②两种方法鉴定不同菌株的准确率。

1.4 统计学分析

采用SPSS19.0进行统计分析，鉴定符合率、不同菌株的鉴定准确率采用χ2检验，计量资料采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 两种方法的鉴定符合率比较

全自动细菌生化鉴定分析仪的鉴定符合率与细菌微量生化管的鉴定符合率比较，不存在差异（P＞0.05），见表1。

表1. 两种方法的鉴定符合率比较(n=50,n/%)

2.2 两种方法鉴定不同菌株的准确率比较

两种鉴定方法鉴定大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌的准确率比较，不存在差异（P＞0.05）。全自动细菌生化鉴定分析仪鉴定不发酵和需氧革兰阴性杆菌的准确率高于细菌微量生化管鉴定（P＜0.05），见表2。

表2. 两种方法鉴定不同菌株的准确率比较 (n/%)

中大肠埃希菌23株，肺炎克雷伯菌12株，阴沟肠杆菌10株、不发酵和需氧革兰阴性杆菌5株，（其中铜绿假单胞菌有3株、军团菌2株）。

3.讨论

肠杆菌科的细菌属于临床最常见的一类感染菌属，分布范围非常广泛，十分常见，可诱发血流感染、切口感染、肺部感染等医源性感染。因此，肠杆菌科菌株的检测情况、药敏试验结果一直以来都非常受医学工作者关注。既往临床多通过手工板条法、仪器法等方法鉴定细菌的类型，辅助临床治疗相应的患者。其中仪器法是临床最常用的，有研究[3]指出，Micro flex™MALDI-TOF MS全自动细菌生化鉴定分析仪可有效鉴定肠杆菌科细菌，鉴定符合率比较高，且鉴定成本较低，操作十分简单，获取结果时间短，可在临床广泛应用。有关全自动细菌生化鉴定分析仪鉴定细菌的研究比较多，不同的研究对比不同的全自动细菌生化鉴定分析仪、不同的鉴定方法，并得出不同的结果。

从本研究结果可以看出，肠杆菌科细菌可采用全自动细菌生化鉴定分析仪与细菌微量生化管进行鉴定，可获得相对理想的鉴定结果。但就细菌的类型而言，全自动细菌生化鉴定分析仪的鉴定结果更为理想，不发酵和需氧革兰阴性杆菌的鉴定准确率97.6%远远高于细菌微量生化管的鉴定准确率88.1%。原因如下：细菌微量生化管鉴定虽然也是一种比较简单的鉴定方法，获取结果的速度快，鉴定结果的准确率比较高。但是，在鉴定铜绿假单胞菌、军团菌等不发酵和需氧革兰阴性杆菌时，鉴定准确率比较低，主要受生化管成分、交叉感染等因素影响。而全自动细菌生化鉴定分析仪不仅具有细菌微量生化管鉴定的优点，且该系统是由计算机技术、微生物检测技术、传统生化反应结合的。通过光学扫描原理，可准确辨别各个指示剂的显色与浊度情况，可在电脑上进行有效分析，与预定阀值进行有效比较，最终获取相对科学、准确的鉴定结果。

由上可知，全自动细菌生化鉴定分析仪鉴定细菌的效果明显高于细菌微量生化管鉴定的效果，更具应用价值。