Sysmex CA 7000和CA 1500全自动血凝仪性能评价及实验室比对

曹 坤，谢 楠，刘丽萍，郑大伟，王松松,高 选

山东大学生殖医学研究中心/国家辅助生殖与优生工程技术研究中心/生殖内分泌教育部重点实验室(山东大学)，山东济南 250001

随着高新技术的发展,医学检验技术和医学检验仪器不断更新,临床检验工作已从以手工为主逐步向自动化发展。只有检测系统的分析性能符合临床使用要求,才可以将检测系统用于临床。稳定的检测系统必须保证其误差在临床可接受范围之内,这是保障检验结果质量的前提。目前,临床实验室对凝血常规指标的检测仍然是通过全自动血凝仪进行，为了保证检测结果的准确性，依据《临床检验方法确认与性能评价》[1]、WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》及WS/T 407-2012《医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南》的相关要求，本研究对本实验室内Sysmex CA 7000全自动血凝仪(下称Sysmex CA 7000)和Sysmex CA 1500全自动血凝仪(下称CA 1500)的批内精密度、日间精密度、线性验证、临床可报告范围、准确性及正确度等性能指标评价，为保障仪器间结果的一致性，进行2套检测系统间实验室比对，以便对使用的检测系统做全面评估。

1 材料与方法

1.1标本来源

1.1.1批内精密度试验 血浆为本实验室两种水平(正常、中度异常)的临床标本。

1.1.2日间精密度试验 凝血4项检测使用正常质控血浆Dade Control 1(批号：548060)和异常质控血浆 Dade Control 2(批号：548274)，D-二聚体(D-D)检测使用质控血浆INNOVANCE D-Dimer Controls(批号：47275)。

1.1.3CA 7000和CA 1500准确性验证试验 试验血浆分别为2018年卫生和计划生育委员会临床检验中心第1次室间质量评价用血浆和2018年山东省临床检验中心第2次室间质量评价用血浆。

1.1.4正确度验证试验 试验血浆为检测结果在参考区间内的临床标本，线性验证和临床可报告范围验证试验血浆为高值血浆标本。上述血浆标本处理用0.109 mmol/L枸橼酸钠1∶9抗凝 ，1 500×g离心力离心15 min。

1.2仪器与试剂 试验前分别对CA 7000和CA 1500 2套检测系统进行校准。试剂、校准品、质控品为CA 7000和CA 1500配套产品。

1.3方法与判定标准

1.3.1批内精密度验证 根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)EP15-A2文件[2]选取两种水平(正常、中度异常)的临床标本(枸橼酸钠抗凝血浆)，按常规方法分别在CA 7000和CA 1500上连续检测11次，计算后10次检测结果的算术平均值和标准差，计算变异系数(CV)，纤维蛋白原(FIB)异常标本的水平要求>6.0 g/L或<1.5 g/L,凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、FIB、D-D 的CV要求见表1。

表1 批内精密度验证各项目CV要求(%)

1.3.2日间精密度验证 使用两种水平(正常、异常)的质控品，按常规方法分别在CA 7000和CA 1500上检测，连续测定20 d，每天一次，计算在控数据的CV,各项目CV要求见表2。

表2 日间精密度验证各项目CV要求(%)

1.3.3线性验证 选取1份接近预期上限的高浓度血浆(H)，按常规方法分别在CA 7000和CA 1500上检测，按照80%、60%、40%、20%、10%的比例进行稀释，每种稀释度重复测定2次，计算均值，将实测值与理论值进行比较，计算Y=aX+b，验证线性范围，要求r≥0.975，a=1.00±0.05。

1.3.4临床可报告范围 选取1份接近预期上限的高浓度血浆(H)，按照1∶1、1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128……的比例进行稀释，每种稀释度重复测定2次，将2次实测结果的均值与理论值进行比较得出R，R在0.8～1.2的最大稀释度为可报告范围。

1.3.5准确性验证 使用5份质评物进行单次检测，计算每份标本检测结果与靶值的相对偏差，每个项目的相对偏差符合要求的比例应≥80%。

1.3.6正确度验证 使用10份检测结果在参考区间范围内的临床标本，每份标本检测2次，计算20次检测结果的均值，以参加原中华人民共和国卫生部室间质量评价并且结果合格的CA 7000为靶机，以其检测均值为标准，计算偏倚。WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》只对FIB进行要求，故本实验室只对FIB进行验证，要求偏倚≤10%。

1.3.72套系统间实验室数据比对 CLSI EP9-A2[3]文件提供的方法，每个项目的检测选择30份标本，其中包含正常、异常结果的标本，均无重度黄疸、脂血和溶血的标本。PT、APTT、FIB、TT、D-D这5个项目在2套检测系统上同时测定。把CA 7000检测值作为参考，进行2套检测系统临床可接受性判断，偏倚必须符合CLIA′88规定的允许误差的1/2(PT、APTT≤7.5%,TT、FIB、D-D≤10%)，偏倚符合标准比率≥80%，最后对检测结果计算r、回归方程，观察各检测结果间差异有无统计学意义。

2 结 果

2.1批内精密度 CA7000和CA1500所测得的正常标本和异常标本的PT、APTT、FIB的批内精密度结果均符合WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》。其他项目正常标本和异常标本的检测结果均在厂家标识的要求范围内，验证通过，见表3。

表3 CA 7000和CA 1500批内精密度试验结果

2.2日间精密度 CA 7000和CA 1500所测得的正常标本和异常标本的PT、APTT、FIB的日间精密度结果均符合WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》。其他项目正常标本和异常标本的检测结果均在厂家标识的要求范围内，验证通过，见表4。

表4 CA 7000与CA 1500日间精密度试验结果

2.3线性验证 CA 7000和CA 1500检测FIB和D-D时按照比例稀释进行线性验证，线性验证得出的a及r结果均满足要求，验证合格，见表5。

表5 CA 7000和CA 1500仪器线性验证结果

2.4临床可报告范围 CA 7000和CA 1500检测FIB和D-D时按照倍比稀释，2套检测系统的FIB和D-D最大稀释倍数分别为16倍和32 倍，均具有较宽的临床可报告范围，见表6。

表6 CA 7000和CA 1500临床可报告范围试验结果

2.5准确性验证 CA7000和CA1500检测质评物的结果均在允许范围内，CA7000参加2018年卫生和计划生育委员会临床检验中心第1次室间质量评价、CA1500参加2018年山东省临床检验中心第2次室间质量评价均满分通过，验证通过。见表7。

表7 CA 7000和CA 1500准确性验证偏倚结果(%)

2.6正确度验证 本实验室按照《临床血液学检验常规项目分析质量要求》对FIB进行正确度验证，2套检测系统间的偏倚符合文件要求， 见表8。

表8 CA 7000和CA 1500检测FIB正确度验证试验结果

2.7系统间实验室数据比对 2套检测系统相同标本相同项目检测结果比较分析，以CA 7000为参考， CA 1500的检测结果与CA 7000的检测结果进行比较，偏倚在1/2CLIA′88 TEa范围内的比例均≥80%。2套检测系统回归方程的r2结果均>0.95，比对结果相关性良好，检测结果间差异无统计学意义(P>0.05)，见表9、表10。

表9 CA 7000和CA 1500系统间实验室数据比对结果

表10 CA 7000和CA 1500 2套检测系统检测结果

3 讨 论

随着凝血常规检测标本的日益增加及临床对凝血项目检测的需求，检测速度快的全自动血凝仪成为大部分临床检验实验室的首选。凝血4项和D-D检测作为实验室的常规检测项目，在止凝血、抗凝治疗、溶栓治疗和止血及血栓疾病的诊断和治疗中可提供可靠的检测依据，因此，仪器的稳定及检测结果的准确就显得尤为重要[4-5]。本实验室同时配备CA 1500和CA 7000这2台全自动血凝仪，2套检测系统使用的都是原产公司的质控品和试剂，既能满足常规检测的要求，又可以保证实验室急诊项目标本周转时间。

为了保证实验室结果的可靠性，在保证CA 1500和CA 7000 2套检测系统定期维护及定期校准的前提下，本实验室按照原中华人民共和国卫生部颁布的《医疗机构临床实验室管理办法》和ISO15189的要求[6]，对2套检测系统同时进行性能评价，并进行了2套检测系统之间的实验室比对。

性能评价验证结果表明，CA 7000批内精密度为0.76%～4.34%，日间精密度为1.99%～6.04%，CA 1500批内精密度为0.80%～5.04%，日间精密度为3.61%～9.68%，2套检测系统各个项目的批内精密度和日间精密度均在WS/T 406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》的最小允许范围内。实验数据也显示，较先进的CA 7000批内精密度和日间精密度明显优于CA 1500。2套检测系统均进行了FIB和D-D 2个项目的线性范围验证，2套检测系统r≥0.975，a均在1.00±0.05范围内，线性评价良好。在临床可报告范围性能评价中，选取本实验室1份接近预期上限的高浓度血浆，进行比例稀释后分别进行了FIB和D-D检测，结果表明， CA 1500和CA 7000 2套检测系统均具有较宽的临床可报告范围，可以同时满足临床检测需求。分析FIB检测数据，认为依据《临床血液学检验常规项目分析质量要求》，2套检测系统的正确度评价合格。在准确性性能评价中，CA 7000和CA 1500 2套检测系统分别参加2018年卫生和计划生育委员会和山东省临床检验中心凝血试验室间质量评价，均满分通过，PT、APTT、FIB、TT 4个项目的偏倚系数也均在厂家要求的范围内，说明2套检测系统准确性良好。本实验室准确性性能评价采用的是参加室间质量评价的结果数据，室间质量评价的标本靶值是通过不同实验室使用同一仪器同一方法，剔除离群值后获得的所有结果的平均值，通过本方法进行准确性性能评价更容易识别实验室存在的问题，即识别系统误差，然后制订相应的预防及补救措施。借助室间质量评价来进行准确性评价，不仅方便，而且可以对检测方法的有效性和可比性进行相应监控。

对于同一实验室用2套及以上检测系统检测同一项目时，为保证检测结果的稳定性和持续一致性，ISO15189准则要求，实验室必须定期进行同一检测项目不同检测系统之间的结果比对，这也是实现实验室间结果互认的保障。实验室内或实验室间不同检测系统相同检测项目检验结果的互认，既可以节约医疗资源，又可以便利患者的就医行为，目前已成为医疗发展的趋势。有学者认为，可以用新鲜血浆对不同血凝仪进行比对，采用偏倚≤1/2 CLIA′88规定的允许总误差作为不同检测系统之间检测结果可比性及临床可接受性的判断标准[7-11]，依据此标准，本实验室CA 7000和CA 1500 2套检测系统间实验室数据比对偏倚符合标准数≥80%，且检测结果相关性好，由此证明2套检测系统间检测结果具有较好的可比性。

综上所述，本实验室CA 1500和CA 7000 2套检测系统均具有良好的批内精密度、日间精密度、准确性、正确度，线性范围和临床可报告范围满足临床需求[12]，而且2套检测系统间的数据一致性高，具有良好的可比性[13]，均符合ISO15189标准化实验室的质量管理要求，2套检测系统均能满足实验室检测的要求。