长链非编码RNA MALAT1表达与胃癌临床及病理特征的相关性

闫丰娜，陈敬信

1.商洛国际医学中心医院病理科，陕西商洛 726000；2.陕西省森林工业职工医院病理科，陕西西安 710300

胃癌是一种常见的消化道肿瘤，与胃结节患者的临床表现、疗效、生存期具有很大差异，细胞遗传学异常与胃癌患者的预后明显相关[1]。寻找诊断及治疗胃癌的新靶点，以采取更简单、有效的诊疗方式，对改善患者预后具有重要价值。长链非编码RNA(lncRNA)为不具备编码蛋白能力的RNA，也是长度超过200 nt的功能性RNA 分子[2]。lncRNA具有明显的时空表达特异性，可调控蛋白编码基因的表达水平[3]，其由RNA 聚合酶Ⅱ转录而来，位于细胞核或细胞质内。lncRNA可从不同层面参与到多种生物学过程中，包括染色体结构、细胞分化、免疫应答等[4-5]。研究表明，lncRNA肺癌转移相关转录本1(MALAT-1)在多种肿瘤疾病的发生与发展中具有调控作用[6]，但其在胃癌中的相关研究鲜有报道。本研究探讨了lncRNA MALAT1表达与胃癌临床病理特征的相关性，以明确胃癌的发生机制，为改善患者预后提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年1月至2019年10月在商洛国际医学中心医院确诊的78例胃癌患者与78例胃结节患者为研究对象，分别纳入胃癌组与良性组。纳入标准：胃癌与胃结节均经过病理检查确诊；患者临床资料完整；年龄30～70岁；均为未进行治疗的初诊患者。排除标准：妊娠期及哺乳期女性；患有淋巴瘤等其他恶性肿瘤患者；严重免疫缺陷的患者；合并糖尿病患者；临床资料缺乏患者；不配合调查患者；合并精神障碍的患者；伴有出血性疾病、出血倾向患者；神经系统疾病患者。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。所有患者均自愿参与本研究，并签署知情同意书，本研究经本院医学伦理委员会批准后进行。

表1 两组患者一般资料比较

1.2仪器与试剂 PrimeScriptRT Reagent试剂盒购自日本Takara公司，批号：AK2601；定量PCR检测试剂盒购自德国Qiagen公司，批号：51106；PCR扩增仪购自德国Qiagen公司。

1.3方法 采用肝素抗凝剂试管采集所有患者的空腹静脉血3～5 mL，室温放置2 h，1 000 r/min离心5 min，取下层全血组织，分离外周血单个核细胞。提取总RNA，采用PrimerScriptRT Reagent试剂盒将RNA反转录为cDNA，然后采用定量PCR检测试剂盒检测lncRNA MALAT1表达水平。PCR扩增条件：94 ℃预变性5 min，94 ℃变性1 min，55 ℃退火25 s，40个循环，4 ℃保存。试验结果采用相对定量法ΔΔCt进行分析，计算2-ΔΔCt，检测全血 lncRNA MALAT1相对表达水平。调查胃癌患者的病历资料，包括病理类型、临床分期、组织分化程度、发病位置、远端转移等。同时随访到2020年2月1日，记录所有患者的生存情况。

2 结 果

2.1lncRNA MALAT1相对表达水平及预后情况比较 胃癌组的lncRNA MALAT1相对表达水平高于良性组，差异有统计学意义(P<0.05)；随访到2020年2月1日，良性组存活率明显高于胃癌组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组lncRNA MALAT1相对表达水平及预后情况比较

2.2胃癌患者lncRNA MALAT1相对表达水平与临床及病理特征、预后的相关分析 在胃癌组患者中，腺癌54例，鳞癌20例，鳞腺癌4例；临床分期：Ⅰ期35例，Ⅱ期25例，Ⅲ期18例；组织分化程度：低分化22例，中高分化56例；远端转移36例。在胃癌患者中，相关分析显示lncRNA MALAT1相对表达水平与临床分期、组织分化程度、远端转移、预后均呈正相关(r=0.408～0.533,P<0.05)。见表3。

表3 胃癌患者lncRNA MALAT1相对表达水平与临床及病理特征、预后的相关分析

2.3胃癌患者预后的影响因素分析 在胃癌患者中，以患者生存作为因变量，以临床分期、组织分化程度、远端转移、lncRNA MALAT1等作为自变量，多因素Logistic回归分析显示临床分期、组织分化程度、远端转移、lncRNA MALAT1表达水平均为影响患者预后的主要因素(P<0.05)。见表4。

表4 胃癌患者预后的影响因素分析

3 讨 论

当前胃癌的发病率明显升高，胃癌发病率逐年增加不仅是因为过度诊断，还与一些风险因素相关，如胰岛素抵抗、环境致癌物和有限的治疗手段等[7]。胃癌预后较好，5年存活率>90%，但是严重影响患者的生存质量，增加了生活压力。目前，临床主要依靠胃镜、病理学等手段诊断胃癌，存在一定程度的漏诊及误诊。

作为一类非编码RNA，lncRNA已被发现可参与多种重要生命过程，在前列腺癌、鼻咽癌、食管癌、乳腺癌中异常表达[8]。lncRNA可通过调节表观遗传学水平、转录及转录后水平等调控基因的表达，从而参与肿瘤的增殖、侵袭和转移等病理过程[9]。lncRNA MALAT1可以增加MYC蛋白的半衰期，也可影响细胞功能，并且可以与miRNA家族结合而影响miRNA家族对靶基因的作用[10]。本研究结果显示，胃癌组的lncRNA MALAT1相对表达水平明显高于良性组(P<0.05)；随访到2020年2月1日，良性组的存活率为100.0%，胃癌组的存活率为85.9%，差异有统计学意义(P<0.05)，表明下调lncRNA MALAT1表达可发挥抑癌作用。

胃癌的发生、发展是多因素、多阶段、多种癌基因相互作用的复杂过程，但是具体的机制还不明确。肿瘤相关信号通路调节异常、表观遗传学修饰等因素均参与了胃癌的发生、发展过程[11]。本研究相关分析显示，胃癌患者的lncRNA MALAT1相对表达水平与临床分期、组织分化程度、远端转移、预后都存在相关性(P<0.05)。从机制上分析，lncRNA MALAT1位于8号染色体长臂2区4带，其位于MYC原癌基因3端60 kb的位置，但是lncRNA MALAT1和MYC对一些疾病的发生可发挥独立的作用[12]。

胃癌的增殖与侵袭是一个多步骤、多因素相互作用的复杂过程，具体的机制尚不清楚，明确胃癌的转移与侵袭机制是当前研究领域的热点。基因异常和环境因素对胃癌的影响已经被广泛研究，但是疾病进展过程中所包含的分子机制并不明确。大量miRNA作为原癌基因或抑癌基因参与了肿瘤的恶性发展进程[13]。本研究中多因素Logistic回归分析显示，胃癌患者的临床分期、组织分化程度、远端转移、lncRNA MALAT1表达水平均为影响患者预后的主要因素(P<0.05)。

综上所述，胃癌的发生伴随lncRNA MALAT1的高表达，其与患者的临床特征明显相关，也是影响患者预后的重要因素。