过滤有凝块献血者血液的质量探讨*

林惠燕，孙爱农，何锐洪，葛 峰

中山市中心血站，广东中山 528403

血液是一种特殊的宝贵资源，据统计全球每年大约有1.174亿人献血，按照美国的数据统计，献血人次与输血患者比例为3∶1，全球每年接受输血的患者高达3 000万例[1]。血液在采集过程中，因献血者血流不畅、血管太细等原因，造成血液与采血袋里的抗凝剂不能及时和充分混匀，就会激活离体后凝血系统，出现大小不一的血液凝块[2]，对于外观明显发现凝块的血液都会直接进行报废处理，导致血液报废率随之增加[3]，然而一些细小的凝块和纤维蛋白析出往往很难被发现[4]。考虑到采血不畅血液不会用于洗涤红细胞、新鲜冰冻血浆、冷沉淀凝血因子等血液制品制备，因此本研究标本仅使用悬浮红细胞和冰冻血浆，并对其分别做相应质量检测，探讨过滤后的血液质量指标变化，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1标本来源 选取来自中山市中心血站2019年3-12月采集过程中血流不畅的血液230袋，过滤后发现凝块和血浆纤维蛋白析出的血液共30袋，该30袋血液检测结果均合格，献血者年龄18～55岁，中位年龄36岁；男12例(40%)，女18例(60%)。

1.2试剂与耗材 血浆游离血红蛋白测定试剂盒、血浆总蛋白测定试剂盒均由北京瑞尔达公司提供；血浆纤维蛋白原测定试剂盒由西门子公司提供；一次性使用去白细胞塑料血袋(简称：滤白血袋)由山东威高集团医用高分子制品股份有限公司提供；一次性使用塑料血袋转移袋Tr-200(简称转移袋)由费森尤斯卡比(广州)医疗用品有限公司提供。所有试剂和耗材均有医疗器械注册证，并在有效期内使用。

1.3仪器与环境 检测仪器包括SC-203A无菌接驳机(日本TERUMO)、SE250热合机(韩国Centron)、 Sysmex KX-21全自动血液分析仪(日本希森美康)、CH190-1A台式低速离心机(上海医疗器械)、4040半自动生化仪(德国ROBERT RIELE)、BacT/ALERT 3D(120)培养仪(法国生物梅里埃)、Versa TREK 培养仪(美国赛默飞世尔)、CX-40电子显微镜(日本奥林巴斯)、Thermo单通道移液器5～50、20～200、100～1 000 μL(美国赛默飞世尔)。在恒温实验室(室温22～25 ℃、湿度40%～60%)完成所有试验，所有仪器检测结果均可通过校准溯源至参考方法。

1.4方法

1.4.1计算采血不畅血液发生率 记录2019年3-12月采集血液总袋数和采血现场标记采血不畅血液总袋数，登记过滤血液凝块后的血液袋数，计算肉眼可见血液凝块在采血不畅血液中的发生率。

1.4.2血液凝块大小测量 使用透明塑料直尺测量红细胞母袋和过滤网中残留凝块直径，判断肉眼可见血液凝块大小，并计算相关比例。

1.4.3血液凝块过滤步骤 将采血现场标记为采血不畅的血液制备成悬浮红细胞后，接驳滤白血袋，悬挂于工作柜支架上，利用自然重力作用，使血液经过滤器进行过滤。

1.4.4悬浮红细胞容量计算与留样检测 记录悬浮红细胞过滤前和过滤后的重量变化，并且计算血容量回收率。过滤前留样20 mL作为过滤前的对照标本；过滤后分别接驳5份悬浮红细胞于转移袋，每份留样20 mL待检测使用，在转移袋中标记7、14、21、28、35 d，放置于2～4 ℃贮血冰箱保存。过滤袋剩余悬浮红细胞样品视为0 d样品，立即进行血细胞比容(Hct)、血红蛋白(Hb)、溶血率、无菌试验及显微镜镜检检测，并依次对贮存7、14、21、28、35 d的悬浮红细胞分别测定相应数据并记录，所有检测均按照《全血及成分血质量要求：GB18469-2012》[5]进行，并评估血液质量。

1.4.5血浆检测 每份制备好的冰冻血浆分别接驳留样5 mL，立即进行血浆总蛋白(TP)和血浆纤维蛋白原(FIB)检测。

1.5统计学处理 采用SPSS23.0统计软件进行数据处理及统计分析，不同血液凝块大小的悬浮红细胞Hct与Hb比较采用独立样本t检验，溶血率比较采用配对样本t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1采血不畅血液发生率 共采集血液39 831袋，其中采血现场标记为采血不畅血液230袋，采血不畅血液占采集血液比例0.58%(230/39 831)；经过滤后肉眼可见血液凝块与纤维蛋白析出共30袋，肉眼可见血液凝块占采血不畅血液的13.04%(30/230)。

2.2血液凝块大小判断 在30袋含有血液凝块和纤维蛋白析出的血液中，血液凝块<10 mm共11袋，占36.7%(11/30)；10～<20 mm共2袋，占6.7%(2/30)；20～<30 mm共8袋，占26.7%(8/30)；30～<40 mm共4袋，占13.3%(4/30)；40～<50 mm共3袋，占10.0%(3/30)；≥50 mm共2袋，占6.7%(2/30)。其中血液凝块<10 mm的以碎状凝块为主，个别为纤维蛋白析出。

2.3悬浮红细胞容量计算 过滤前后悬浮红细胞容量结果及其回收率结果见表1。

表1 过滤前后悬浮红细胞容量结果

2.4Hct和Hb指标变化 经计算30份悬浮红细胞Hct和Hb均达到质量标准；过滤前和过滤后Hct和Hb没有明显变化；血液凝块<20 mm的悬浮红细胞Hct和Hb均符合质量标准，血液凝块≥20 mm的悬浮红细胞Hct不符合标准，Hb符合标准，Hct均低于0.50，过滤后的悬浮红细胞经检测质量合格率为43.3%(13/30)；过滤前血液凝块<20 mm与≥20 mm的悬浮红细胞Hct比较，差异有统计学意义(t=8.384，P<0.05)；过滤后血液凝块<20 mm与≥20 mm的悬浮红细胞Hct比较，差异有统计学意义(t=7.410，P<0.05)；过滤前血液凝块<20 mm与≥20 mm的悬浮红细胞Hb比较，差异有统计学意义(t=6.573，P<0.05)；过滤后血液凝块<20 mm与≥20 mm的悬浮红细胞Hb比较，差异有统计学意义(t=5.987，P<0.05)。见表2。

表2 悬浮红细胞过滤前后Hct、Hb结果比较

2.5血液凝块<20 mm悬浮红细胞不同贮存时间溶血率变化 因血液凝块≥20 mm悬浮红细胞不符合质量标准，所以溶血率试验只对血液凝块<20 mm悬浮红细胞进行检测。贮存0～28 d过滤前和过滤后悬浮红细胞溶血率比较，差异无统计学意义(P>0.05)；贮存35 d过滤前和过滤后悬浮红细胞溶血率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 血液凝块<20 mm悬浮红细胞不同贮存时间溶血率比较

2.6血浆TP和FIB检测 检测30袋过滤后血液发现血液凝块和纤维蛋白析出的冰冻血浆，其中25袋检测合格，TP为(53.88±3.40)g/L，FIB为(235.32±30.63)mg/dL；另外5袋为纤维蛋白析出，TP为(46.62±2.93)g/L，均不合格，FIB为(181.00±21.63)mg/dL，与正常血浆结果比较略低。

2.7镜检红细胞聚集情况和无菌试验 取贮存0 d过滤前和过滤后标本分别涂抹在玻璃片上，使用显微镜观察发现，过滤前个别标本出现明显红细胞聚集，而过滤后没有发现明显红细胞聚集。过滤后悬浮红细胞细菌培养结果均无细菌生长。

3 讨 论

悬浮红细胞是临床医院使用较多的一种血液成分，主要用于改善机体携氧功能。悬浮红细胞数量、Hct、Hb、溶血率等是衡量悬浮红细胞质量的重要指标。本研究结果显示，采血不畅血液占采集血液比例为0.58%，肉眼可见血液凝块占采血不畅的13.04%；发现血液凝块的悬浮红细胞容量均符合质量要求，经过滤后血容量变化较少且均能达到标示量±10%的要求，与卢珍萍[6]的观点一致，过滤后标示血量为1.0、1.5、2.0 U的血液回收率分别为(93.79±4.51)%、(95.22±3.26)%、(95.09±2.54)%。血液凝块<20 mm的悬浮红细胞Hct和Hb都符合标准，过滤后的悬浮红细胞经检测质量合格率为43.3%。因此，建议成分制备过程中发现血液凝块≥20 mm的悬浮红细胞可以直接报废处理。

过滤后的悬浮红细胞因过滤过程中的机械损伤使其游离Hb高于过滤前，所以过滤后溶血率会较过滤前稍升高，贮存0～28 d的悬浮红细胞过滤前后溶血率比较，差异无统计学意义(P>0.05)；贮存35 d过滤后溶血率较过滤前升高，差异有统计学意义(P<0.05)，但均在国家标准范围以内。 检测30袋过滤后血液发现血液凝块和纤维蛋白析出的冰冻血浆，其中25袋检测合格，另外5袋血浆TP均不合格，FIB与正常血浆结果比较略低。建议制备过程中如发现纤维蛋白析出的血液，直接报废处理。另外，使用显微镜镜检发现过滤前个别悬浮红细胞标本出现明显红细胞聚集，而过滤后没有发现明显红细胞聚集，这与白细胞滤器主要为机械拦截过滤和电荷吸附作用的过滤机制有关[7]，经过白细胞滤器的过滤可以在一定程度上去除血液中的杂质，并能够降低活化白细胞的数量[8-9]，因此不排除可以有效滤除凝集大的细胞与凝块。过滤后悬浮红细胞细菌培养结果均无细菌生长。由于本研究中血液凝块<20 mm和有纤维蛋白析出的标本数较少，需要考虑标本量不平衡可能对试验结果造成的偏倚，今后还应扩大样本量，丰富完善相关数据。

根据国家规定，一些采供血机构已对血液中红细胞成分使用白细胞滤器进行了过滤，制备成去白细胞悬浮红细胞[10-12]，因此，临床使用时均已去除白细胞和血液凝块，明显减少了不良输血反应，使用效果良好，是输血界推荐的成分血。本研究将悬浮红细胞用白细胞滤器进行了过滤，实际上是制备了去白细胞悬浮红细胞成分，并得到过滤血液凝块后的血液质量检测数据，结果表明在一定范围内安全有效。

综上所述，血液凝块≥20 mm的悬浮红细胞质量检测不合格，血液凝块<20 mm的悬浮红细胞质量检测合格。纤维蛋白析出的冰冻血浆TP检测不合格。血液采集时，应对采血过程进行严格管理，提高采血人员采血技术，避免血管异常献血者献血，减少血液凝块产生，避免血液报废，有条件时推广白细胞滤器的全面使用，让临床获得不良反应较少的去白细胞悬浮红细胞成分血。