昆明地区儿童血清25羟基维生素D水平检测及维生素D营养状态分析

潘永圣，蒲 丹，汪佳婕，许小靓，徐宏忍，尹利民

(昆明市第一人民医院检验科，昆明 650011)

维生素D是身体发育过程中所必需的一种脂溶性维生素，也是儿童骨骼健康发育的重要决定因素，其主要生理作用是促进肠道内钙和磷的吸收，机体在缺乏维生素D的状态下，仅有10%～15%的膳食钙和约60%的磷被吸收[1]。流行病学调查显示，世界各地不同地区儿童普遍存在维生素D缺乏或不足的现象[2]。维生素D缺乏或不足导致儿童佝偻病和生长迟缓等疾病。近年来研究还发现维生素D还与癌症、传染病、心血管疾病、糖尿病、自身免疫性疾病和精神系统疾病等的发生密切相关[5]。25羟基维生素D[25（OH）D]是维生素D在人体内主要的循环和储存形式，其半衰期长以及合成不受激素直接调节，且在血液中浓度较高，检测血清25-（OH）D 水平是评估儿童体内维生素D营养状态的最佳指标[6]。维生素D水平受居住地区、季节、性别、年龄等因素的影响，不同地区维生素D水平及营养状况不同[7]，回顾近几年研究发现昆明地区儿童维生素D营养状态研究的相关报道不多，因此本研究对昆明地区0～14岁儿童血清25（OH）D 水平进行分析，评估儿童维生素D营养状态，为该地区预防儿童维生素D缺乏提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2016年11月～2019年10月昆明市第一人民医院儿保科门诊常规检查血清25-（OH）D 的0～14岁儿童600例为研究对象，其中男性314例，女性286例。0～1岁51例，1～3岁239例，3～6岁169例，6～14岁141例。将来院检查的月份按季节划分：3～5月为春季，6～8月为夏季，9～11月为秋季，12～次年2月为冬季，其中春季125例，夏季250例，秋季105例和冬季120例。所选实验对象均为无维生素D依赖性佝偻病、先天性遗传代谢性疾病、肝肾疾病、内分泌系统疾病等。

1.2 仪器和试剂 实验设备主要包括美国AB SCIEX 公司的串联质谱仪API3200 和日本岛津公司的液相色谱仪，检测试剂由上海可力梅塔有限公司提供（含校准品和质控品），采血管采用美国碧迪医疗器械有限公司生产的带分离胶真空采血管。

1.3 方法 于清晨空腹采集静脉血2～3ml 至带分离胶真空采血管中，在4h 内3 000r/min 离心10min分离血清，将血清保存于-20℃冰箱待测。严格按照仪器和试剂盒说明书进行检测操作。

1.4 判断标准[8]血清25（OH）D＜20 ng/ml为缺乏；20～30 ng/ml 为 不 足；30～150 ng/ml 为 充 足，＞150 ng/ml 为中毒。

1.5 统计学分析 采用SPSS19.0 统计软件进行数据分析，计量资料采用均值±标准差（±s）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析（ANOVA），计数资料用例数和百分率表示，多组间比较采用χ2检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 儿童血清25（OH）D 总水平 600例0～14岁儿童血清25（OH）D 水平为27.44±8.82 ng/ml。血清25（OH）D缺乏率为19.33%（116/600），不足率为47.67%（286/600），充足率为33.00%（198/600）。其中男性314例，血清25（OH）D 水平为28.37±8.77 ng/ml；女性286例，血清25（OH）D 水平为26.42±8.77 ng/ml。男女儿童间血清25（OH）D 水平差异有统计学意义（t=2.707，P=0.007）。男性儿童血清25（OH）D缺乏率为14.33%（45/314），不足率为48.73%（153/314），充足率为36.94%（116/314）；女性儿童血清25（OH）D缺乏率为24.83%（71/286），不足率为46.50%（133/286），充足率为28.67%（82/286）。血清25（OH）D 的缺乏、不足和充足率在男女儿童间差异有统计学意义（χ2=11.784，P=0.003）。

2.2 不同年龄段儿童血清25（OH）D 水平比较见表1。儿童体内血清25（OH）D 水平随年龄的增长呈下降趋势，不同年龄段儿童血清25（OH）D水平差异有统计学意义（F=93.447，P=0.000）。6～14岁儿童血清25（OH）D缺乏率高于0～1岁、1～3岁和3～6岁儿童，充足率低于0～1岁、1～3岁和3～6岁儿童。血清25（OH）D 的缺乏、不足和充足率在不同年龄段上差异有统计学意义（χ2=188.515，P=0.000）。

表1 不同年龄段儿童血清25（OH）D 水平及营养状态[n（%）]

2.3 不同季节儿童血清25（OH）D 水平比较 见表2。春、秋季的儿童血清25（OH）D 水平高于夏、冬季，差异有统计学意义（F=3.403，P=0.017），其中冬季与春季以及秋季差异均有统计学意义（t=3.020，P=0.003；t=2.607，P=0.010）。夏、冬季的儿童血清25（OH）D缺乏率高于春、秋季，血清25（OH）D 的缺乏、不足和充足率在不同季节差异有统计学意义（χ2=14.492，P=0.025），其中冬季与春季和秋季儿童血清25（OH）D 的缺乏、不足和充足率差异均有统计学意义（χ2=8.276，P=0.016；χ2=9.313，P=0.009）。

表2 不同季节儿童血清25（OH）D 水平及营养状态[n（%）]

3 讨论

维生素D是一组脂溶性的类固醇衍生物，与人类健康密切的是维生素D2（麦角钙化醇）和维生素D3（胆钙化醇） ，两者都可以从不同的食物中获得，但维生素D3 还可以通过紫外线照射后在皮肤中合成。维生素D通常没有生物活性，需在体内经过两次羟化后生成1，25（OH）2D，并通过与其核受体维生素D受体（VDR）相互作用来发挥其功能[9]。全球不同人群普遍处于维生素D不足或缺乏状态，儿童是维生素D缺乏高危人群，食物中添加维生素D的美国，1～5岁和6～11岁的儿童25（OH）D ＜30ng/ml 的分别占50%和70%，而在食物中未添加维生素D的欧洲、中东、南美、中国、印度等地区，儿童维生素D缺乏和不足率更高[5]。因此，了解本地区儿童体内维生素D水平和营养状态，对预防儿童维生素D缺乏或不足具有重要意义。

本研究采用LC-MS/MS 法对0～14岁600例儿童进行血清25（OH）D 检测，结果显示昆明地区血清25（OH）D缺乏率和不足率分别为19.33%和47.67%，儿童普遍存在维生素D缺乏和不足现象，但未发现维生素D中毒现象。本地区缺乏率低于北京（30.20%）、黑龙江大庆市（27.00%）、重庆（21.60%）、广西（47.10%）等[10-13]地区，可能原因是昆明地处云贵高原中部，常年日照时间长，紫外线照射强，以及重工业少，空气污染程度较轻，经皮肤合成的维生素D多。本研究还显示，女童的血清25（OH）D缺乏率高于男童，差异有统计学意义（P＜0.05），与国内其他研究报道[7]一致，主要原因可能是男童比女童较为活泼，户外活动多，日光暴露时间长，由紫外线经皮肤合成的维生素D更多。

本研究发现，昆明地区不同年龄段儿童血清25（OH）D 水平随着年龄的增长呈下降趋势，其差异有统计学意义（P＜0.01）。6～14岁儿童血清25（OH）D缺乏率高于0～1岁、1～3岁和3～6岁儿童，不同年龄段儿童血清25（OH）D缺乏、不足和充足率差异有统计学意义（P＜0.01），随年龄增长儿童维生素D缺乏率逐渐增加，与王晶等[8]的研究一致。可能原因为：①随着儿童保健行业的发展，加强了维生素D缺乏的宣传力度，家长对生长发育较快的婴幼儿维生素D补充意识逐步增强，使得婴幼儿期维生素D水平达到良好的状态。②1岁后儿童逐渐脱离母乳或配方奶，并且身体生长迅速，对维生素D的需求量大，但饮食中维生素D的来源很少，以及家长忽略1岁后儿童维生素D的补充，导致1岁后儿童体内维生素D水平出现欠佳现象。③3岁后儿童主要时间集中在学业和智力发展等方面，户外活动减少，日光暴露不足，并且减少维生素D补充或停用等诸多因素，出现随着年龄增长维生素D水平逐渐下降现象。研究还发现，本地区3岁后儿童血清25（OH）D 充足率仅为13.55%，因此，应重视3岁后儿童的维生素D补充，加强防治儿童维生素D缺乏或不足现象。

体内维生素D大约90%的来源是经日光照射后皮肤合成，但皮肤合成维生素D的量主要取决于纬度、季节、日照角度和日照时间等因素[6]。本研究比较不同季节来院体检的儿童的血清25（OH）D水平及营养状态，发现春、秋季的儿童血清25（OH）D 水平高于夏、冬季（P＜0.05），而夏、冬季的儿童血清25（OH）D缺乏率高于春、秋季（P＜0.05），昆明属北纬低纬度亚热带-高原山地季风气候，气候温和，四季日照充足，夏季温度相对较高和冬季温度相对较低，儿童户外活动时间少，日照暴露不足，而春、秋季气温较为凉爽，气候适宜，儿童户外活动时间长，日照暴露充足。本地区四个季节儿童血清25（OH）D 充足率均不足40%，显示单纯靠日光照射后经皮肤合成维生素D的量可能满足不了儿童对维生素D的营养需求，应重视儿童维生素D的补充。

综上所述，昆明地区儿童血清25（OH）D营养状况欠佳，本研究中50.00%以上儿童都存在维生素D缺乏现象。因此，应加强维生素D健康宣传工作，提高儿童血清25（OH）D 的监测，增加摄入富含维生素D食物，结合本地区情况注重不同性别、年龄以及季节的维生素D补充。