肿瘤及血液病患者血清sTRAIL表达及与IL-6和Hepcidin水平的相关性研究

王秋云，严 敏，程 珍，潘湘涛

（苏州大学附属太仓医院，江苏苏州 215400）

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）是肿瘤坏死因子家族成员,能快速诱导不同种类的转化细胞、肿瘤细胞和病毒感染细胞凋亡。TRAIL有膜结合型和可溶性（sTRAIL）两种形式，大量研究表明sTRAIL 在各种感染、自身免疫性疾病中可以发生明显变化，提示其与自身免疫等相关疾病的发生发展有关。肿瘤相关性贫血是一种特殊的慢性病贫血，其发病机制主要与肿瘤患者的慢性炎症状态导致细胞因子过度表达有关[1]。现有的研究表明白介素-6（interlukin-6,IL-6）是肿瘤患者重要的炎症因子之一，可引起铁调素（hepcidin,Hepc）的高表达，继而导致机体对铁的失利用和贫血[2]。目前Hepc 与肿瘤相关性贫血之间的关系已基本明确，而对sTRAIL 在肿瘤和血液疾病中的表达情况及特点的研究目前还不多见。因此本研究检测了51例患者的血清sTRAIL，Hepc，IL-6，血清铁蛋白（serum ferritin,SF）及血红蛋白（Hb）水平，以探讨sTRAIL，IL-6和Hepc 在肿瘤及血液病中的表达特点及临床意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象 本研究共纳入2018年8月～2019年6月期间我院铁代谢异常的肿瘤及血液病34例及17例健康志愿者（对照组）作为研究对象，其中男性17例，女性34例，年龄21.0～85.0岁（平均年龄52.5岁）。34例患者均为住院病例，其中实体肿瘤患者18例（包括卵巢癌4例、肠癌4例、肺癌3例、乳腺癌3例、胃癌2例、宫颈癌和汗腺癌各1例）；血液系统疾病16例，其中再生障碍性贫血（AA）6例，骨髓异常增生综合征（MDS）3例，自身免疫性溶血性贫血、急性髓系白血病和巨幼细胞性贫血各2例，G6PD缺乏症1例。对照组17例进行全面检查排除各种疾病，特别是影响铁代谢的疾病。

1.2 仪器与试剂 sTRAIL 和Hepc试剂由苏州跃亚生物技术有限公司提供，检测仪器为芬兰labsystems Multiskan MS(型号352型)。SF和IL-6检测试剂由罗氏公司提供，仪器为罗氏公司COBAS601 电化学发光仪。Hb 测定应用Coulter-Beckman 五分类血细胞检测仪。

1.3 方法 sTRAIL 和Hepc 检测应用ELISA 方法。SF 和IL-6 检测应用电化学发光法测定。Hb 应用常规方法检测。

1.4 统计学分析 采用SPSS 23.0 软件，分别采用单因素方差分析（F检验）比较多组之间均值差异，多个均数之间的两两比较采用q检验，数据之间的相关性分析采用Pearson 相关分析。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组研究对象血清sTRAIL，IL-6，Hepc 和SF 测定结果 见表1。三组研究对象的Hb 均值为109.7±21.56g/L（95%CI 为100.68～118.77g/L），sTRAIL 均值为269.91±89.74pg/ml（95%CI 为236.81～303.00pg/ml），Hepc 均值为54.37±6.19μg/L（95%CI为48.12～60.62μg/L），IL-6 均值为6.10±1.32mg/ml（95%CI 为3.18～9.02mg/ml）和SF 均值 为475.24±115.69ng/ml（95%CI 为341.72～608.76ng/ml）。三组之间比较应用方差分析F检验，差异均有统计学意义（F=5.69～31.53，均P＜0.05）。

表1 肿瘤、血液和志愿者分组各项指标的测定结果和比较（±s）

表1 肿瘤、血液和志愿者分组各项指标的测定结果和比较（±s）

检测项目 肿瘤组(n=18)血液病组(n=16)对照组(n=17) F值 P值对照组/血液病组 对照组/肿瘤组 血液病组/肿瘤组q P q P q P Hb(g/L) 112.72±20.40 76.31±27.42 138.00±10.54 37.71 0.000 8.05 0.000 4.74 0.000 4.03 0.000 sTRAIL（pg/ml) 357.97±101.88 297.44±78.72 150.74±43.08 31.53 0.000 6.67 0.000 7.76 0.000 2.11 0.043 Hepc（μg/L） 61.16±19.64 67.54±19.50 34.78±11.91 1.74 0.000 8.14 0.000 6.21 0.000 2.55 0.616 IL-6(mg/ml) 4.60±3.14 12.49±11.69 1.66±0.28 5.69 0.009 4.62 0.032 3.42 0.039 1.29 0.865 SF（ng/ml） 530.50±381.91 807.44±543.12 104.06±88.28 14.10 0.000 6.90 0.000 5.26 0.000 2.17 0.511

2.2 相关分析结果

2.2.1 Hb与SF，Hepc 和sTRAIL之间的相关性：分别对51例研究者的Hb与SF，Hepc 和sTRAIL之间，SF与Hepc和sTRAIL之间，以及Hepc与sTRAIL之间进行相关性分析。结果显示，HP与SF，Hepc，sTRAIL呈显著负相关（r=−0.487，−0.379，−0.308，P=0.000，0.000，0.028）；SF与Hepc，sTRATL呈正相关（r=0.350，0.544，P=0.012，0.000） ；Hepc 与sTRAIL呈正相关（r=0.321，P=0.022），差异均有统计学意义。

2.2.2 IL-6 与Hb，SF，Hepc和sTRAIL之间的相关性：对IL-6与Hb，SF，Hepc和sTRAIL 之间进行相关分析，结果显示IL-6 与Hb 呈负相关（r=−0.341，P=0.021），与SF和sTRAIL均呈正相关（r=0.342，0.311，P=0.020，0.025），而与Hepc无相关性（r=−0.002，P＞0.05）。

3 讨论

贫血是肿瘤患者最常见的并发症，其严重影响患者的生活质量，并且是肿瘤患者的独立不良预后因素[3]。目前国内外对于肿瘤患者血清Hepc 水平与SF 和Hb 水平之间关系等方面的研究较多[4-5]，已经证实炎症介导肿瘤相关性贫血患者的Hepc 水平偏高，继而造成铁失利用而表现为SF水平升高和Hb 水平下降。炎症指标的升高主要表现为血清IL-6 水平和C 反应蛋白（CRP）升高。本研究表明肿瘤和血液病组患者的血清IL-6，Hepc 与SF水平均明显高于对照组，而Hb 水平则明显低于对照组，差异均有统计学意义；同时Hb 与SF，IL-6和Hepc 呈负相关，SF 与IL-6和Hepc 呈正相关，差异均有统计学意义。上述结果和我们既往的研究相一致[2-3，4-6]。但IL-6 与Hepc之间的相关分析结果无统计学意义，与既往研究不同[2]，可能与本组资料中疾病种类较多而总病例数相对较少有关，特别是AA 和MDS 患者本身因为大量的输血等因素而造成铁过载，从而掩盖了IL-6，SF 与Hepc之间的真实关系。

我们发现血液病和肿瘤患者血清sTRAIL 水平均显著高于对照组，差异有统计学意义，并且与IL-6，SF 和Hepc 均呈正相关，而与Hb 水平呈负相关，提示sTRAIL表达与铁代谢有一定关系，可能是通过参与了IL-6 升高导致Hepc 升高，从而使SF 升高、Hb 下降这一慢性病贫血（包括肿瘤相关性贫血）的发生发展的途径而发挥作用。有文献报道，无论是在正常生理或病理条件下，幼稚有核红细胞均易受sTRAIL 诱导细胞凋亡的影响[7]；也有学者[8]在研究MDS 与TRAIL之间的关系时发现，MDS 患者骨髓血中TRAIL 水平升高会影响红细胞的生成，同时也会加重贫血的程度，而在急性白血病和正常对照组中均无相似结果[9]，本研究结果与上述文献结果基本一致。另外，LIU 等[10]在研究重型再生障碍性贫血（SAA）时发现NK 和Treg 细胞的TRAIL表达高于正常对照组，但在CD8+细胞的表达则低于正常组，他们认为SAA 患者NK 和Treg 细胞受到信号抑制无法发挥正常免疫调控作用，但过度激活的CD8+细胞则可以逃逸这一抑制作用，从而激活骨髓造血细胞损伤TRAIL 信号通路失调、促进CTL 活化、加快疾病的进展这一通路。韩曦瑶等[10]通过对17例炎症性疾病和18例肿瘤患者的研究发现sTRAIL 和Hepc 均高于正常对照组，并且两者有相关关系。从现有文献报道结果看，sTRAIL 参与了感染性相关疾病、自身免疫性疾病、肿瘤和血液病患者的造血过程，对Hb 水平有负调控作用[9-10]。

由于本组中血液病和实体肿瘤的病例数均较少，因此未能对sTRAIL 和Hepc表达与贫血的程度、肿瘤的临床分期和预后等之间的关系作进一步分组分析，对此有待于今后扩大病例数进一步深入研究。

总之，在肿瘤和血液病患者中，血清sTRAIL表达与IL-6和Hepc 等之间有相关性，sTRAIL 可能参与了体内红系祖细胞增殖分化及对铁的调控机制，并对Hb 水平有负调控作用。