液相色谱

王海澍

罂粟壳俗称大烟，是罂粟科植物罂粟的干燥果壳，含有吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁、蒂巴因等20多种活性生物碱。这些生物碱能使人体处于一种特殊的愉悦状态，并逐渐产生依赖性，进而成瘾。长期食用会引起精神失常，出现幻觉，甚至会导致呼吸停止而死亡，严重危害人体的健康，对社会危害很大。在近期市场监督管理局开展的打击食品违法添加执法行动中，仍发现多家餐饮服务单位经营的食品中含有该类生物碱，存在涉嫌违法添加行为。因此，火锅食品中5种生物碱的测定研究可为食品监管部门提供技术支持，在保障食品安全方面具有重大意义。

1. 仪器设备：安捷伦液相色谱-质谱联用仪1260-6460（软件版本 ：MassHunter Version B.06.00）

2. 试剂及标准物质：乙腈、甲酸、乙酸铵、罂粟碱ID：002XiY（EDQM）、那可丁ID：L4A3-CTUK（中国食品药品检定研究院）、蒂巴因FE01201703（Cerilliant）、可待因FE11021502（Cerilliant）、吗啡FE08141515（Cerilliant）、吗啡-D3 FE09181502（Cerilliant）、可待因-D3 FE03101601（Cerilliant）

3. 仪器测试条件：ESI源；正模式；色谱柱：RRHD Eclipse PLUS C18；2.1×50mm，1.8μm；流速0.3mL/ min；梯度洗脱条件见表1。

4. 样品前处理：称取2g（精确到0.01g）样品，置于50mL聚丙烯离心管中，加入150μL同位素内标工作液，再加入5mL水，振摇使分散均匀，加入15mL乙腈涡旋振荡1min，加入罂粟碱提取包，迅速振摇，涡旋1min，以4000转/分钟离心5min，取上清液1.5mL，置于2mL罂粟碱净化瓶中，涡旋混合1min，以10000转/分钟离心2min，移去上清液，0.22μm滤膜过滤待测。

5. 方法检出限及线性回归方程

对配制的系列混合标准工作溶液进行测试，5种生物碱的线性回归方程、相关系数及方法检出限（按S/N=3计）见表2。结果表明5种生物碱的线性良好，相关系数为0.997-0.999。

6. 回收率与精密度

在不含该5种生物碱的火锅调料中，分别添加含量为25、50、250μg/ kg三个浓度水平的标样，每个水平平行测定6次，其回收率和相对标准偏差（RSD）见表3。

7. 結论

罂粟碱、那可丁和蒂巴因采用外标法定量，吗啡和可待因采用内标法定量。实验结果表明，5种生物碱在0-75ng/ mL范围内具有良好的线性关系，相关系数为0.997-0.999，方法检出限为0.69μg/kg-1.82μg/kg，5种目标化合物的平均添加回收率为94.75 %-118.02 %，RSD均小于5.0%。本方法具有前处理简单、快速、结果准确可靠等优点，可用于火锅食品中多种生物碱的同时检测。