双抗原夹心ELISA法检测抗-HCV的临床价值研究

曹琳

（阜新市中心血站检验科，辽宁 阜新 123000）

丙型肝炎作为常见传染性疾病，多由丙型肝炎病毒（HCV）感染所致，由于HCV在体内持续存在，易诱发肝硬化甚至肝癌[1]。目前经血液制品或血液传播已成为HCV经典传播途径，故为控制HCV 传播，丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）检测已成为献血者重要检查项目[2-3]。抗-HCV主要通过酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测，既往多使用间接ELISA法，但由于血清中IgG 等影响，间接ELISA 法检测抗-HCV 假阳性较高。双抗体夹心 ELISA 法能测定 IgG、IgM 等总抗体，避免 IgG 对检测结果的影响[4]。鉴于此，本研究旨在探讨双抗原夹心ELISA法检测抗-HCV的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2018 年1 月至2019 年12 月在血站无偿献血的486 份标本为研究对象，献血者男272 例，女214例；年龄22～67 岁，平均年龄（44.18±5.06）岁。采用荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）进行血液筛查，其中抗HCV阳性标本、抗HCV阴性标本分别为19例、467例。本研究经本院伦理委员会审核批准。纳入标准：年龄22～70 岁；无严重心肾并发症；标本采集符合要求；临床资料完整；患者对研究知情并签署知情同意书。

1.2 方法 收集无偿献血筛查标本，3 000 r/min离心10 min，分离血清，分别采用间接ELISA法、双抗体夹心ELISA法测定抗-HCV，检测应用酶联免疫分析系统（瑞士TECAN 公司，Freedom Evolyzer 型），北京万泰生物药业股份有限公司提供血筛间接ELISA试剂盒、双抗原夹心ELISA试剂盒。

1.3 观察指标 观察间接ELISA法、双抗体夹心ELISA法诊断抗-HCV 结果，并以荧光定量PCR 血液筛查结果作为金标准，计算间接ELISA法、双抗体夹心ELISA法诊断抗-HCV特异度、敏感度及准确率。敏感度=真阳性/（真阳性+假阴性）×100%；特异度=真阴性/（真阴性+假阳性）×100%；准确率=（真阳性+真阴性）/（真阳性+假阴性+假阳性+真阴性）×100%。

1.4 统计学方法 采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析，计数资料用组间（%）表示，比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 间接ELISA 法诊断结果 间接ELISA 法诊断抗HCV 阳性、抗 HCV 阴性分别为 96 例、390 例，间接 ELISA 法诊断抗-HCV 敏感度、特异度、准确率分别为63.16%（12/19）、82.01%（383/467）、81.28%（395/486），见表1。

表1 间接ELISA法诊断结果

2.2 双抗体夹心ELISA 法诊断结果 双抗体夹心ELISA法诊断抗HCV阳性、抗HCV阴性分别为28例、458例，双抗体夹心ELISA 法诊断抗-HCV 敏感度、特异度、准确率分别为94.74%（18/19）、97.86%（457/467）、97.74%（475/486），见表2。

表2 双抗体夹心ELISA法诊断结果

2.3 间接ELISA法、双抗体夹心ELISA法诊断结果比较 双抗体夹心ELISA 法诊断抗-HCV 敏感度、特异度、准确率均高于间接ELISA法，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 间接ELISA法、双抗体夹心ELISA法诊断情况比较

3 讨论

HCV属于单股正链RNA病毒，人群普遍易感，多数HCV患者感染初期无典型症状，但随着病情进展，会诱发肝脏慢性炎症坏死及肝功能衰竭，严重者将发展为肝癌，影响患者生存质量，甚至危及其生命安全[5]。目前尚无有效的HCV 预防疫苗及治疗药物，故根据传染源、传播途径，早期筛查并诊治已成为控制丙型肝炎传染的重要方法[6]。

核酸、抗原及血清学检测为血站中常用检测技术，每种方法均具有各自特点及使用范围，其中间接ELISA法作为检测抗-HCV较为常用血清学方法，检测特异度较高，但由于该检测试剂多采用二抗作为酶结合物，血清中IgM抗体出现时间早于IgG 抗体，故在HCV 感染早期实施间接ELISA 法检测易出现漏诊现象[7-8]；同时，间接法ELISA 法检测受抗原制备技术影响，血清中IgG抗体水平较高，其中非特异性IgG抗体吸附易导致假阳性，尽管检测前采用稀释处理能降低IgG抗体水平，但操作较复杂，仍无法完全避免假阳性现象[9]。孙强等[10]研究中比较分析双抗体夹心ELISA 法、间接ELISA 法检测HCV临床价值，其研究结果显示，双抗体夹心ELISA法诊断HCV 特异度、敏感度高于间接ELISA 法（P＜0.05），且其能提升HCV诊断准确率，对控制HCV感染及传播具有重要意义。本研究结果显示，双抗体夹心ELISA 法诊断抗-HCV 敏感度、特异度、准确率高于间接ELISA 法，与上述研究结果较为相似，表明，与间接ELISA法比较，双抗原夹心ELISA法检测抗-HCV敏感度、特异度及准确率较高，能避免间接ELISA法检测中假阳性、假阴性较高的弊端，进而降低假阳性血液报废量，减少献血样本的浪费，建议在无偿献血中采用双抗原夹心ELISA 法测定抗-HCV。双抗原夹心ELISA 法已在梅毒抗体、抗HBsAg 抗体检测中广泛应用，能检测包括IgG、IgM 等总抗体，缩短窗口期，对患者机体内相关抗体实施2 次特异性反应，能减少非特异性IgG影响，改善间接ELISA法检测中假阳性较高的不足，且双抗原夹心ELISA法加样量增加，能避免由于加样所致的试验误差，提高抗-HCV诊断效能[11-12]。

综上所述，双抗原夹心ELISA 法检测抗-HCV 敏感度、特异度及准确率较高，有利于提升抗HCV 阳性检出率，降低由于生物学假阳性所致的血液报废及献血者流失，可作为血液样本抗-HCV筛查优选方法。