MGCT法对输血科血型鉴定准确率及不同疾病阳性分型的影响

陈贵存

（河南省濮阳市安阳地区医院输血科 安阳455000）

不规则抗体指ABO血型系统之外的抗体，其中最常见的为Rh血型。不规则抗体是导致新生儿溶血病、血型鉴定困难、输血不良反应的重要原因，对既往有输血史、妊娠史患者，通过检验不规则抗体可有效提高输血安全、预防新生儿溶血病[1]。血型鉴定与输血安全密切相关，提高血型鉴定准确率是确保输血安全的重要保障，与患者生命安全息息相关。既往研究通过盐水法、蛋白酶法、聚凝胺法进行血型鉴定，配血时需反复洗涤红细胞，操作复杂、繁琐，对结果造成一定影响，降低检验灵敏度。微柱凝胶抗人球蛋白试验（Microcolumn Gel Coombs Test,MGCT）法对血液样本需求量少，污染相关影响较小，在输血检验中具有较高灵敏度，有助于快速匹配血型[2]。本研究将MGCT法应用于ABO、Rh（D）血型鉴定及不规则抗体检测，以分析其临床价值。现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院2018年10月～2020年3月输血科患者1 255例，其中男704例，女551例；年龄22～53岁，平均（37.51±7.08）岁；合并妊娠史247例，合并输血史116例。

1.2 入组标准（1）纳入标准：年龄18～60岁；无严重血液科疾病；新鲜血液标本。（2）排除标准：合并严重脏器功能障碍、免疫抑制相关疾病、感染性疾病。

1.3 检测方法 均以MGCT法、凝聚胺法鉴定ABO及Rh（D）血型。标本采集：抽取空腹静脉血2 ml，置入抗凝真空无菌采血管。（1）MGCT法检测：选择长春博迅生物技术有限责任公司的凝胶卡标记，将谱红细胞以低离子溶液配成0.6%～0.7%浓度，共3份，加入50μl至所标记微管；分离血浆，分别在1、2、3孔加入50μl血浆，并对应加入50μl不规则抗体筛查谱细胞；置入孵育器15 min，温度设置为37℃；以离心机进行离心操作，以900 r/min转速离心2 min后，再以1 500 r/min转速离心3 min；判断结果。对MGCT法检出阳性者行分型检测，分别于Ctrl、IgG、C3d孔中加入1%红细胞悬液50μl，孵育结果与上述方法一致。（2）凝聚胺法：选择中山市生科试剂仪器有限公司的凝聚胺试剂盒，依次标记相同试管3个为对照管、主测管及次测管；主测管及次测管取献血者1滴4%左右红细胞滴入受血者血浆，对照管取献血者1滴4%左右红细胞滴入阳性对照组血浆；均给予低离子溶液0.65 ml、凝聚胺溶液2滴，混匀后室温下孵育；以离心10 s，转速3 400 r/min，取0.1 ml上层清液检测凝聚反应，若无凝聚反应则表明试验失败。（3）统计不统疾病MGCT法检出阳性分型情况。

1.4 判定标准（1）MGCT法。阳性：红细胞聚集块在凝胶中端或表面，或出现溶血反应，表明献血者与受血者交叉配血不合。阴性：红细胞沉降在底部，表示献血者与受血者交叉配血相合。（2）凝聚胺法。显微镜下未见凝集则表示受血者及献血者交叉配血相合，若出现凝集则表示配血不合。

1.5 观察指标（1）统计MGCT法与凝聚胺法对ABO及Rh（D）血型鉴定结果。（2）统计MGCT法与凝聚胺法不规则抗体检出情况。（3）对MGCT法检出阳性者行分型检测

1.6 统计学分析 通过SPSS22.0统计学软件处理数据，计量资料以（±s）表示，行t检验，计数资料以%表示，行χ2检验，检验标准α＝0.05，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 MGCT法与凝聚胺法ABO及Rh（D）血型鉴定结果比较MGCT法ABO血型鉴定准确1 246例，凝聚胺法ABO血型鉴定准确1 214例，两种方法比较，MGCT法ABO血型鉴定准确率99.28%（1 246/1 255）高于凝聚胺法96.73%（1 214/1 255）（χ2=20.896，P＜0.001）。MGCT法Rh（D）血型鉴定准确1250例，凝聚胺法Rh（D）血型鉴定准确1 226例，两种方法比较，MGCT法Rh（D）血型鉴定准确率99.60%（1 250/1 255）高于凝聚胺法97.69%（1 226/1 255）（χ2=17.174，P＜0.001）。

2.2 MGCT法与凝聚胺法不规则抗体检出情况比较MGCT法不规则抗体检出率1.20%与凝聚胺法0.64%比较，无明显差异（P＞0.05）。见表1。

表1 MGCT法与凝聚胺法不规则抗体检出情况比较[例（%）]

2.3 MGCT阳性分型检出结果MGCT法检出阳性者中存在IgG型37例、C3d型5例、IgG+C3d型13例。见表2。

表2 MGCT阳性分型检出结果（例）

3 讨论

若输注的红细胞与机体血清免疫抗体不合，则会导致严重输血反应，因此临床输血前需对有输血史、妊娠史患者进行不规则抗体筛查。为预防输血不良反应发生，美国血库协会规定进行交叉配血前需检测红细胞抗原中的不规则抗体。常规输血前检查方法如凝聚胺法操作过程繁琐，受人为因素影响较大，自动化程度低，检测准确率、效率受到一定影响。输血患者多为危重症，输血不及时会增加致死风险，而输注血型不合则出现抗凝现象，因此，快速、有效进行不规则抗体检测及血液配对极为重要。

免疫溶血反应是输血严重不良反应，其中以不规则抗体所致居多。本研究通过MGCT法、凝聚胺法检测均发现不规则抗体抗-C、抗-c、抗-D、抗-E，且上述抗体皆属于免疫球蛋白G（IgG）抗体。IgG抗体是由输血免疫刺激产生，属温抗体，具有红细胞致敏作用，同时IgG效价强弱会直接影响输血反应，可诱发迟发性溶血性输血反应[3]。本研究经检测，MGCT法不规则抗体检出率为1.20%，凝聚胺法不规则抗体检出率为0.64%。陈丽娟等[4]在分析不规则抗体筛查阳性结果时发现，不规则抗体筛查阳性率为1.16%（22/1 896），与本研究MGCT法检测结果相近，证实本研究结果可靠。而本研究中MGCT法不规则抗体检出率略高于凝聚胺法，其原因可能在于IgG抗体分子长度仅为24 nm，分子链较短，难以有效凝聚。

本研究中MGCT法ABO及Rh（D）血型鉴定准确率均高于凝聚胺法（P＜0.05），提示MGCT法可提高ABO及Rh（D）血型鉴定准确率。凝聚胺法以低价离子介质破坏红细胞表面负电荷并促使其聚集，加入凝聚液后通过凝集情况判定结果，凝集散开代表非特异性，凝集不散开代表特异性。但凝聚胺法结果受存放时间长短、液体加入量多少等因素影响，导致血型鉴定准确率有所降低。而MGCT法是新型血型配对方法，是由凝胶分子技术与抗原抗体反应相结合而形成的产物，可通过系统进行离心速率调整，通过控制凝胶浓度调节分子筛孔径大小，凝胶颗粒网能快速分离凝结及非凝结红细胞，单一微柱孔径仅允许1个红细胞通过，若红细胞凝结无法通过则表示为阳性，若红细胞通过则表示为阴性[5～6]。MGCT法通过标准化定量操作降低操作人员对结果评判的主观性，且重复性好，分离游离红细胞及凝集红细胞后可清晰显示检测结果，检测结果确切、客观，可最大程度避免人为因素对结果的干扰。与传统检测方式相比，MGCT法灵敏度较高，金燕萍等[7]报道称MGCT应用于临床不规则抗体鉴定，灵敏度可达97.96%，对确保输血安全有重要价值。因此，MGCT法有助于提高不规则抗体检出准确率。

本研究对不同疾病MGCT法阳性患者进行分型检测，发现IgG型明显较多，而通过对不同疾病患者进行分型检测，有助于明确该疾病严重程度，对辅助疾病诊断有积极作用。另外，MGCT法精简红细胞洗涤过程，操作更为简单，对检测标本量需求较少，尤其适用于大面积烧伤、婴幼儿等难以采集血液标本患者，适用性广，且标本保存时间长，便于后续行回顾性研究或原始资料查找。

综上所述，MGCT法具有操作简便、灵敏度高等优势，应用于输血科ABO及Rh（D）血型鉴定可明显提高准确率，有效检出不规则抗体，同时可辅助疾病诊断，评估疾病严重程度，具有较高应用价值。