酶标仪在艾滋病血液检验上的应用探讨

辽宁省抚顺市疾病预防控制中心 （辽宁 抚顺 113006）

内容提要：目的：探讨分析酶标仪在艾滋病血液检验上的应用效果。方法：2019年11月～2019年12月选取本中心获取的艾滋病血液为研究对象，采用酶标仪对艾滋病血液进行检验，以血液分析仪的检测结果做对比，分析检验效果。结果：选取3份血清，分别采用酶标仪、血液分析仪进行检测，进行20次的批内、批间重复检测。其中酶标仪检测的批内精密度、批间精密度均大于血液分析仪（P＜0.05）。艾滋病血清的活性升高至160卡门单位时，检测结果非线性关系。显色10min～90min内，比色相对稳定，其中显色10min时时比色最理想的时候。标本回收率分别是93.8%、97.7%、102.1%，平均97.9%。结论：艾滋病血液检验采用酶标仪进行检测，测定效果相对理想，可稳定、准确、快速、微量的提升检测效率，可有效减少检测成本，再者酶标仪检测简单好操作。

艾滋病属于临床常见性病，主要传播方式性传播。截止至2019年12月31日，我国约有100万艾滋病患者[1]。有研究[2]指出，若艾滋病患者不能及时确诊疾病、及时进行有效治疗，有可能诱发疾病，也有可能会将艾滋病传染他人，增加艾滋病的发病率，威胁公共卫生健康，也会对患者自身的生命健康造成严重影响。现今，临床尚未推出有效且理想的艾滋病诊断手段，多数患者在确诊疾病后，由国家免费治疗，但治疗效果不佳。且临床现今应用的诊断方法有比较严重的误诊、漏诊现象[3]。随着医学检测技术的飞速进步，很多简单、先进、有效、准确的检测手段在临床得到推广应用。本研究主要分析酶标仪在艾滋病血液检验上的应用效果，现研究报道如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

2019年11月～2019年12月选取本中心获取的艾滋病血液为研究对象。

1.2 仪器与试剂

Anthos 2010型酶标仪、UBA微量加样器、离心管（0.2mL聚苯乙烯规格）、酶标版、edp-2自动加样器。

1.3 方法

1.3.1 试验准备。酶标仪按照要求编制程序，并按照程序打印分吸光度值与测定值。并且，酶标仪需根据本次试验的检测内容校准相应的波长，并做好比色检测。在选中酶标仪中添加空白试剂，并在仪器上比色，打印不同孔洞的吸光度值、测定值。校准自动加样器、微量加样器，保证加样器的准确度无差异小于等于±1%，变异系数均小于1%。

1.3.2 采血方法。本试验需要的血样不多，可在患者的耳垂、手指末梢部位常规刺入采血，使用微量吸管将血吸住，并将血液注入小离心管（0.2mL规格）中，在血液充分凝固后进行离心分离，连续离心分离5min，离心分离的速度为3000r/min。然后在96孔规格的酶标板上将第一孔、第二孔作为本次试验的空白对照组，将第三孔、第四孔作为标准孔，每个标准孔都是双控，其余孔均为测量孔。本次试验的测定总量是300μL，操作孔的每个步骤均需按照试剂盒、仪器的说明书进行。

1.4 统计学分析

采用 SPSS19.0 进行统计分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 酶标仪的批内精密度、批间精密度

选取3份血清，分别采用酶标仪、血液分析仪进行检测，进行20次的批内、批间重复检测。其中酶标仪检测的批内精密度、批间精密度均大于血液分析仪（P＜0.05），详情见表1。

表1.酶标仪的批内精密度、批间精密度(%)

2.2 线性范围

通过等渗盐水将具有高活性的艾滋病血清作为试验标本，测定相应的线性范围。线性范围测定结果显示：艾滋病血清的活性升高至160卡门单位时，检测结果非线性关系。此时，应该使用等渗盐水充分稀释标本后，再进行检测，才可获得有效检测效果。

2.3 稳定性试验

选取1份血清测定艾滋病的生成量，并添加NaOH（浓度是0.4mmol/L），在显色后不同时间点（5min、10min、15min、30min、60min、120min）进行比色，结果显示，显色10min～90min内，比色相对稳定，其中显色10min时时比色最理想的时候。

2.4 回收率

充分混合后按照艾滋病检测方法进行测定。回收结果显示，标本回收率分别是93.8%、97.7%、102.1%，平均97.9%。

3.讨论

上世纪七十年代，在酶联免疫组织化学的基础上衍生了酶联免疫吸附试验，该试验迅速在临床应用，并在应用过程中不断发展革新，逐步完善，如今酶联免疫吸附试验已经是一种比较成熟、检测准确性有一定保障的检测手段[4]。再者，随着酶联免疫吸附试验在临床多个领域的应用，临床逐步发现了该试验用于检测的优势，并在疾控中心、医疗机构、检疫部门、血站等机构广泛应用。因为大多数酶联免疫吸附试验都需要应用比色测定，所以酶标仪逐步成为酶联免疫吸附试验中最重要的一项工具。

艾滋病一直以来都是严重危害公众身心健康的一种传染性疾病，艾滋病的筛查工作一直未曾停止，筛查范围逐步扩大，筛查手段逐步优化，筛查出艾滋病患者逐步增加。而酶标仪检测在艾滋病的筛查中起到了非常重要的作用。酶标仪的软件功能、光学系统都比较精密，其中软件功能可有效控制检验程序的整机测量处理，并且可以显示或打印检测结果。而光学系统是一种基于朗伯比尔定律基础的系统，可在高检测速度与高精密度基础上完成批量检测工作。再者，酶标仪还是一个具有多用优势的仪器，不仅可以进行单纯的免疫学试验，还可以进行多种化学检验。临床大量研究指出，酶标仪用于临床检测，具有采血量少、检测方法稳定、节约试剂等优点。本研究按照酶标仪的操作步骤说明一一进行，不仅完成了精密的比色，还配置了相应的附件，按照标准操作要求、检验项目程序完成采血、离心、检测等工作。最后得出结果，相较于血液分析仪，酶标仪测定的批内精密度、批间精密度更为理想，临床应用价值更高。

由上可知，艾滋病血液采用酶标仪检测，检测效果理想，精密度高。