两种消毒药剂消毒桑叶对家蚕原种繁育的影响

谭福洋，冉艳萍，兰艳妮，李枫烨，杨杰，莫炳巧，莫显风，浦月霞*

（1.广西壮族自治区蚕业技术推广站，南宁市 530007；2.宜州区桑蚕循环经济发展中心，河池市 546300）

桑叶消毒是原种繁育防控微粒子病的有效途径。氯制剂是目前应用最为广泛、种类数量最多且最有发展前途一类消毒剂，主要是通过次氯酸的强氧化作用，使病原微生物蛋白质变性、凝固、酶失活从而起到消毒作用［1］。氯制剂可分为无机氯制剂和有机氯制剂，前者主要有漂白粉、次氯酸及其盐类等，后者主要有氯化异氰尿酸及其盐类等［2］。漂白精的主要成分为次氯酸钙，属于无机氯制剂。广西壮族自治区蚕业技术推广站原种繁育科从2004年启用桑叶消毒至今，一直沿用漂白精作为桑叶消毒的消毒药剂，具有效果好，成本低，易保存，稳定性好等优点，但漂白精腐蚀性强，不易漂洗，残留物质多，对蚕室环境及周围环境造成污染。三氯异氰尿酸药剂属于有机氯制剂。主要成分为三氯异氰尿酸，作为广谱消毒药剂，具有消毒效果佳、精简实用性强及可添食等诸多优点［3］，高效、低毒和广谱性等特点更符合产业可持续发展的要求。王玉华等［3］的研究也表明该类药剂可杀灭病毒、芽孢以及分生孢子。为了探明主要成分为三氯异氰尿酸的药剂与常用的漂白精在消毒桑叶后，对家蚕原种繁育的成绩和微粒子病防控效果是否有影响，本试验以不消毒桑叶为对照，用主要成分为三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）的药剂和漂白精配制消毒液对桑叶进行消毒，比较分析两广二号原种繁育的成绩及微粒子病防控效果，探讨两种消毒药剂的差异性，为原种繁育桑叶消毒选择适合的消毒药剂提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验时间和地点

试验时间为2020年3—7月。试验地点为广西壮族自治区蚕业技术推广站良种繁育与试验示范基地。

1.2 试验材料

家蚕品种两广二号原原种芙蓉、932、湘晖、7532由广西壮族自治区蚕业技术推广站母种组提供，桑叶由广西壮族自治区蚕业技术推广站石埠基地提供。试剂A为三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）（商品名：亚迪欣，由中国农业科学院蚕业研究所附属蚕药厂生产），试剂B为漂白精（主要成分为次氯酸钙和氯化钙，由天津市鑫泽精细化工有限责任公司生产）。

1.3 试验方法

试验对两广二号的4个原原种分别设置处理Ⅰ、处理Ⅱ和对照3个处理。处理Ⅰ：将试剂A按照使用说明，与水按1∶1 000比例配置成消毒液，桑叶在消毒液中浸泡消毒5 min，清洗，脱水、晾干。处理Ⅱ：将试剂B配制成有效氯浓度0.4%消毒液，桑叶在消毒液中浸泡消毒10 min，清洗，脱水，晾干。对照：桑叶采摘后用清水浸泡、清洗，脱水、晾干。每个处理设置3个重复饲育区，每区饲育200头蚕，全龄用对应处理的桑叶饲喂。饲养、防病、上蔟、种茧保护、发蛾交配与制种等操作，参照NY/T 1492—2007《桑蚕原种繁育技术规程》［4］进行。每个处理设置3个重复时间，分别为2020年3月15日—4月21日，2020年5月8日—6月15日，2020年6月20日—7月27日。

1.4 调查项目

试验调查指标为全龄经过，蛹期经过、蚕期病死率、死笼率、全茧量、茧层量、茧层率、蚕卵孵化率、死卵率、不受精卵率。蚕期分区记录各龄病死蚕数量，发育情况；上蔟后第8 d，计数结茧头数和死笼数，随机抽样25粒雄蛹茧和25粒雌蛹茧，电子天平称量全茧重量和茧层重量；产卵后第7 d蚕卵呈固有色时，随机抽样50圈蚕卵调查单蛾产卵量、不受精卵数和死卵数，催青孵化后调查孵化卵数；蚕种微粒子病检验由广西壮族自治区蚕种质量检验检疫站检测。调查项目计算公式如下：

1.5 数据处理

取3个重复批的平均数作为各处理数据，数据采用IBM SPSS 23软件分析，组间组内显著性差异使用单因素ANOVA检验。

2 试验结果

2.1 两种消毒药剂桑叶消毒对两广二号原种繁育全龄经过、蛹期经过的影响

处理Ⅰ、处理Ⅱ、对照3个处理的全龄经过：中系芙蓉、932为21 d，日系湘晖、7532为22 d；蛹期经过：芙蓉为14 d，932、湘晖和7532为13 d。不同处理的全龄经过和蛹期经过表现一致，因此，两种消毒剂消毒桑叶对家蚕两广二号原原种蚕的全龄经过、蛹期经过没有影响，与对照处理的桑叶无差异。

2.2 不同消毒药剂桑叶消毒对两广二号原种繁育体质健康性的影响

由表1可以看出，芙蓉、932、湘晖的蚕期病死率与死笼率经过方差分析后，处理Ⅰ与处理Ⅱ相比无显著性差异。处理Ⅰ与对照、处理Ⅱ与对照相比无显著性差异（P＞0.05）。7532蚕期病死率与蛹期死笼率经过方差分析后，处理Ⅰ与处理Ⅱ、处理Ⅰ与对照相比较无显著差异；处理Ⅱ与对照的死笼率无显著差异，处理Ⅱ与对照的蚕期病死率有显著差异（P＜0.05）；试验结果表明处理Ⅰ与其他两组相比病死率与蛹期死笼率基本无显著差异。

表1 不同消毒药剂桑叶消毒对两广二号原种繁育体质健康性的影响

续表1

2.3 不同药剂桑叶消毒对两广二号原种繁育种茧质量的影响

由表2可以看出，对于品种芙蓉，处理Ⅰ与处理Ⅱ的全茧量无显著差异，但处理Ⅰ、处理Ⅱ与对照都有显著差异；处理Ⅰ、处理Ⅱ、对照的茧层量和茧层率均无显著差异。对于品种932，处理Ⅰ、处理Ⅱ、对照的全茧量相互比较均有显著差异，处理Ⅰ的茧层量与处理Ⅱ和对照均无显著差异，处理Ⅱ的茧层量与对照有显著差异，处理Ⅰ、处理Ⅱ、对照的茧层率均无显著差异。对于品种湘晖，处理Ⅰ、处理Ⅱ的全茧量与对照都有显著差异，处理Ⅰ与处理Ⅱ无显著差异；处理Ⅰ、处理Ⅱ、对照的茧层量和茧层率均无显著差异。对于品种7532，处理Ⅰ、处理Ⅱ的全茧量与对照都有显著差异，处理Ⅰ与处理Ⅱ无显著差异；B的茧层量与对照有显著差异，处理Ⅰ的茧层量分别与处理Ⅱ和对照均无显著差异；处理Ⅰ、处理Ⅱ、处理对照的茧层率均无显著差异。

表2 不同消毒药剂桑叶消毒对两广二号原种繁育种茧质量的影响

2.4 不同药剂桑叶消毒对两广二号原种繁育蚕种质量的影响

由表3可以看出，品种芙蓉、932、湘晖和7532蚕卵的孵化率、死卵率和不受精率经方差分析表明，处理Ⅰ与对照、处理Ⅱ与对照、处理Ⅰ与处理Ⅱ相比均无显著性差异（P＞0.05）。试验结果表明，使用这两种消毒药剂桑叶消毒及是否消毒桑叶，不会影响原种繁育蚕种的孵化率、死卵率和不受精率。

表3 不同消毒药剂桑叶消毒对两广二号原种繁育蚕种质量的影响

2.5 不同药剂桑叶消毒对两广二号原种繁育微粒子病发病率的影响

由表4可以看出，处理不同，家蚕微粒子病发病率不同，芙蓉、932、湘晖、7532四个原原种的处理Ⅰ、处理II都比未经桑叶消毒的处理对照的微粒子病毒率低，其中处理Ⅰ的微粒子病发病率均为0，说明此次试验中，处理Ⅰ中的试剂A消毒桑叶后，比处理II中的试剂B消毒桑叶后，对家蚕的微粒子病的防控效果更好。

表4 不同消毒药剂桑叶消毒对两广二号原种繁育微粒子病发病率的影响

3 讨论和小结

3.1 讨论

3.1.1 两种试剂对原种繁育成绩的影响比较 本试验的研究结果表明，用三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）（试剂A）及漂白精（试剂B）消毒桑叶，对两广二号原种繁育的成绩影响各异，对龄期经过、蛹期经过、蚕卵的孵化率、死卵率、不受精卵率均无影响，但对部分品种的体质指标和茧质指标有一定影响。用三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）及漂白精消毒桑叶不影响芙蓉、932、湘晖的蚕期病死率与死笼率，但对7532的蚕期病死蚕率有影响，降低了病蚕发生率。桑叶经消毒后，表面病原被杀灭，经食下传染的细菌和病毒数量减少，降低蚕病发生率，符合消毒防病的规律。用三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）及漂白精消毒桑叶对全茧量都有一定影响，桑叶消毒后，各品种的全茧量均有不同程度提高，但不影响茧层率。桑叶经消毒清洗后，灰尘、氟化物减少，蚕更喜食，食下量增加，是全茧量的增加的主要原因。

3.1.2 两种试剂对降低微粒子病的影响比较 两种消毒药剂对桑叶消毒后，虽然都能有效降低微粒子病毒率，但是使用三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）后，4种品种的家蚕微粒子病发病率均为0，除家蚕品种7532外，其余3种的微粒子病发病率均低于使用试剂B后的微粒子病发病率，由此可见，三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）对家蚕微粒子病的防控作用要比试剂B更好。三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）与漂白精的消毒原理一致，试验结果处理Ⅰ的微粒子病发病率普遍低于处理Ⅱ，且都为0，主要原因可能是三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）的消毒药理为三氯异氰尿酸在水中形成次氯酸，次氯酸的强氧化作用使病原微生物的蛋白质变性，从而达到让病原微生物死亡的目的。磷酸三钠有助溶催化作用，可以加速氯气的释放，提高消毒效果，对家蚕病毒病、真菌病、细菌病和微粒子病的病原体消毒效果明显，对微粒子病病原体消毒效果更为显著。

3.1.3 两种试剂的实用性比较 两种药剂经使用，三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）对比漂白精，前者具有3大优点：一是成本便宜。配备试剂A溶液的成本为0.002 3元/kg；试剂B溶液为0.06元/kg，试剂配置成本方面三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）是漂白精的1/26。三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）的成品药较漂白精稳定，在当前的包装条件下，前者有效期在2年以上，而后者有效期为6个月左右。二是高效，便利。三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）药品有助溶调节剂的作用，易溶解，即开即用，消毒溶液澄清，便于使用，而漂白精药品溶解速度较慢，需静置等待上清液，消毒溶液混蚀，消毒完毕后残渣较多，使用不方便。三是低毒。三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）产生的刺激性气味少，挥发快，对人体伤害少。

3.2 小结

王玉华等［3］［5］的研究认为主要成分为三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）的广谱消毒药剂300倍溶液对CPV、NPV消毒15 min有效；3 200倍溶液对N.b消毒5 min、对B.t毒素消毒10 min有效；1 600倍溶液对sotto芽孢消毒15 min有效；800倍溶液对A.f及B.b分生孢子消毒10 min有效，并且还表明了该药剂消毒溶液具有药效稳定性高，使用方便及可添食等优点。本次试验则是在前人的基础上，探明该种药剂对家蚕原种繁育成绩的影响和微粒子病防控的效果，与前人研究的文献相比更适用于实际生产。

试验结果表明主要成分为三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）的广谱消毒药剂与漂白精在消毒桑叶后，对两广二号原种繁育的成绩影响各异，对控制微粒子病发生有很好的效果。虽然两种试剂在使用后，4个品种的家蚕的微粒子病率均降低，但是三氯异氰尿酸（辅剂磷酸三钠）消毒药剂对微粒子病的防控效果比漂白精更好。另外，该消毒药剂对原种繁育成绩影响较小，无残留等更符合环保要求，因此推测其可作为漂白精的替代品，用于原种繁育桑叶消毒，鉴于它的广谱性，250倍溶液亦可用于蚕室蚕具消毒。本次试验存在一定的不足之处。一是处理Ⅱ的桑叶浸泡消毒过程中，由于桑叶量大，片叶之间存在粘连，导致有个别叶面没有接触药液，产生消毒不彻底的情况。二是桑叶属于随机采摘，采摘回来处理Ⅰ的片叶没有携带微粒子病毒。生产试验比实验室试验存在的不确定因素较多，从而可能对试验结果产生细微的影响。蚕药是防病重要的物质基础，根据产业的科学发展观和可持续发展战略，蚕药必然向着低毒、高效、广谱性等方向全面创新发展。