淋巴结病理组织免疫组化技术标准化操作的效果分析

陈玉英 郭慧 曹秋霞

（韶关市第一人民医院 广东 韶关 512000）

淋巴结的活检是比较复杂的活检，H E 的诊断是对形态学的分析，主要是判断淋巴结有没有病变，若是产生病变则需要确认是炎症的病变还是肿瘤性的病变，淋巴结的肿瘤非常复杂，有60 多种类型，包括良性和恶性。淋巴瘤的分类，要借助免疫组织化学技术来完成。通过鉴定淋巴瘤存在的某种抗体来进行初步分类，比如分霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤[1]。随着科技和循证医学的发展以及人类经验积累，每一个淋巴瘤的分类都认为是一种疾病，必须用免疫组织化学的方法来鉴定淋巴瘤的确切分类，以便临床医生更精准的治疗疾病[2]。本文对免疫组化技术与标准化操作方法进行比较，现将结果汇报如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年1月—2018年1月我院收治的40例淋巴结患者，随机均分为给予免疫组化技术与标准化操作方法的实验组和仅采用免疫组化技术但不进行标准化操作方法的对照组，各20 例。对照组中男性与女性比例为11 ∶9，患者年龄21 ～78 岁，平均年龄（49.5±6.4）岁，其中10 例颈部淋巴结，6 例锁骨下淋巴结，4 例腹膜后淋巴结；实验组中男性与女性比例为12 ∶8，患者年龄22 ～76 岁，平均年龄（48.4±6.8）岁，其中9 例颈部淋巴结，7 例锁骨下淋巴结，4 例腹膜后淋巴结。两组患者在一般资料上对比差异无统计学意义，所有患者及其家属均知情同意，通过了伦理委员会审批[3]。

1.2 方法

实验组采用免疫组化技术标准化操作方法，对照组采用免疫组化技术但不进行标准化操作方法。

标准化淋巴结组织HE 片方法如下：取材时根据要求的标准控制组织的厚度（0.18cm 适宜）。在4%中性甲醛放置淋巴结组织并进行固定，当使用1 例较多穿刺组织的标本时，应该通过过滤纸包裹每条组织，并在确认组织处于同一平面后放置在脱水盒中。切片厚度2.5μm 较为适宜，将蜡片切成7 片，并随机选择其中一片进行染色，作为HE 切片放置于载玻片上[4]。

免疫组化技术的具体方式如下：采用常规脱蜡后的切片放置于水中，保持室温条件下使用3%甲醇液作用一定时间后，将切片使用蒸馏水和清水进行清洗。在高压锅中放置pH6.0 的1.1L 的柠檬酸，加热2min 后让其自然冷却，再取出使用PBS冲洗2 次，每次2min，添加二抗直至DAB 显色，并比较抗体的阴阳性[5]。

1.3 观察指标

统计记录实验组和对照组的染色切片的优良率，主要评价标准如下：组织结构无破坏，背景清晰、干净，阳性物质定位准确，无特殊着色、脱色情况，此为优；组织结构几乎无破损，背景存在杂质，阳性物质定位稍微偏移，特殊着色、脱色情况不明显，此为良；组织结构破坏严重无法对阳性物质进行定位，存在特殊着色、脱色，此为差[6]。

1.4 统计学处理

采用SPSS20.00 软件处理应用免疫组化技术与标准化操作方法在淋巴结病理组织的相关数据，P ＜0.05 表示差异显著，具有统计学意义。

2.结果

实验组和对照组患者的优良率见表1 所示，实验组的优良率为95.0%，显著高于对照组的60.0%，差异显著（P ＜0.05）。

表1 实验组和对照组优良率比较 [n(%)]

3.讨论

免疫组化即为免疫组织化学，是应用免疫学的基础，是根据抗原和抗体特异结合的原理从而确定细胞内多肽或蛋白质的位置，并对其进行定量以及定性的研究，从而诊断患者的病症。因此，称之为免疫组织化学技术，简称免疫组化，是病理学检查的常用技术[7]。虽然在免疫组化技术最初发展阶段由于技术的限制造成无法充分发挥其作用，但是近几年随着社会的发展、医疗技术的进步，免疫组化技术也取得了极大的进步，对疾病判断具有较高的敏感性。对比发展初期，抗体的稀释程度较低仅仅只有几十倍，但是随着相关技术的突破目前抗体稀释程度大大提升，最大可达到10000 多倍，抗体敏感性提升也极为巨大。但是由于现在缺乏相应统一、确定的标准导致免疫组化技术结果差距较大，造成医生诊断存在偏差。因此统一操作方式尤为重要，特别是利用高压锅加热修复抗原，能够排除多种方式的干扰，时间控制更加准确，染色效果更佳，远远优于微波加热修复抗原的方法，通过逐步完善免疫组化技术能够充分发挥其作用，为医生的诊断提供更加准确的数据。

本文实验组的优良率为95.0%，显著高于对照组的60.0%），差异显著（P ＜0.05）。与王雅萍[1]的结果基本一致，观察组患者的免疫组化染色切片优良率为95.2%，对照组的免疫组化染色切片优良率为56.1%，两组患者之间对比差异显著，差异具有统计学意义（P ＜0.05）。根据本文结果表明通过标准化操作方法能够有效提高免疫组化技术的检测结果，充分发挥免疫组化技术的优势，有利于临床医生进一步掌握患者的病情，

综上所述，应用免疫组化技术标准化操作方法能明显提高切片的优良率，便于临床准确诊断患者的病情，值得在淋巴结病理组织的切片检测中应用。