气相色谱法测定尿塞通片中有机氯类农药残留量

程似锦，李 恒，喻 悦*

(1.长江职业学院 医药护理学院，湖北 武汉 430064；2.武汉药品医疗器械检验所，湖北 武汉 430075)

尿塞通片由丹参、泽兰、红花、赤芍、陈皮、泽泻、败酱等药味制成，具有理气活血、通淋散结的功效，临床用于气滞血瘀、下焦湿热所致的轻、中度“癃闭”，症见排尿不畅、尿流变细、尿频、尿急，前列腺增生见上述症状者[1-3]。丹参、赤芍为尿塞通片主药之一，市面上流通的丹参、赤芍药材商品绝大多数为人工种植品[4-6]。有机氯类农药是广泛应用的杀虫剂，由于其化学性质稳定，难于分解，残留期长，对环境污染严重；其通过食物进入人体，在肝、肾、心脏等组织内蓄积，在人体内累积造成慢性中毒[7-10]。有关中成药中有机氯类农药残留量检测的报道不多[11-12]，准确测定中成药中有机氯类农药残留量，对安全用药具有重要意义。根据总局要求，笔者参照文献[13-15]，结合《中国药典》2015版四部通则“农药残留量测定法”[16]，对抽检8个厂家生产的尿塞通片进行有机氯类农药限量检测，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 7890A气相色谱仪，梅特勒XS105DU型电子天平，HY-5回旋振荡器，SK250LHC超声清洗器。

1.2 试药

尿塞通片，国家评价性抽验的样品，来自8个厂家98批次，见表1。有机氯农药混合对照品溶液(中国食品药品检定研究院，批号：610005-201501，规格：10 μg/mL)；定位用有机氯农药对照品溶液由农业部环境保护科研监测所提供。本次共测定16种有机氯类农药，有机氯农药混合对照品名称、浓度及批号见表2。正己烷为色谱纯，丙酮、二氯甲烷为分析纯。水为娃哈哈纯净水。

表1 98批次样品来源

续表1

续表1

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

分析柱：键合交联14%氰丙基苯基二甲基硅氧烷为固定液(DB-1701)的毛细管柱 J&W 122-0732(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；验证柱：键合交联5%苯基甲基硅氧烷为固定液(DB-5)的毛细管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度：230 ℃；ECD检测器温度：300 ℃；柱温：55 ℃，保持0.5 min，60 ℃/min至160 ℃，5 ℃/min至210 ℃，保持3 min，10 ℃/min至240 ℃，保持3 min，10 ℃/min至280 ℃，保持5 min；脉冲不分流进样；进样量：1 μL；载气流速：1.5 mL/min，恒压模式。理论塔板数按α-六六六计算应不低于1×106，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5[16]。

2.2 溶液制备

2.2.1 混合对照品储备液制备 精密量取有机氯农药混合对照品溶液1 mL，置10 mL量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，即得(每1 mL含农药1 μg)。

2.2.2 混合对照品溶液制备 精密量取上述对照品储备液，用正己烷稀释成每1 mL含0 ng、1 ng(线性1)、2 ng(线性2)、5 ng(线性3)、10 ng(线性4)、20 ng(线性5)、50 ng(线性6)、100 ng(线性7)的系列浓度溶液。

2.2.3 供试品溶液制备 取尿塞通片10片，研细，精密称取粉末约5 g，置具塞锥形瓶中，加水30 mL，振摇10 min，精密加入丙酮50 mL，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠约8 g，精密加入二氯甲烷25 mL，称定重量，超声处理15 min，放冷，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，振摇使氯化钠充分溶解，静置，离心(3 000 r·min-1)3 min，使完全分层，将有机相移入装有适量无水硫酸钠的具塞锥形瓶中，放置30 min。

表2 有机氯类农药混合对照品名称、浓度及批号

精密量取15 mL，于40 ℃水浴上减压浓缩至约1 mL，加正己烷约5 mL，减压浓缩至近干，用正己烷溶解并转移至5 mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，小心加入硫酸1mL，振摇1 min，离心(3 000 r·min-1)10 min，分取上清液，加水1 mL，振摇，取上清液，即得。

2.3 线性及范围

分别精密吸取系列浓度混合对照品溶液(配制方法见“2.2.2 ”混合对照品溶液制备)，注入气相色谱仪，记录色谱图，计算，即得。各待测成分线性关系良好，见表3。

表3 16种农药线性试验结果

2.4 精密度试验

吸取线性5 ( 20 ng/mL)的有机氯农药混合对照品溶液，连续进样6次，计算对照品峰面积RSD为0.31%～1.72%，结果表明仪器精密度良好。

2.5 准确度试验

取君碧莎样品(批号：20150901)1批，取本品10片，研细，取粉末约5 g，精密称定，并精密加入对照品储备液(1 μg/mL)0.5 mL，置具塞锥形瓶中，自“加水30 mL”起，同供试品溶液制备操作，并计算随行回收率，结果回收率在61%～112%。结果见表4。

表4 16种对照品加样回收率试验结果

2.6 产品检测结果

采用本方法共测定了8个厂家98批次尿塞通片样品，结果16种待测农药均未检出，有机氯农药残留量合格率为100%。有机氯农残检查典型色谱见图1。

3 讨论

我国是中药材使用大国，野生中药材已不能满足市场需要，绝大多数中药材为人工种植。中药材在栽培种植过程中常常遭受病虫害的侵蚀，施用农药成为了提高产量的一项栽培措施。但是施用农药后的残留不仅直接降低了药材本身的质量，而且间接影响了用药安全性。本次试验测定了8个厂家共98批次尿塞通片样品，结果16种待测农药均未检出，有机氯农药残留量合格率为100%。本试验采用的前处理方法为磺化法，此方法对复杂制剂的基质净化效果好，色谱图干扰较少，适合有机氯农药残留量的测定；且采用了对卤代烃选择性好、灵敏度高的电化学检测器，所建立的检测方法准确、可行，可用于尿塞通片中有机氯类农药残留量的测定。

1.六氯苯；2.α-BHC；3.PCNB；4.γ-BHC；5.七氯；6.艾氏剂；7.β-BHC；8.δ-BHC；9.氧化氯丹；10.反式环氧七氯；11.反式氯丹；12.顺式氯丹；13. p,p′-DDE；14.O,P′-DDT；15. p,p′-DDD；16. p,p′-DDT