孕晚期孕妇血清不规则抗体变化观察

宋艳，陈君，叶珍

同济大学附属第一妇婴保健院检验科，上海 201204

不规则抗体是指血清中抗A、抗B以外的其他红细胞血型抗体。血清中不规则抗体的产生没有规律，其中多数抗体为IgG类抗体，由妊娠、输血等免疫刺激产生，少数是天然存在的［1-2］。不规则抗体是导致输血不良反应、红细胞输注无效及输血配型困难的重要因素之一［3-4］。妊娠和生产过程中，母体的不规则抗体进入胎儿血液循环中，导致免疫溶血性反应，破坏胎儿红细胞或使其寿命缩短，引起新生儿溶血病，继而导致胎儿贫血、水肿、窒息、围产期死亡和新生儿高胆红素血症［5-6］。随免疫学及诊断技术的发展，临床对不规则抗体的变化也越来越重视。目前临床常见的不规则抗体血型系统主要有MNS系统、RH系统、Lewis系统等［7-8］。国内外诸多指南仅推荐孕妇在妊娠早期（12周左右）和妊娠28周时；进行血型（ABO、RhD）鉴定与不规则抗体检查［9］，目前对孕晚期孕妇血清不规则抗体变化相关报道较少。本研究纳入113例孕妇，分析不同孕期孕妇血清不规则抗体的检查情况。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2018年12月—2019年11月间在本院进行不规则抗体检查的孕妇30 718例，年龄21～44岁，妊娠次数1～7次，孕周8～38周。30 718例孕妇中有170例患者不规则抗体检查阳性，排除57例RH阴性血型孕妇（注射免疫球蛋白导致抗体阳性），最终纳入113例孕妇为研究对象。113例孕妇中孕早中期（≤28孕周）组检出66例（58.40%，66/113）、孕晚期（＞28孕周）组新增检出47例（41.60%，47/113）。本研究经本院伦理委员会批准同意。

1.2 孕妇外周血不规则抗体检查 两组孕妇抽取EDTA抗凝外周静脉血3～5 mL，采用NEO全自动血型分析仪进行不规则抗体检查，抗筛阳性样本采用抗体鉴定谱细胞进一步进行抗体特异性鉴定，同时对红细胞进行直接抗人球蛋白检测。NEO全自动血型分析仪（ImmucorGamma.Galileo Neo）及其配套试剂；抗体筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ；长春博迅）；抗体鉴定细胞（1-10；上海血液生物技术医药有限公司）；低离子抗人球蛋白凝胶卡（达亚美）；抗人球蛋白试剂（上海血液生物技术医药有限公司）。

1.3 孕妇不良妊娠结局观察 观察并记录孕早中期、孕晚期孕妇新生儿溶血、高胆红素血症、死胎引产等不良妊娠结局发生情况。

1.4 统计学方法 采用SPSS 26.0及GarphPad 8.0软件进行数据处理。采用Kolmogorov-Smirnov test与Levene检验对数据的正态性与方差齐性进行检验。计量资料以±s表示，组间比较采用独立样本Student，s t-test检验；计数资料采用%表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

孕早中期孕妇MNS系统中M、N、S不规则抗体阳性分别为24、11、1例，不规则抗体阳性率54.54%（36/66），孕晚期孕妇分别为9、4、1例及29.79%（14/47），二者比较，P＜0.05。

孕早中期孕妇RH系统D、DC、DE、E、Ec、C、Ce不规则抗体阳性分别为2、0、1、3、2、0、1例，不规则抗体的阳性率为13.64%（9/66），孕晚期孕妇分别为1、1、0、8、6、1、4例及44.68%（21/47），二者比较，P＜0.05。

孕早中期孕妇Lewis系统Lea/IgM、Lea/IgG、Leb/IgG、Lea+Leb/IgG不规则抗体阳性分别为5、1、1、0例，不规则抗体的阳性率为10.61%（7/66），孕晚期孕妇分别为3、0、0、1例及8.51%（4/47），二者比较，P＞0.05。

孕早中期、孕晚期孕妇直接抗人球蛋白阳性分别为6、3例，抗体阳性率分别为9.09%（6/66）、6.38%（3/47），二者比较，P＞0.05；孕早中期、孕晚期孕妇其他系统不规则抗体阳性分别为8、5例，抗体阳性率分别为12.12%（8/66）、10.64%（5/47），二者比较，P＞0.05。

孕早中期孕妇发生新生儿溶血5例、高胆红素血症0例、胎死引产2例，不良妊娠发生率6.19%，孕晚期孕妇分别为6、2、0例及7.08%，二者比较，P＞0.05。

3 讨论

文献［10-11］报道，孕妇不规则抗体阳性检出率0.3%～2.0%。本研究共纳入30 718例孕妇进行不规则抗体检查，共检出不规则抗体阳性的孕妇113例，不规则抗体阳性率0.36%。目前不规则抗体检查为本院产前血清学常规检查项目，一般于孕12～16周进行检查。本院于2018年12月将孕晚期不规则抗体检查增加为常规检查项目。通过对30 718例孕妇中抗体筛选检测结果进行分析，共检出不规则抗体阳性113例（其他57例是孕妇为血型为RH阴性，孕妇因注射免疫球蛋白导致抗体阳性引起，不列入讨论），不规则抗体阳性率总体阳性率0.36%（113/30 718）。113例患者中孕早中期（≤28孕周）66例（58.40%，66/113）、孕晚期（＞28孕周）47例（41.60%，47/113）66例为孕早中期检出，占总数的58.40%；47例于孕晚期首次检出，占总数的41.60%。说明孕晚期再次进行不规则抗体检查可提高不规则抗体检出率，发现后期新产生的不规则抗体或因早期效价低而漏检的不规则抗体，进一步为新生儿溶血病的诊断提供依据，尽早进行临床干预，提高患儿预后。同时，临床可为不规则抗体阳性的孕妇提前准备相应的血液，保障孕妇用血安全，避免发生输血反应。

孕早中期检出的不规则抗体主要以MNS系统为主，因为在人类血清里，抗M抗体十分常见，这种抗体的产生大部分都没有红细胞刺激，是天然产生的，通常是以IgM形式存在。IgM类抗体很少有临床意义，一般在人体内不引起溶血反应，在37℃或抗人球蛋白试验阳性时才具有临床意义，但在低温麻醉状态下可能激活人体内的补体发生溶血反应［12］。IgM无法判断是天然产生还是免疫初期产生，一旦产生就要监测评估和预防。另外现在抗M抗体IgG类比例逐渐增高，也可引起新生儿溶血病。本院就已发现几例由抗M抗体引起的新生儿溶血病。所以孕期检出抗M抗体也不容忽视。本研究结果发现，孕早中期阳性抗体鉴定结果中MNS系统占54.54%，RH系统占13.64%，孕晚期新增阳性抗体鉴定结果中MNS系统占29.79%，RH系统占44.68%；通过对孕早中期孕妇与孕晚期孕妇不规则抗体分布情况进行分析，孕早中期孕妇MNS系统不规则抗体阳性比例明显高于孕晚期孕妇；孕早中期孕妇RH系统不规则抗体阳性比例显著低于孕晚期孕妇。

孕晚期新增抗体主要以RH系统为主。这是因为RH系统抗原性仅次于ABO系统，是最复杂的血型系统之一，具有临床重要性。其抗体以IgG为主，主要通过妊娠或输血刺激产生。大量研究表明RH系统中以D的抗原性最强，D抗原引起的溶血反应非常严重，随着对RHD的重视，通过注射抗D免疫球蛋白，能有效地减少抗D抗体产生。如本文中有57例RHD阴性孕妇已采取了预防措施，提前注射了免疫球蛋白。说明在控制抗D抗体的产生、降低新生儿溶血病的发生方面，具有较强的防范意识。RHE是除RHD以外的最强抗原，有多次妊娠和输血史的产妇易产生E抗体，也会产生抗c联合抗体［13-15］，且常造成较不良妊娠结局，本研究结果显示，孕后期抗E抗体检出率高于抗D抗体。目前临床仅将RHD血型作为常规检测项目，此举有效的降低了抗D抗体的产生，在此基础上临床应当提高对RH系统其他抗原的重视，在有条件的情况下可在输血前对输血者（尤其是有生育需求的女性）进行RH分型检测。

孕早中期检出的抗体中IgG类占36%（24/66）（其中IgG+IgM混合抗体4例），孕晚期新增检出的抗体多为免疫刺激产生，IgG类占55%（26/47）。IgG类抗体可通过胎盘进入胎儿血液循环，破坏红细胞引起溶血症，也可引起血型不合的溶血性输血反应，对于孕妇及胎儿有较重要的临床意义。孕晚期再次进行不规则抗体检查，可以提高IgG类抗体检出率，如把孕早期已产生但因为效价不高而漏检的抗体检出，也可以检出因孕后期母婴血液交换增多，免疫反应加强，胎儿红细胞刺激母体而产生的新抗体［16-18］。

本文通过对不规则抗体检出时间与不良妊娠结局的比较，结果显示孕早中期孕妇不良妊娠结局（包括新生儿溶血、高胆红素血症、胎死引产）发生率为6.19%，孕晚期孕妇不良妊娠结局发生率为7.08%，两者不良妊娠结局发生率无统计学差异。说明孕晚期检出的不规则抗体如同孕早期检出的不规则抗体一样也会对胎儿产生一定程度的影响。若孕妇仅在孕早中期进行不规则抗体检查，这部分孕晚期首次检出不规则抗体的孕妇将被漏检，使得本可以进行早期干预的患儿被延误治疗，造成新生儿溶血症、高胆红素血症、患儿贫血水肿等不良后果。

综上所述，孕晚期孕妇MNS系统、RH系统不规则抗体阳性比例仍然较高。孕晚期再次进行不规则抗体检查对孕妇后期妊娠的孕期管理具有一定的指导意义。