张璐,李锦,王鑫媛,刘京,刘晓龙,李振涛,李文烈
(石家庄以岭药业股份有限公司,河北 石家庄 050035)
胃肠运动功能障碍是消化内科常见病,胃肠运动功能障碍直接影响营养的消化吸收,临床上导致胃肠运动功能障碍的主要原因为胃液分泌减少、胃排空延迟及肠蠕动减缓,因此增强胃肠动力是治疗这类疾病的重要措施,增强胃肠运动功能障碍的主要方法是促进胃液分泌,增强胃、小肠动力。
健儿粉是由山药、茯苓、莲子、白扁豆、薏苡仁、山楂、鸡内金、炒麦芽、陈皮九味药食同源药材组方加工而成。方中山药甘平为君,益气健脾。茯苓、薏苡仁为臣,健脾补中,渗湿止泻。莲子可补益脾气,涩肠止泻,白扁豆甘温补脾有健脾养胃之功,两者佐助君臣使脾气健运,泄泻得止。山楂擅长消肉食积滞所致的脘腹胀满、嗳气吞酸、腹痛泄泻;鸡内金广泛应用于米面薯芋乳肉等各种食积证;炒麦芽行气消食,健脾开胃,擅长促进淀粉性食物的消化,三者合用,可消各种饮食积滞;再以陈皮行气化滞配合,使全方补而不滞,改善腹胀症状。纵观全方,以补气健脾为主,消补兼施,补重于消,药味多以甘平为主,药量轻,药物平和,适宜儿童脾虚所致食积、腹胀、泄泻等证。其组方中的药食同源中药材促进消化药理研究尚未见报道,本实验将对其促消化功能进行研究,以探明其促进消化功能的作用机制。
健儿粉淡棕色粉末,气微香,味微苦,由实验室制作提供。健儿粉按照制作工艺分为两种:①喷雾干燥粉:药食同源组方经水提取后,浓缩,进行喷雾干燥而成,以下称为a粉;②生磨打粉,药食同源组方经干燥后,粉碎打粉而成,以下称为b粉。参考剂量:a粉推荐剂量为成人(按60 kg体重计)每日12 g,b粉推荐剂量为成人(按60 kg体重计)每日16 g。处理方法:a粉以去离子水配制各实验组所需剂量,b粉以羧甲基纤维素钠溶液配制各实验组所需剂量。
雄性昆明种小鼠,体重19.5~22.0 g,雄性SD大鼠,体重162.0~180.8 g,斯贝福(北京)生物技术有限公司提供,动物实验室许可证号:SCXK(京)2016-0002。
室温:20℃~26℃,相对湿度:40%~70%,光照12h明暗交替。自由饮水,饲以标准块状维持饲料,动物饲料购自斯贝福(北京)生物技术有限公司,产品许可证号:SCXK(京)2015-0015。
电子天平(IE-3484,上海舜宇恒平科学仪器有限公司JA21002)、游标卡尺(IE-2785,上海申韩量具有限公司)、灌胃针(小鼠10号,大鼠16号)、Dr.Ehrenstorfer GmbH Loperamide hydrochloride(148612)、活性炭粉(天津市华东试剂厂)、MACKLIN阿拉伯树胶(C10571800)、浓盐酸(北京化工厂20180101)。
1.4.1 大鼠体重、体重增重、摄食量和食物利用率的测定
选SPF级SD雄性大鼠55只,体重162.0~180.8 g,按体重分为5组,每组11只,a粉设0.500 g/kgBW、1.000 g/kgBW、3.000 g/kgBW 共3个剂量组(低、中、高1剂量组),b粉设4.005 g/kgBW剂量组(高2剂量组)和1个空白对照组(去离子水组)。实验期间,每天经口灌胃给予受试物1次,连续45d,灌胃容量a粉为7.5 mL/kgBW,b粉为10.0 mL/kgBW,每周测量2次体重和食物摄入量,实验结束时计算体重、体重增重、摄食量和食物利用率。
食物利用率=大鼠实验期间体重增重/大鼠实验期间摄食量
1.4.2 大鼠消化酶的测定
实验结束前各组动物禁食不禁水24 h,麻醉大鼠,幽门结扎法收集大鼠4h内排出的胃液,测定每小时内胃液量。取胃液1.0 mL放入50 mL的三角瓶中,加入0.05 mol/L盐酸溶液15.0 mL,摇匀,放入新鲜制作的蛋白管两支,塞好瓶口,37℃恒温箱中孵育24 h,取出蛋白管,用游标卡尺测量蛋白管两端透明部分的长度(mm),以四端之值求取平均值,按下式计算胃蛋白酶活性和排出量。
胃蛋白酶活性(μ/mL)=四端蛋白管透明部分长度均值2×16
胃蛋白酶排出量(μ/h)=胃蛋白酶活性×每小时胃液量
1.4.3 小鼠小肠运动
选SPF级雄性昆明种小鼠90只,体重19.5~22.0 g,按体重分为6组,每组15只,a粉设1.000 g/kgBW、2.000 g/kgBW、6.000 g/kgBW 共3个剂量组(低、中、高1剂量组),b粉设8.010 g/kgBW剂量组(高2剂量组)、1个空白对照组(去离子水组)和1个模型对照组(盐酸洛哌丁胺组),实验期间,各剂量组每天灌胃给予相应剂量受试物1次,空白对照组和模型对照组给予相同体积的去离子水,连续15d,灌胃容量为a粉15.0 mL/kgBW,b粉20.0 mL/kgBW,每周测2次体重。实验结束前各组小鼠禁食不禁水16 h。模型对照组和各剂量组灌胃给予盐酸洛哌丁胺,空白对照组给无菌水。30 min后各剂量组分别给予各相应受试样品的墨汁(含5% 活性炭,10% 阿拉伯树胶),空白对照组和模型对照组给予墨汁灌胃。25 min后立即采用颈椎脱臼法处死动物,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管,置于托盘上,将小肠拉成直线,测量肠管长度为“小肠总长度”,从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。按下式计算墨汁推进率。
注:因羧甲基纤维素钠作为增稠剂悬浮剂对小肠消化功能无影响[2],故a粉、b粉参照同一个空白对照组(去离子水组)。
1.4.4 数据处理
实验数据采用SPSS 19.0软件进行统计分析,结果以均值±标准偏差(±s)表示。组间比较依照方差齐性采用LSD法进行统计,以P<0.05为差异有统计学意义。
由表1可见,经口给予大鼠不同剂量的健儿粉45 d后,各剂量组大鼠体重、体重增重、摄食量和食物利用率与空白对照组(去离子水组)间比较无统计学意义(P>0.05),即健儿粉对大鼠体重、体重增重、摄食量和食物利用率均无不良影响。
表1 健儿粉对大鼠体重、体重增重、摄食量和食物利用率的影响(±SD)
表2 健儿粉对大鼠消化酶的影响(±SD)
由表2可知,经口给予大鼠不同剂量的健儿粉45 d后,各剂量组大鼠每小时胃液量和胃蛋白酶排出量与空白对照组(去离子水组)比较明显增加,且有显著性差异(P<0.05),即健儿粉在各剂量组均能增加大鼠每小时胃液量,各剂量组健儿粉均能提高大鼠胃蛋白酶排出量。
表3 健儿粉对小鼠体重以及小肠墨汁推进率的影响(±SD)
由表3显示,经口给予小鼠不同剂量的健儿粉15 d后,各剂量组小鼠体重均与模型对照组(盐酸洛哌丁胺组)间比较差异无统计学意义(P>0.05),即健儿粉对小鼠体重无不良影响。模型对照组(盐酸洛哌丁胺组)与空白对照组(去离子水组)比较,墨汁推进率差异显著(P<0.05),表明模型建立成功。在模型成立的条件下,与模型对照组(盐酸洛哌丁胺组)比较,中剂量组、高1剂量组、高2剂量组与模型对照组(盐酸洛哌丁胺组)比较均有统计学意义(P<0.05),即健儿粉在中剂量组、高1剂量组、高2剂量组能提高小鼠小肠运动实验墨汁推进率。
本次实验结果显示:健儿粉对大鼠体重、体重增重、摄食量和食物利用率以及小鼠体重增长均无不良影响,各剂量组较空白对照组均能提高大鼠每小时胃液量(P<0.05)、提高大鼠胃蛋白酶排出量(P<0.05),中剂量组、高1剂量组1高2剂量组较模型对照组均能提高小鼠小肠运动实验墨汁推进率(P<0.05)。结果表明在本次实验剂量范围内健儿粉对动物的生长发育均无不良影响,且能够促进大鼠胃内消化液的分泌,改善便秘模型小鼠小肠运动功能,说明健儿粉具有促进消化的作用。
健儿粉是由山药、茯苓、莲子、白扁豆、薏苡仁、山楂、鸡内金、炒麦芽、陈皮九味药食同源药材组方加工而成。其中:山药常用于治疗脾虚久泻、慢性肠胃炎等临床疾病,研究表明,山药对正常大鼠的胃排空及血清淀粉酶的分泌有抑制作用,可以增强小肠的吸收功能[3]。钟熊等人的研究表明[4,5],茯苓多糖可以被肠道中的微生物菌群利用进行代谢。莲子有补脾止泻、补肾涩精、养心安神的功效。现代药理研究结果表明白扁豆水提液具有抗菌、抗病毒的作用,临床用白扁豆30~60 g,煮沸熟透,饮汁吃豆,治疗脾虚所致慢性泄泻、急性胃肠炎呕吐腹泻有较好的疗效。王彦芳等人[6]报道薏苡仁多糖可以显著改善脾虚水湿不化大鼠的体液免疫功能,同时提高脾虚水湿不化大鼠模型血清IL-2水平,活化B细胞增生并产生抗体。温小萍等人[7]的研究表明,山楂水提物对大鼠胃、肠平滑肌条的收缩具有显著的刺激作用;山楂[8]有机酸可推进小肠运动抑制模型小鼠小肠推进率,维生素C、维生素B、有机酸可以增加胃中消化酶的分泌。沈明等人[9]建立大鼠胃肠道功能性消化不良模型,通过灌胃鸡内金水提物,可以增强功能性消化不良模型大鼠小肠推进率以及胃排空时间,提高血清中GAS和MOT水平,上调胃组织中AQP4蛋白表达和降低胃组织中eNOS表达水平,从而改善功能性消化不良模型大鼠胃肠功能。炒麦芽含有丰富的膳食纤维,可以促进肠道蠕动,临床上用于治疗食积不消,煎煮麦芽可以促进胃酸与胃蛋白酶的分泌[10]。陈皮中所含的挥发性油可以温和的刺激胃肠道,促进胃液分泌[11];山药、茯苓、莲子、白扁豆含有丰富的蛋白、多糖等成分,均可以促进肠道益生菌繁殖[12-14];山药、山楂、薏苡仁、麦芽、陈皮含有的黄酮类化合物可以改善功能性消化不良大鼠的胃排空和小肠推进[15]。
本实验结果与上述研究报道相一致,进一步验证了健儿粉具有促进消化功能,组方为药食同源中药材,使用安全、疗效确切,故健儿粉具有广泛的推广应用前景。