马国福
(吐鲁番市高昌区人民医院,新疆 吐鲁番)
血细胞分析仪,又称之为血液细胞分析仪或血球仪等,属于医院中临床检验极为广泛应用的检测仪器之一,随着现代计算机技术的不断发展,血细胞分析仪对于各类疾病的血小板检出率越来越高,具有快速和方便以及重复性好等优势,而血小板技术属于肝炎患者血液学检查的动态指标之一,但目前在临床检测中时常伴有肝炎患者的血小板计数结果偏低的问题[1]。因此,我院探讨了血细胞分析仪测血小板结果偏低的原因并提出分析对策,现报告如下。
选择我院2019年2月至2020年2月收治的60例肝炎患者,根据随机数字表法分为观察组和对照组,观察组30例,对照组30例。观察组男25例,女5例。年龄35~70岁,平均(50.05±5.15)岁。对照组男15例,女15例,年龄38~70岁,平均(50.25±5.05)岁。两组一般资料无明显差异(P>0.05),存在可比性。
选择深圳市库贝尔生物科技有限公司生产的μs-2000五分类全自动血液细胞分析仪,采用与该血液细胞分析仪配套的稀释液、溶血剂和清洁液,按照《全国临床检验操作规程》配置血小板稀释液,并放置冷冻设备储藏,采用EDTA-K2抗凝剂[2]。
采用1 mL EDTA-K2抗凝全血,充分搅拌均匀后,在1 h之内通过μs-2000五分类全自动血液细胞分析仪进行分析。采用显微镜法(0.38 mL血小板稀释液加20 μL血液,搅拌均匀,实施充液,进行镜检计数)计数血小板,所有标本都需要3次计数结果,采取3次标本结果中的平均值与血细胞仪法的结果进行对比,同时涂片瑞氏三染后实施油镜镜检[3]。
比较两组患者的计数值的一致性和差异性。
采用SPSS 21.0分析,计数资料经t检验,以(±s)表示,计数资料经χ2检验,以(%)表示,差异有统计学意义为P<0.05。
两组的测定结果具有一致性的有49例标本,就结果的一致性部分而言,两组患者无显著差异(P>0.05),并且该类标本中的血小板直方图都分布在15 fL以内,具有鲜明的主峰,通过涂片瑞氏染色油镜,可清楚观察到血小板呈现均匀散在的状态,形态无异常。
两组测定结果中差异性较大的有11例标本,观察组与对照组的计数值比较,观察组的计数值显著高于对照组的计数值(P<0.05),其中血小板直方图有7例的分布方式低而宽,左侧峰值起点较高,右峰值较高,显著区别于正常图。白细胞直方图可见一处小峰,瑞氏染色涂片可明显看见聚集血小板。3例血小板直方图的曲线到达峰值后,无明显下降,无右边界下降到最低值。瑞氏染色涂片显著可见大血小板。3例血小板直方图变化呈现不规则样式,显著区别于正态分布曲线。涂片上偶然可见大血小板,无其他显著异常发生。
2.3.1 显微镜计数法纠正
仪器无法直观地显示异常直方图标本样品的准确值,所以在临床检测时,必须采用显微镜计数法纠正,具体的实施方法为:取20 μL同一批混合的全血标本加入0.38 mL血小板稀释液加20 μL血液,搅拌均匀,实施充液,静置5 min后,实施镜检计数[4]。
2.3.2 抽血纠正
部分标本存在抽血不顺或未充分混匀的现象,进而导致标本发生率肉眼无法可见的微凝现象,此类标本在实施瑞氏染色涂片后可见血小板大量聚集,应重新实施抽血后,再进行测定。
2.3.3 冷凝集纠正
部分标本因为冷凝集的冷冻效果影响,导致血小板技术产生一定偏差,应该放置在37 ℃的水浴箱中回温后再实施测定。
2.3.4 手动检测纠正
部分标本在实施单份标本手动检测的时候没有混匀,上机就进行操作是血小板总体结果偏低的一大因素,所以规范化和标准化才做,能够大大减少结果偏差。
根据有关临床报道,部分肝炎患者的体外EDTA抗凝血,处于室温条件下血小板会产生FDTA的依赖性凝聚,血细胞无法完全确定血小板数和凝集体的结构,促使血小板的测定结果降低。并且血小板EDTA依赖性凝聚和患者血清中的抗心磷脂抗体的滴度以及血小板表面抗原的自身抗体具有关联性[5]。在HBV的长期刺激下,机体缺乏正常的免疫调节功能和T下包功能,促使B细胞无法正常的产生抗体,进而产生抗血小板的自身抗体[6]。另外,有学者认为抗血小板的抗体产生的主要场所在外脾脏,肝炎能够导致机体脾功能亢进,所以临床上认为部分肝病患者血小板计数较低的原因在于患者自身血小板产生EDTA依赖性凝聚[7-8]。
在本次研究中对我院观察组30例肝炎患者实施了显微镜计数法检测,取得了显著的效果:两组的测定结果具有一致性的有49例标本,就结果的一致性部分而言,两组患者无显著差异(P>0.05),并且该类标本中的血小板直方图都分布在15 fL以内,具有鲜明的主峰,通过涂片瑞氏染色油镜,可清楚观察到血小板呈现均匀散在的状态,形态无异常;两组测定结果中差异性较大的有11例标本,观察组与对照组的计数值比较,观察组的计数值显著高于对照组的计数值(P<0.05)。
综上所述,在血细胞分析仪测试血小板结果的时候,伴有部分结果偏低的现象,这是因为仪器受限于性能影响无法计算出样品的准确值,必须要实施显微镜计数法进行纠正,部分血小板受到抽血过程、冷凝、手动检测等因素的影响,对血小板的检验造成了一定的干扰,应分别针对干扰因素实施针对性措施。