安徽省6个地市规模鸡场新城疫流行率估计及风险因素分析

王 倩，刘 华，何长生，朱良强，占松鹤，徐发荣，沈朝建

（1.安徽省动物疫病预防与控制中心，安徽合肥 230091；2.北京市动物疫病预防控制中心，北京 102600；3.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）

新城疫（Newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）引起的一种急性、热性、败血性和高度传染性禽病，多种禽类对其易感，其中鸡高度易感[1]。该病一年四季均可发生，秋冬季节变换期间及寒冷季节多发。我国农业农村部将其列为一类动物疫病，并且在《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020）》中列为优先防控的重大动物疫病之一。

ND 最早发现于1926 年的印度尼西亚[2]。我国早在1928 年可能就有本病流行[3]。自1946 年分离到NDV[4]以来，我国临床上非典型ND 普遍发生。非典型ND 可持久感染，长期排毒，干扰免疫应答[5]。NDV 与其他病原混合感染时，可导致感染鸡群抗体水平降低，无法对NDV 强毒提供保护[6]。我国从20 世纪80 年代开始对ND 实行全面免疫策略，而疫苗的广泛使用对该病防控起到重大作用。但由于免疫程序不合理、免疫抑制疾病等因素影响，非典型ND 时有发生。安徽是我国禽类养殖大省，2017 年末存栏家禽23 018.5 万只，年出栏达87 351.9 万只，禽蛋产量居全国第8 位。安徽省肉鸡产业，品种上以白羽肉鸡和中速型黄羽肉鸡为主，养殖方式以养殖小区集中饲养与专业化养鸡场的规模饲养为主[7]，存栏3 000～10 000 只的规模场是养殖主体，约占规模鸡场的63%。随着养殖水平的提高，虽然烈性ND 的发病已经得到控制，但是在免疫程序不当、生物安全体系缺失、混合感染严重的养鸡场发生ND 散发疫情的风险依然存在[8]，给养殖业带来较大损失。为了解安徽省规模鸡场NDV 感染情况及其引发该病的风险因素，结合2019 年秋季集中监测采样工作，对6 个地市存栏3 000～10 000只的规模鸡场开展了横断面研究。

1 材料与方法

1.1 调查对象和范围

根据安徽省直联直报系统登记的鸡场规模和鸡场数量，结合2019 年秋季集中监测，对安徽省北部的宿州和阜阳，中部的滁州和六安，南部的黄山和宣城6 个地市存栏3 000～10 000 只的鸡场进行调查。

1.2 阳性个体和阳性场定义

阳性个体：经荧光RT-PCR 方法检测为NDV阳性的鸡只，检测试剂采用深圳奥东公司的ND 荧光RT-PCR 检测试剂盒；阳性场：至少检出1 只阳性个体的养殖场。荧光RT-PCR 法的敏感性为99.5%，特异性为100%。

1.3 抽样方案

采用两阶段抽样，首先在6 个地市按照估计流行率方式简单随机抽取规模鸡场，按照置信水平95%、预期流行率10%和可接受误差5%的标准计算样本量，需抽取135 个场，然后根据6 个地市规模鸡场数量按比例分配。具体抽样数量见表1，具体场点分布见图1。然后，每个规模场内按发现疫病方式随机抽取个体，按照置信水平95%、预设流行率8.5%、检测方法敏感性99.5%的标准计算，每个场点需抽取35 份拭子。

表1 安徽省6 个市规模鸡场群水平抽样数量

图1 安徽省6 个市规模鸡场抽样场点分布

1.4 调查问卷与采样监测

对调查的规模场除采集实验室检测样品外，还进行问卷调查，包括养殖场基本情况、免疫情况、发病情况等30 个问题。样品采集和问卷调查由市县级动物疫病控制中心负责完成，省级疫病控制中心负责样品的实验室检测及数据汇总、分析。

1.5 数据分析

检测数据及问卷调查数据录入Excel 并进行初步分析，用SPSS 25.0 软件对二分类变量进行单因素回归分析和二元Logistic 回归分析。

场表观流行率为检出的阳性场数量占抽样研究群的比值。根据6 个地市的存栏量计算调整后的场表观流行率，结合试验敏感性（Se）、特异性（Sp）和个体抽样数（n）带入公式HSe=1-（1-p）n和HSp=Spn计算出群敏感性（HSe）、群特异性（HSp），再带入公式HTP=（HAp+HSp-1）/（HSe+HSp-1）计算场真实流行率。

将与ND 阳性场的相关风险因素，用SPSS 25.0 软件，对二分类变量进行单因素回归分析和二元Logistic 回归分析。

2 结果

2.1 场流行率

病原学检测结果显示，安徽省6 个地市153个鸡场的5 369 份样品中，在17 个场的86 份样品中检出NDV 核酸阳性，场表观流行率为11.1%，标化后为11.2%（95%CI，6.1%～16.3%），计算的群敏感性、群特异性分别为95.5%、100%，场真实流行率为11.7%（95%CI，6.4%～17.1%）。检测样品的个体表观阳性率为1.6%。各地市抽样及阳性情况见表2。

2.2 风险因素单因素回归分析

通过查阅文献等方法，选择是否免疫ND 疫苗、鸡场方圆3 km 内是否有其他禽场等26 个因素进行调查分析，具体结果见表3。单因素分析结果显示：1 个月只清理1 次粪便的鸡场，感染NDV 的OR 值是1 个月清理2～4 次的3.33 倍（95%CI，1.11～9.97）；场内共用器具和车辆的NDV 核酸阳性OR 值是不共用的3.55 倍（95%CI，1.10～11.44），并且有统计学意义（P＜0.05）；笼养，车辆和人员进出场都消毒，净道和污道分开，空舍消毒以及消毒前清洗场内，均为保护性因素，其OR值分别为0.25（95%CI，0.08～0.83），0.29（95%CI，0.05～0.41），0.22（95%CI，0.08～0.63），0.22（95%CI，0.05～0.96），0.25（95%CI，0.08～0.83）。

表2 安徽省6 个市规模鸡场NDV 核酸检测结果

场点类型、禽种、存栏量、疫苗类型、防鸟网、饮水来源等没有统计学意义（P＞0.05），且OR没有意义（95%CI 穿过1），详见表3。

2.3 风险因素二元Logistic 回归分析

将单因素分析中P＜0.2 的11 个风险因素作为自变量，鸡场是否为ND 阳性场为因变量，带入EPI INFO 中进行Logistic 回归分析，Log（odds）=-1.02+0.55X1+0.29X2，用倒退法选择变量。结果显示：“净道、污道是否分开”和“车辆、人员进出是否消毒”是养殖场感染NDV的风险因 素，而其他几个因素被模型剔除，经Hosmer&Lemeshow 检验，P为0.10，表明Logistic回归模型的拟合度尚好，详见表4。

表3 单因素分析结果

表4 二元Logistic 回归分析结果

3 讨论

近几年来，ND 疫情在全国呈下降趋势，全国报告疫情次数和强毒感染的带毒率也均下降[9]。2019年9—11 月，安徽省6 个市存栏量3 000～10 000 规模鸡场ND 场流行率和个体流行率分别为11.11%和1.60%，个体流行率比中科基因2019 年上半年检测的河南、山东、湖北、河北、辽宁等省份高0.4%[10]，比2019 年云南省规模鸡场低2.45%[5]。由于本次调查没有对阳性样品做进一步的病毒分离检测，所以无法区分是疫苗毒株还是感染毒株，可能导致本次检测到的阳性率较高。现阶段，虽然ND不是国家强制免疫疫病，安徽省也没有对其进行强制免疫，但是由于该病危害性较大，养殖户大部分都自行购买疫苗，主动开展疫苗免疫。本次调查发现，虽然有61.44%的鸡场免疫了自购的NDV 弱毒苗，但抗体水平较高的鸡群仍然可以感染NDV，说明单靠疫苗免疫已无法阻断病毒感染[11]。当鸡群中存在多重感染或与其他非传染性免疫抑制因子（如霉菌毒素）并存时，NDV 免疫抗体较低的鸡会成为传染源[12]。在本次调查中，通过和当地兽医沟通，6 个地市在过去1 年中均有ND 散发或者NDV 和其他病原混合感染，因此建议科学规范进行NDV 疫苗免疫，适时检测NDV 抗体水平[13]。

NDV 既可以垂直传播，也可以水平传播，传播途径较多，与发病鸡的直接接触、饲养人员及其他禽类的流动以及被污染的设备和饲料、鸡舍内被污染的空气等都可传播。饲养管理差的鸡群感染NDV 的风险较高，比如不良的环境卫生条件[14]，只有加强日常生物安全管理，才能更好地预防该病的发生。目前有较多鸡场从雏鸡进场到48～50 d 后清群，只对鸡舍进行1 次消毒，当环境被污染后，NDV 数量过多，会突破鸡群免疫屏障而引起发病。本次调查发现，45.10%的鸡场1 个月只清理1 次粪便，其NDV 核酸阳性的风险是1 个月清理2～4次的3.33 倍。养殖场被污染后，NDV 等病毒会使免疫力弱的鸡出现临床症状[15]，如不及时清理粪便，还容易引发鸡球虫等寄生虫病。超过半数的鸡场，在场内不同栏舍间共用器具和车辆，其NDV核酸阳性的风险是不共用器具和车辆禽舍的3.55倍。如果饲料被污染，那么病毒会通过共用运输工具，在不同鸡舍中进一步扩散。

加强生物安全措施，可以有效降低NDV 感染风险[16]。本次调查显示，车辆和人员进出场消毒、净道和污道分开、空舍消毒以及在消毒前清洗场内，对于鸡场防控ND 可起到保护作用。经Logistic 回归分析，剔除几个消毒措施的风险因素，得出“车辆、人员进出场不消毒”是风险因素。近年来，安徽省加强了对养殖场场主生物安全的培训和宣传，指导规模禽场在入口处设立消毒池，规划场内污物处理池，对养殖户免费发放消毒药，帮助养殖场户提高生物安全管理水平。

本研究的局限性：（1）抽样框方面，本研究选取的鸡场都是在直联直报系统中选取的，由于系统更新不及时，选取时可能会造成鸡场的遗漏。（2）在个体水平预期流行率估计偏高，导致计算出来的样本量偏小，实际需要采集更大的样本量来评估个体水平的真实流行率。（3）风险因素方面，调查问卷问题设计不够全面，鸡场在填写问卷时可能存在瞒报或误报。（4）没有进一步对荧光RT-PCR检测为NDV 阳性的样品进行病毒分离。

4 结论

研究表明：安徽省约有11.7%鸡场存在NDV感染；加强生物安全管理，如车辆和人员进出场消毒、净道和污道分开、空舍消毒以及消毒前清洗场内等均可降低NDV 感染风险。建议鸡场合理规划场内布局，制定并严格执行场内消毒计划，切实改善养殖场环境，降低ND 疫情发生风险。

致谢：

宿州市、阜阳市、滁州市、六安市、黄山市和宣城市动物疫病控制中心相关人员，中国动物卫生与流行病学中心沈朝建老师，北京市动物疫病预防与控制中心徐发荣老师，以及中国兽医现场流行病学培训项目组（CFETPV）的部分导师和学员，对本研究提供了帮助和指导。