鹿胎粉对雌性小鼠免疫功能肝脏抗氧化功能的影响

王丽梅， 何绍港， 龙析宇， 路 通， 周海盟， 何玉华， 孙学钊

(1. 吉林农业科技学院 反刍动物精准营养及智慧养殖科技创新中心， 吉林左家132109 ; 2.吉林省反刍动物精准营养与智慧生态养殖跨区域合作科技创新中心， 吉林左家132109)

鹿胎是从怀孕母鹿腹中取出的整个子宫，里面包括成形小鹿，连同胎衣、羊水，以酒浸，整形，烘烤，风干即为鹿胎[1]。将鹿胎以煎煮，焙炒，粉碎，加红糖熬制，即为鹿胎膏。鹿胎是非常珍贵的药材，鹿胎中所含的营养成分较多，富含蛋白质、多肽、氨基酸、雌激素、维生素、矿物质等，所含有的赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸，而且氨基酸成分与人胎盘相近[2]，能够补气、补血，具有调理内分泌的功效，对妇女经期紊乱、宫冷难孕等症有很好的疗效[1]。

本试验将不同水平的鹿胎蛋白对小鼠进行灌服，观测其对小鼠的生长性能、生殖器官指数、血清性激素水平、抗炎因子的影响，探讨梅花鹿胎盘在小鼠上应用的效果，为梅花鹿胎盘产品的开发奠定基础，为梅花鹿胎盘的药用功能提供更加精准的数据支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料 梅花鹿鹿胎干粉，购自吉林吉春制药股份有限公司。IgG、IgA、IgM试剂盒，购自南京建成生物工程研究所。

1.2 实验动物及饲养管理 选择100只体重为(20±2) g 的4周龄清洁级昆明雌性小鼠，购自江苏省协同医药生物工程有限责任公司。饲养室温度为25 ℃，湿度为30%～45%，自由采食和饮水。

1.3 试验仪器 悬挂式小鼠笼(HL-XG，合力科创)、小鼠笼架(HL-XG，合力科创)、小鼠用耳标、耳号钳(ST101，美国 CLARKBIO)、手术剪(9.5 cm直头，上海红尊医疗器械有限公司)、采血管(10 mL，泰州民健医疗器械有限公司)、手术刀、移液器等实验室常用器械。

1.4 试验设计 将100只小鼠随机分成A、B、C、D、E共5组，每组20 只，A组作为对照组，B、C、D、E为试验组，用鹿胎粉对小鼠灌服，剂量分别为0 mg/(kg·bw)、20 mg/(kg·bw)、40 mg/(kg·bw)、80 mg/(kg·bw)、 160 mg/(kg·bw)，连续灌服21 d。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 血清生化指标 试验结束的最后1天早上6：00，每组随机取4只小鼠进行摘眼球釆血，采完之后将采血管在4 ℃冰箱中过夜，于第2天3 000 r/min离心5 min，然后用移液器吸取血清装在1.5 mL的离心管中，于-20 ℃的条件下保存。

免疫球蛋白的测定：IgG、IgA、IgM的测定用试剂盒(免疫透射比浊法)，操作步骤完全按试剂盒说明书进行。

1.5.2 器官指数 试验结束的最后1天早上8：00颈椎脱臼处死小鼠，然后马上解剖并釆集胸腺、脾脏、肝脏，剔除其上面的结缔组织及脂肪组织后称量重量，分别计算各个器官的指数。

器官指数(mg/g)=器官重/体重

1.5.3 肝脏抗氧化功能 取小鼠的肝脏，按文献方法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量[3]。

1.6 数据分析 所得数据采用平均值±标准误来表示，数据的统计分析用 SPSS 20.0 软件处理。

2 结果

2.1 鹿胎粉对小鼠免疫器官指数的影响 从表1可知，灌服鹿胎粉后，胸腺指数升高，D组、E组与其他各组相比差异显著(P<0.05)；胸脏指数先升高后降低，C组最高且与其他各组相比差异显著(P<0.05)；肝脏指数无显著变化。

表1 鹿胎粉对小鼠免疫器官指数的影响Table 1 Effect of deer fetal powder on immune organ index of mice (mg/g)

2.2 鹿胎粉对小鼠血清免疫球蛋白的影响 从表2可知，灌服鹿胎粉后血清中的IgG、IgA、IgM含量呈现升高的趋势，但差异不显著(P>0.05)。

2.3 鹿胎粉对小鼠肝脏抗氧化功能的影响 从表3可知，小鼠肝脏中SOD、CAT、GSH-Px的活性逐渐升高，E组最高，与其对照组相比差异显著(P<0.05)；MDA的含量逐渐降低，D组、E组最低，与其他各组相比差异显著(P<0.05)。

表2 鹿胎粉对小鼠血清免疫球蛋白的影响Table 2 Effect of fetal powder on serum immunoglobulin of mice (g/L)

表3 鹿胎粉对小鼠肝脏抗氧化功能的影响Table 3 Effect of deer fetal powder on antioxidant function of mouse liver

3 讨论

3.1 鹿胎粉对小鼠免疫功能的影响 胸腺和脾脏是动物体的免疫器官，其指数的高低体现了动物机体免疫机能的强弱[4]。IgG、IgA、IgM是主要的免疫球蛋白，血清中IgG、IgA、IgM的水平反应动物机体的免疫力和抵抗疾病的能力[5]。本试验灌服鹿胎粉后，胸腺指数升高，D组、E组与A组、B组、C组相比差异显著(P<0.05)；脾脏指数升高，C组最高且与其余各组相比差异显著(P<0.05)；肝脏指数无显著变化。血清中的IgG、IgA、IgM含量呈现升高的趋势，但差异不显著(P>0.05)。

赵国财等[6]给老年雌性大鼠的饮用水中添加鹿胎制剂，结果表明，鹿胎制剂能够提高老年雌性大鼠血清中的总蛋白含量，提高了其免疫功能。魏力等[7-8]的研究表明，鹿胎制剂对足趾肿胀炎性模型大鼠、腹腔渗出性炎性模型小鼠具有一定的抗炎作用；鹿胎胶囊与软胶囊可有效缓解小鼠炎性疼痛与痛经性疼痛反应，且不影响投药小鼠子宫组织的病理学改变。冷爱晶等[9]用鹿胎颗粒治疗痛经84例的结果表明，以鹿胎为主要原料的鹿胎颗粒可以增强体质，对内分泌具有调节功能，并且可增强机体的免疫力。

3.2 鹿胎粉对小鼠抗氧化功能的影响 MDA是膜脂过氧化过程中最重要的产物之一，它的产生可以加剧膜的损伤，所以在抗性生理和衰老生理的研究方面，MDA的含量是一个非常重要的指标[10]。SOD可以清除生物体在新陈代谢过程中产生的过氧化的产物[11]。对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。CAT的作用是使过氧化氢还原成水。GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。

以鹿胎为核心成分的制剂具有抗衰老、抗氧化、活血化瘀等功效[1]。我国应用鹿胎作为中药治疗疾病已有很长历史[12]。本试验的结果显示，小鼠肝脏中SOD、CAT、GSH-Px的活性逐渐升高，E组最高，与其对照组相比差异显著(P<0.05)；MDA的含量逐渐降低，D组、E组最低，与其他各组相比差异显著(P<0.05)。

孙兰等[13]的研究结果表明，以马鹿胎为主的冲击可以清除雄果蝇血清的过氧化物自由基，能够延缓衰老。孙德珍等[14]的研究表明，鹿胎口服液也具有抗氧化的作用。金岩等[15]用鹿胎膏治疗围绝经期失眠症32 例的结果表明，鹿胎膏对失眠有一定的治疗效果。邹兴淮等[16]的研究表明，鹿胎及胎盘制剂通过降低老年雄性大鼠脑和肝脏中单胺氧化酶活性对老年雄性大鼠具有延缓衰老的作用。