中国替抗产品科技创新及其发展趋势

饲料禁用抗生素的历程，从1986年瑞典开始实施，到2018年中国实施。如何实现绿色健康养殖可以从五个方面出发：1）优良的畜禽品种。套用中国的一句古话“先天不足，后天难补”，如果我们的品种不好，那在后期会有很多的问题。2）生物安全体系。我们一定要有一个非常良好的生物安全体系，防止病原体的入侵。3）科学全价、营养合理的饲料配方。这也是改善和提高我们健康养殖的关键。4）提高饲养管理水平同样非常重要。5）一定要有一个合理的替抗产品，才能保证替抗，减少抗生素的使用。

替抗产品目前比较热门的有六大类：微生态制剂、中药、噬菌体、天然提取物、抗菌肽以及酶制剂，其中微生态制剂是现在替抗产品中最火热之一，本文就对微生态制剂进行一个详细的阐述。

微生物制剂的筛选与评估

肠道是人体中最大的免疫器官，含有700多种微生物，可以产生20种以上的激素，另外占机体能量消耗20%，所以说肠道在人体器官中有非常重要的意义。

微生态参与肠道黏膜免疫的几大功能，生物屏障、化学屏障、机械屏障、免疫屏障都和微生态益生菌是息息相关的。

1963年在美国做了一个经典的微生物学实验，分为两组，一组正常饲养，另外一组无菌饲养。饲养一个周期之后发现，正常饲养的鸡茁壮成长，而无菌饲养的鸡又瘦弱又小，这充分说明了肠道菌群具有非常重要的意义。

现在国内微生态制剂生产企业非常多，但是都存在以下几个问题：1）菌株功能性的问题。微生态益生菌，最常见的枯草芽孢杆菌，它的基因序列改变会导致它的功能是不一样的。所以说我们一定研究到具体株，不仅仅只看一个活菌数，一个耐热的活性，这并不是完全评价一个产品好坏的重要指标，我们必须看具体的基因序列的功能。2）安全性、毒力基因、溶血性的问题。安全性研究我国非常欠缺，很多菌种在欧盟和中国台湾被禁用，尤其是对毒力基因，我们的研究非常欠缺，所以安全使用益生菌的前提，是一定要保证不含毒力基因，不会导致溶血性。3）乳酸菌稳定性的问题。以上三个问题，是我国微生态行业遇到最重要的问题。

欧洲食品安全局评估上市的流程主要含有八项：第一，最主要的就是菌种没有毒性和病原性；第二，可以准确的分类和鉴定，一定要具体到株；第三，菌株可以在消化道栖息；第四，可以产生抗菌物质；第五，可以调节免疫；第六，遗传基因的定性；第七，至少要有一个科学的依据证明它是有用的；第八就是安全性、稳定性的问题。国际食品与法典委员会也在2002年建立了一套益生菌评估的方法，和欧洲的方法是类似的，包括以下几个方面：不含有抗生素耐药性基因转移的风险，不能有毒性，还必须要知道它特定的代谢活性是什么，另外包括溶血性不可以发生，最后评估产品在动物应用中的毒副作用，这是现在欧洲和国际上比较成熟的一套评价益生菌安全性的体系。

益生菌筛选及运用

我们也建立了自己的益生菌筛选标准：1）菌株的筛选。要进行特异性筛选，想得到什么样的菌株，想要什么功能的菌株，这是我们特异性筛选的第一步，而并不是说随便找个粪便，找个环境的土壤，随便一分，分到哪个是哪个，那么这样的分离是没有意义的，我们要特异性靶向筛选。2）抗菌性实验。也就是说是否可以产生一些抗菌物质，主要是最常见的沙门氏杆菌、大肠杆菌等，进行益菌性的实验。3）抗逆性试验。如何顺利到达肠道发挥作用，评价的方法就是耐酸、耐胆盐。4）安全性实验。第一是不能引起溶血反应，第二是不能含有耐药基因，第三是无细胞毒性，这是必须进行的评价，以保证安全性。5）效果验证。我们在临床中必须有大量的实验数据支撑产品的有效性。

根据以上工作，我们研发了一个微生态复方制剂“益美乐”，主要有以下功能：抑制肠道菌群，提高机体免疫力，促进生长，以及提高饲料的利用率。组成成分中有3个专利植物乳杆菌RP3和1个植物乳杆菌RP5，主要功能是提高免疫力。

健康动物和亚健康动物肠道菌群到底有什么差别？我们研究发现，健康动物和亚健康动物的主要差别在乳酸菌，亚健康动物与健康动物的肠道菌群组成大概差了15倍左右。我们定向筛选了3株乳杆菌，它的主要功能就是提高巨噬细胞的吞噬能力，提高机体的非特异性免疫功能。第二个就是植物乳杆菌RP5，可以显著抑制有害菌的生长；RP21，可以改善应激反应，促成生长。所有的菌株都要保证安全性，不含有耐药基因，包括基因结构和一些代谢产物的关系。

1.植物乳杆菌RP3。我们做了一个巨噬细胞产一氧化碳能力的实验，并且找了一些常见的植物乳杆菌素做了对比，RP3可以显著提高巨噬细胞产一氧化碳能力。一氧化碳是一种非特异性效益因子，可以杀灭很多病原微生物，是免疫调节过程中重要的一个介质，是提高免疫力一个非常重要的菌株。

2.植物乳杆菌RP5。我们也做了很多数据，RP5含有41组编码基因，常规的乳酸菌只有10～25组，植物乳杆菌的益菌能力和编码基因数呈一个正相关的关系。

3.植物乳杆菌RP21。它主要是改善应激和不良情绪，尤其是蛋鸡，经常会受到外界的感染，或者是产蛋后的应激反应，所以我们补充它是有意义和作用的。

4.植物乳杆菌的稳定问题。我们做过耐酸性和耐胆盐能力试验，以保证它可以顺利进入肠道发挥作用，通过这个实验表明，我们的植物乳杆菌在胆盐浓度2‰的时候，还有良好的耐受性，耐胆盐为3‰的时候，4h能有60%，可以保证顺利到达胃肠道发挥作用。

5.包被技术。通过微囊包被，菌株不会显露在外，这样可以提高菌株的稳定、活性。我们也是做了一个稳定性的实验，发现常温放置60d以后，未包被的活性下降了65%，而包被的只下降了16%，所以相对来讲提高了4倍的稳定性。

6.安全性实验。为了保证使用的益生菌不含有耐药基因，我们对常见的7种抗生素进行敏感性实验，证明不含有耐药基因，可以安全使用。

7.细胞毒性实验和溶血性实验。我们采用了脾细胞和菌株进行共培养，同化脓性链球菌进行对照，可以发现化脓性链球菌和脾细胞进行共培养一样，脾细胞大量死亡，而我们的功能性植物乳杆菌它不仅没有减少脾细胞的数量，反而对脾细胞有增殖和促进的作用，所以不含有细胞毒性。通用化脓性链球菌作为对照组，可以发现化脓性链球菌可以发生溶血反应，而我们的植物乳杆菌不会造成溶血现象。

8.丁酸梭菌。它主要有四大营养功能：1）专性厌氧芽孢杆菌，可以提高体内双歧杆菌和乳酸杆菌的数量，抑制有害菌，改善肠道的生态平衡。2）生产丁酸，我们都知道是肠上皮组织细胞再生和修复的主要营养物质。3）抗逆性强，可以保证顺利到达肠道发挥作用。4）提供营养，增强免疫，可以显著提高饲料转化利用率。

9.布拉酵母。它属于酿酒酵母的一个亚种，最早分离自东南亚，虽然和酿酒酵母是同源，但是功能性比常规的酿酒酵母要好出很多，最主要的特点就是可以黏附致病菌，将毒素排出体外，减少对机体的伤害。

我们对“益美乐”做了大量的临床实验，第一个是白羽肉鸡饲养实验，死淘率相对于对照组有非常显著的提高。第二个是在猪上的应用，实验结果表明，“益美乐”显著提高性能，其中高剂量组日增长比对照组提高11.33%，料肉比降低5.56%，同时腹泻率比对照组降低87.24%，死亡率同样降低了76%。所以说在仔猪上的应用效果是非常显著的。

目前肠道菌群的研究，全球包括国内都处于初级阶段，还有很多工作需要开展，在以后的研究中可以运用分子生物学等先进的技术和方法，深入研究肠道微生物与宿主之间代谢、免疫、生长、发育、疾病的关系和作用，微生态运用会有更美好的明天。（本文根据录音整理，未经本人审阅，如有出入，以专家本人意见为准）