矾根‘葡萄苏打’的组织培养快繁技术研究

赵玉琳，陈陆琴，张谨华

（1 太原植物园，山西太原 030025；2 晋中学院生物科学与技术学院）

矾根（Heuchera micrantha）为虎耳草科矾根属植物，原产美洲中部，为多年生耐寒性草本，叶基生，品种繁多，各品种叶色不同，喜温凉，厌炎热，是少有的彩叶阴生地被植物[1]。在冬季温暖地区，叶子四季不凋，覆盖力强，花叶兼美，适合做花镜、花坛、地被材料或庭院绿化材料[2]。彩叶植物因其色彩富于变化，彩叶期长，观赏价值较高，能够丰富景观色彩，烘托园林气氛，弥补园林绿化中淡花期色彩单调的问题，所以彩叶植物在城市绿化建设中发挥着越来越重要的作用，并日益受到园林工作者的喜爱[3]。矾根因品种不同，有种子繁殖的，但种子发芽慢且不整齐；有分株繁殖的，但无法获得大量矾根苗满足市场需求[4]。通过植物组织培养技术对矾根‘葡萄苏打’进行了快速繁殖，为规模化生产提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验于2017～1018 年在太原植物园进行，供试材料为矾根‘葡萄苏打’。4 月初取带腋芽的幼嫩茎段作为外植体。

1.2 试验方法

1.2.1 无菌外植体的获得。在盆栽的矾根‘葡萄苏打’上剪取带腋芽的茎段，用洗衣粉浸泡10min，并在流水下冲洗1h，在超净工作台上用滤纸吸干茎段上的水分，75%酒精消毒20s，0.1%的氯化汞溶液洗涤1～3min，无菌水冲洗5～6 次，无菌滤纸吸干茎段表面水分，接种到初代培养基上进行培养。

1.2.2 培养基和培养条件。基本培养基：MS 培养基，均加蔗糖30g/L，琼脂6g/L，pH 值5.8～6.2。培养条件：温度控制在25±2℃，光照时间为12h/d，光照强度为2000Lx。

1.2.3 诱导培养基的筛选。以MS 为基本培养基，添加不同浓度的6-BA 0.1～1mg/L 和NAA 0.01～0.05mg/L 的芽诱导培养基上，观察生长和诱导情况，确定最适合矾根‘葡萄苏打’的初始培养基。

1.2.4 增殖培养基的筛选。在诱导芽的初代培养基上，通过调节植物激素6-BA 与NAA 的浓度，筛选最佳增殖培养基，25d 为1 个继代周期。

1.2.5 生根培养基的筛选。基本培养基为1/2MS，琼脂6g/L，蔗糖15g/L，添加不同浓度的NAA，观察矾根‘葡萄苏打’试管苗生根的情况，30d 后统计生根率。

1.2.6 炼苗移栽。生根的试管苗具有5 条以上的正常根即可进行移栽。先在炼苗室放置3d，然后在温室打开瓶盖炼苗2d，以培养基不染菌为宜。用镊子取出组培苗，将其基部的培养基洗干净，移入珍珠岩︰泥炭土=1︰1 的穴盘中，放入小拱棚，移栽7d 内进行50%～70%遮荫，保证温度在25℃左右，湿度在85%左右。

2 结果与分析

2.1 无菌苗的获得

矾根作为一种多年生草本植物茎段比较嫩，不同消毒时间对矾根试管苗培养有一定的影响。在试验过程中发现氯化汞消毒时间为1min 时，外植体不会受到损伤，但污染严重，污染率达90%。当消毒时间为3min时，外植体的污染率较低，但外植体受损严重，在培养过程中出现褐化等现象，大多数外植体死亡，导致试管苗的获得率降低。试验表明矾根‘葡萄苏打’用75%酒精20s，0.1%的氯化汞消毒2min 效果最佳，污染率达30%。

2.2 外源激素对矾根‘葡萄苏打’初期诱导的影响

矾根‘葡萄苏打’腋芽在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L 培养基上20d 左右均可产生愈伤组织，30d 诱导出大量不定芽，芽嫩，芽高整齐，丛状，诱导率可达100%。

2.3 增殖培养基的筛选

选取粗壮且长势相同的矾根‘葡萄苏打’诱导苗接种到增殖培养基中继代培养。随着继代次数的增加，丛生芽会出现玻璃化现象，降低激素使用浓度，减少玻璃化程度，在MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.05mg/L 培养基中，芽玻璃化现象较低，芽增殖率最高，可达82%，有效芽较多，且生长周期短。

2.4 生根及试管苗移栽成活情况

选取高度2cm 的壮苗接种于1/2MS+NAA 0.3mg/L的生根培养基上，30d 后苗生根率为98%，根长2～3cm，生根5～8 条，苗高4～6cm。经炼苗移栽，成活率可达100%，经过大田栽植能够安全越冬。

3 小结

该研究发现矾根‘葡萄苏打’在MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.05mg/L 培养基中增殖率能够达到最高，分化出的苗可直接转入1/2MS+NAA 0.3mg/L 生根培养基中进行生根，且生根效果较好，每个外植体能够生根5 条以上，这样可以缩短培养周期，降低生产成本，满足工厂化生产的需求。生根苗经锻炼5d 后移栽到珍珠岩︰泥炭土=1︰1 的基质中，成活率可达98%以上。