自闭症谱系障碍患儿血清维生素B12、同型半胱氨酸水平及其与病情严重程度的关系▲

胡 晓 徐海青

(1 湖北省宜昌市妇幼保健院儿童保健科，宜昌市 443000，电子邮箱：1428779593@qq.com；2 湖北省妇幼保健院儿童保健科，武汉市 430000)

自闭症谱系障碍(autism spectrum disorder，ASD)是一组严重的神经发育障碍性疾病，是指由于神经发育不健全而导致的狭隘兴趣、刻板行为、言语发育障碍及人际交往障碍[1-2]，发病一般起始于婴幼儿期，全球的发病率为1%～2%。同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是一种具有细胞毒性的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸的代谢中间产物，而维生素B12和叶酸是Hcy代谢过程中必需的辅助因子[3]，两者可直接影响Hcy水平。研究显示，维生素B12与机体的神经发育具有一定的关联性[4]，因此推测其可能与ASD有关。本研究旨在探讨ASD患儿血清维生素B12、Hcy水平及其与病情严重程度的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2018年1月至2019年12月在宜昌市妇幼保健院诊治的60例ASD患儿作为观察组，其中男性41例、女性19例，年龄3～12(6.93±2.04)岁。纳入标准：(1)参照《精神疾病诊断和统计手册:第5版》[5]中的标准，并经孤独症诊断访谈量表修订版和孤独症诊断观察量表明确诊断；(2)年龄≤12岁；(3)初次确诊。排除标准：(1)遗传性疾病家族史患儿；(2)癫痫发作史患儿；(3)恶性肿瘤患儿；(4)头部外伤史患儿；(5)严重心脑功能障碍患儿；(6)免疫系统疾病患儿；(7)近期服用过甲氨蝶呤、磺胺类等影响结果的药物。另外选取同期在宜昌市妇幼保健院进行体检的60例健康儿童作为对照组，其中男性37例、女性23例，年龄3～11(6.78±2.11)岁。两组儿童的年龄、性别分布差异均无统计学意义(均P>0.05)。本研究经医院伦理委员会审批通过；纳入儿童的家长对本研究知情并同意。

1.2 维生素B12和Hcy的检测 对照组儿童于体检时，观察组患儿于入院后治疗前，采集空腹静脉血液3 mL，静置20 min，3000 r/min离心15 min，获取血清，-80℃保存待测，采用全自动免疫发光分析仪(雅培公司，型号：ARCHITECTI 2000SR)及配套试剂盒(批号：20171023、201810819)测定血清Hcy和维生素B12水平，严格按照试剂盒说明书操作。

1.3 ASD严重程度的评估标准 采用儿童期孤独症评定量表(Childhood Autism Rating Scale，CARS)[6]评估ASD患儿的严重程度。CARS共分为15个项目，分别是总体印象、活动水平、言语交流、视觉反应、智力活动水平和一致性、听觉反应、情绪反应、模仿、非言语交流、害怕或紧张、与他人的关系、味嗅觉和触觉反应、肢体动作、对变化的适应、使用物体。每个项目得分分为1、2、3、4分，总分为60分，分数越高，提示患儿的孤独症越严重，其中分数>36分提示为重度孤独症，分数为30～36分提示为轻中度孤独。

1.4 统计学分析 应用SPSS 19.0软件进行统计学分析。计数资料以频数(百分比)表示，组间比较采用χ2检验；计量资料以(x±s)表示，组间比较采用两样本t检验或t＇检验；采用Pearson检验分析血清维生素B12、Hcy水平与ASD患儿CARS评分的相关性。以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组患儿血清维生素B12及Hcy水平的比较 相较于对照组，观察组患儿的血清Hcy水平升高，维生素B12水平降低(均P<0.05)，见表1。

表1 两组患儿血清维生素B12及Hcy水平的比较(x±s)

2.2 不同严重程度的ASD患儿血清维生素B12及Hcy水平的比较 60例ASD患儿中，重度24例，轻中度36例。相较于轻中度ASD患儿，重度ASD患儿的血清Hcy水平升高，维生素B12水平降低(均P<0.05)，见表2。

表2 不同严重程度的AD患儿血清维生素B12及Hcy水平的比较(x±s)

2.3 ASD患儿血清维生素B12、Hcy水平与CARS评分的相关性 ASD患儿CARS评分与血清维生素B12水平呈负相关(r=-0.592，P<0.001)，与血清Hcy水平呈正相关(r=0.724，P<0.001)。

3 讨 论

ASD是一种神经发育障碍性疾病，临床特征主要包括重复刻板的行为方式、语言沟通能力损伤、社会交往能力缺陷等[7]，其分为3个亚型，包括阿斯伯格综合征、孤独症和未分类的广泛性发育障碍。流行病学研究显示，ASD的发病率逐年升高，男性患者多于女性患者，男女性患者比例为4 ∶1至5 ∶1[8]。ASD是一种由遗传因素、环境因素等多因素共同作用的神经发育障碍性疾病[9]，异卵双生子的同病率约为10%，同卵双生子的同病率可高达60%～90%，孕期环境危险因素主要包括暴露于农药、职业化学品、空气污染、致畸剂等[10-11]。

Hcy是一种含有细胞毒性的含硫氨基酸，其可诱导细胞凋亡并干扰胚胎细胞正常的生命周期[12]。正常生理状态下机体中的Hcy处于动态平衡，但若其代谢途径出现障碍，则会导致机体内的Hcy蓄积，诱发高同型半胱氨酸血症。Hcy主要通过甲基化途径和转硫途径这两种途径进行代谢，其中甲基化途径是以维生素B12作为辅酶，在S-腺苷甲硫氨酸合成酶的作用下，形成S-腺苷蛋氨酸；转硫途径是在胱硫醚合成酶的催化作用下，丝氨酸与Hcy缩合获得胱硫醚，然后进一步生成α-酮丁酸和半胱氨酸。Hcy自身能够产生氧自由基和过氧化氢，还能抑制其他抗氧化酶的活性，加重脂质过氧化反应[13-14]。B族维生素如维生素B6、维生素B12及叶酸均对机体的神经发育起着重要作用[15-16]。研究表明，B族维生素缺乏可增加机体罹患神经疾病、神经发育障碍及老年痴呆症等疾病的风险性[17]。维生素B12又称为钴胺素，人体不能够自身合成，主要依赖于动物食品的摄入，其作为辅酶能够促进蛋白质和核酸的生物合成，提高叶酸的利用率，进而发挥保护神经系统的作用。本研究结果显示，相较于对照组，观察组患儿的血清Hcy水平升高，而血清维生素B12水平降低(均P<0.05)，提示血清Hcy水平升高以及维生素B12水平降低可能参与ASD的发病。

CARS于20世纪80年代由Schopler编制，被广泛应用于孤独症的筛查和诊断。根据该量表，本研究纳入的60例ASD患儿中重度24例、轻中度36例。相较于轻中度ASD患儿，重度ASD患儿的血清Hcy水平升高，维生素B12水平降低(均P<0.05)；进一步行相关性分析，结果显示ASD患儿CARS评分与血清维生素B12水平呈负相关，与血清Hcy水平呈正相关(均P<0.05)。这提示血清Hcy和维生素B12水平可能还与ASD患儿的严重程度相关。

综上所述，ASD患儿的血清维生素B12水平降低而Hcy水平升高，两者可能与ASD的发病及病情严重程度相关。