2019新型冠状病毒肺炎防控期间临床输血血型血清学实验室生物安全防护指南（第二版）*

中国输血协会临床输血管理学委员会

《中华人民共和国传染病防治法》规定新型冠状病毒肺炎已纳入乙类传染病，并采取甲类传染病的预防、控制措施。为了保障新型冠状病毒肺炎防控工作期间实验室生物安全，国家卫生健康委员会组织制定了诸多新型冠状病毒实验室生物安全指南和防控方案等[1-5]，指导各级各类医疗机构规范开展相关实验活动。通过对疾病认识的不断深入和临床输血医学经验的积累，我们在已制定《2019新型冠状病毒肺炎防控期间临床输血血型血清学实验室生物安全防护指南（第一版）》[6]基础上，结合中华医学会其他专业分会[7]和国外SARS、MERS等其他急性呼吸道传染病防控经验[8，9]再次修订形成第二版，旨在指导各级各类医疗机构输血科（血库）持续开展有效的生物安全防护。

1 病例确定 根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第七版）》[10]可分为感染患者（轻型、普通型、重型和危重型）和疑似患者；除感染患者和疑似患者之外其他一般患者。

2 安全原则

2.1 生物安全防护级别

2.1.1 按照《新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）》[1]确定原则：实施血清学检测操作时，应在生物安全二级实验室（BSL-2）开展，尽可能在生物安全柜中进行。个人至少采用二级生物安全防护，定点收治医院应采用三级生物安全防护。

2.1.2 按照《关于印发进一步加强新冠肺炎康复者恢复期血浆救治工作方案的通知》（联防联控机制发〔2020〕29号）[11]文件要求：设置捐献血浆采集点，采集新冠肺炎康复者恢复期血浆工作人员至少采用二级生物安全防护。

2.2 血液成分储存

2.2.1 常规使用血液成分储存：按照国家卫生健康委员会（原卫生部）〔2000〕184号《临床输血技术规范》[12]要求执行。

2.2.2 新冠肺炎康复者恢复期血浆储存

（1）捐献血浆采集点，应分别设置待检-20℃储血冰箱和合格品-20℃储血冰箱。

（2）采集新冠肺炎康复者恢复期血浆应给予特殊标签，中文名：新冠恢复期血浆，英文名：COVID-19CP（convalescent plasma）。

（3）采集后新冠肺炎康复者恢复期血浆（未检测）须单独存放于待检-20℃储血冰箱并醒目标识。（4）新冠肺炎康复者恢复期血浆按国家规定进行相关项目检测。

（5）相关项目检测结果合格后，将新冠肺炎康复者恢复期血浆移至合格品-20℃储血冰箱单独存放并醒目标识。

（6）执行“专柜双人双锁”与出入库登记管理，资料保存备查。

2.3 血浆成分融化

2.3.1 常规使用血浆成分融化按照操作规程执行。

2.3.2 融化新冠肺炎康复者恢复期血浆应单独设置融浆仪，用37℃水浴融化。

3 个人生物安全

一级生物安全防护：医用外科口罩、乳胶手套、工作服、医用防护帽，加手卫生。适用于各级各类医院内一般患者血标本检测。

二级生物安全防护：医用防护口罩或N95口罩、乳胶手套、工作服外隔离衣、医用防护帽，加手卫生。酌情（如有喷溅风险）可加护目镜。适用于开设发热门诊医院内疑似患者血标本检测。

三级生物安全防护：医用防护口罩或N95、单或双层乳胶手套（条件许可，可以不同颜色）、面屏、护目镜、工作服外防护服、单或双层医用防护帽，加手卫生。必要时双层口罩（外医用防护口罩，内N95）。适用于定点医院内感染患者血标本检测。

佩戴和脱卸生物安全防护用品时，应按标准流程进行。正确进行手卫生（六步洗手法）。

4 工作场所

4.1 室内空间

4.1.1 实验室

（1）一般患者：保持良好采光与通风环境，严格执行清洁区、半污染区和污染区相关流程，相关物品分区放置。紫外线消毒符合行业标准（紫外线杀菌灯GB 19258），定期检测性能、完整记录、累积使用不超过规定时限。实验前后各消毒1次，消毒时间不少于30 min。

（2）疑似患者和感染患者：生物安全二级实验室（BSL-2），按国家相关规定执行。

4.1.2 捐献血浆采集点：单独设立，宜远离实验室，室内保持通风，相关物品分区放置，洁污分离，按时更换。紫外线消毒符合行业标准（紫外线杀菌灯GB 19258），定期检测性能、完整记录、累积使用不超过规定时限。每次采集前后各消毒1次，消毒时间不少于30 min。

4.2 工作台面与地面：实验室工作台面宜采用易消毒且具有防渗透功能的材料。实验前后各消毒1次，用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀释）湿巾擦拭消毒工作台面、物品（电话机、电脑键盘和鼠标、记号笔、移液器、试剂瓶等）与地面。消毒液须新鲜配置，不超过24 h。

4.3 取血箱：应分别设置一般患者、疑似患者和感染患者取血箱；每次使用前后各消毒1次，用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀释）湿巾擦拭消毒。消毒液须新鲜配置，不超过24 h。

5 标本采集

5.1 一般患者血标本采集宜一级生物安全防护。

5.2 疑似患者血标本采集应二级生物安全防护，血标本应有特殊醒目标识。

5.3 感染患者血标本采集应三级生物安全防护，血标本应有特殊醒目标识。

6 标本运送接收

6.1 一般患者血标本运送接收按操作规程进行。

6.2 疑似患者和感染患者血标本

6.2.1 血标本和申请单用双层黄色垃圾袋内密封后交至指定送检人员运送。

6.2.2 输血科（血库）人员接收血标本时，与送检人员距离间隔不少于1 m。

6.2.3 输血科（血库）人员对装有患者血标本和申请单的双层黄色垃圾袋表层用75%乙醇喷雾，打开后再对塑封袋表层、塑封袋内层、患者标本试管和申请单用75%乙醇喷雾消毒。

7 标本离心

7.1 一般患者血标本试管置入离心机（宜使用具有生物安全功能的自动脱盖离心机）按操作规程进行。

7.2 疑似患者和感染患者血标本

7.2.1 从塑封袋取出血标本试管后，再用75%乙醇喷雾消毒。

7.2.2 血标本试管置入离心机（宜使用具有生物安全功能的自动脱盖离心机）进行离心操作时，输血科（血库）人员尽可能不要离开离心机。离心停止后等待不少于15 min，打开离心机盖，用75%乙醇喷雾消毒后，取出血标本试管。无自动脱盖离心机，应将离心后的血标本试管移至生物安全柜（外排式）内进行去盖。

如疑似离心过程有意外即停止离心。输血科（血库）人员应改为三级生物安全防护，停止离心后等待不少于30 min，小心打开离心机盖，用75%乙醇喷雾消毒后进行处理。尽可能在生物安全柜（外排式）内将离心管放入和取出转子。

7.2.3 不宜对感染患者血标本进行热放散或乙醚放散等处理。

8 标本检验

8.1 手工方法

8.1.1 应单独设置检测一般患者、疑似患者和感染患者血标本的移液器。

8.1.2 在生物安全柜（外排式）内进行手工方法输血前血型血清学检测，包括但不限于ABO血型鉴定（正反定型）、RhD血型抗原鉴定、抗体筛查和交叉配血试验。加样后的试管或微柱卡用封口胶密闭后再离心。离心停止后等待不少于15 min，打开离心机盖，用75%乙醇喷雾消毒后，取出试管或微柱卡进行正确判读并记录。

8.1.3 将血标本试管盖上新的一次性试管盖，用75%乙醇喷雾消毒。

8.1.4 操作人员手从生物安全柜（外排式）抽出前，用75%乙醇喷雾消毒后，抽出生物安全柜（外排式）后立即更换干净手套。

8.1.5 尽可能减少进行手工检测项目。

8.1.6 不同类型患者血标本宜分开进行实验操作。

8.2 全自动方法

8.2.1 将血标本试管置入全自动血型检测仪内进行检测。

8.2.2 检测完毕将血标本试管盖上新的一次性试管盖。

9 检验后处理

9.1 检测完毕后的带盖的血标本试管，放置在双层黄色垃圾袋内密封。用75%乙醇喷雾消毒垃圾袋表面后，按照国家卫生健康委员会（原卫生部）〔2000〕184号《临床输血技术规范》要求单独放置7 d，存放期结束后高压灭菌消毒，按国家规定医疗废物处理规定执行。

9.2 检测所用的一次性试管、吸管和微柱卡等，放置在双层黄色垃圾袋内密封。用75%乙醇喷雾消毒垃圾袋表面后高压灭菌消毒，按国家规定医疗废物处理规定执行。

10 检测后消毒

10.1 重复使用移液器应用75%乙醇喷雾和湿巾擦拭消毒。

10.2 全自动血型检测仪的加样针和加样架用75%乙醇喷雾消毒。75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀释）湿巾擦拭仪器内外面消毒。消毒液须现用现配，24 h内使用。

10.3 生物安全柜（外排式）内用75%乙醇喷雾和500 mg/L有效氯的消毒液（8 4消毒液，100倍稀释）湿巾擦拭消毒。消毒液须现用现配，24 h内使用。

10.4 实验室台面、地面、离心机、显微镜等用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀释）湿巾擦拭消毒。消毒液须现用现配，24 h内使用。

10.5 实验室检测完毕后，室内空间用紫外灯消毒不少于30 min。

11 实验室操作意外的处理

11.1 疑似患者和感染患者血标本造成生物安全柜（外排式）台面污染，用有效氯含量为5 500 mg/L消毒液进行消毒，消毒时间不小于30 min；消毒液须现用现配，24 h内使用。

11.2 疑似患者和感染患者血标本造成实验室污染，应保持实验室空间密闭，用5 500 mg/L有效氯消毒液湿巾覆盖污染区，消毒时间不少于30 min。大量溢洒时可用过氧乙酸加热熏蒸实验室，剂量为2 g/m3，熏蒸过夜；或20 g/L过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾，用量8 mL/m3，消毒时间（1～2） h。熏蒸时室内湿度60%～80%。

12 储血冰箱消毒

12.1 常规放置血液成分的储血冰箱消毒按照国家卫生健康委员会（原卫生部）〔2000〕184号《临床输血技术规范》要求执行。

12.2 放置新冠肺炎康复者恢复期血浆的-20℃专用储血冰箱，每月化霜1次，用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀释）湿巾擦拭消毒。消毒液须现用现配，24 h内使用。

13 融浆仪消毒

13.1 常规融化血浆成分的融浆仪按照操作规程执行。

13.2 融化新冠肺炎康复者恢复期血浆的融浆仪使用前后各消毒1次，用500 m g/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀释）进行消毒。消毒液须现用现配，24 h内使用。倘若在融化新冠肺炎康复者恢复期血浆时出现血浆外漏现象，须用有效氯含量为5 500 mg/L消毒液对融浆仪进行消毒，消毒时间不小于30 min；消毒液须现用现配，24 h内使用。

14 采浆设备消毒

每次使用采浆设备前后，须用75%乙醇或500 mg/L有效氯的消毒液（84消毒液，100倍稀释）湿巾擦拭采浆设备表面（采血椅等）进行消毒。消毒液须现用现配，24 h内使用。

15 取发血

15.1 定点收治医院疑似患者和感染患者用血时，取血人员应持取血单和已消毒取血箱至输血科（血库）取血，输血科（血库）人员与取血人员间隔距离不少于1 m。

15.2 取发新冠肺炎康复者恢复期血浆应使用感染患者取血箱。

说明：中国输血协会临床输血管理学委员会《2019新型冠状病毒肺炎防控期间临床输血血型血清学实验室生物安全防护指南（第一版）》2020年2月3日通过互联网+发布，执笔者：王娟，涂同涛（华中科技大学同济医学院附属同济医院）；审校者：魏晴（华中科技大学同济医学院附属同济医院）；宫济武（北京医院）；李志强（上海交通大学附属第六人民医院）通信作者

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突