药物研究中化学工作对照品的管理

卞亚 范婧 王益群 黄岚

南京长澳医药科技有限公司 江苏南京 210038

在药物临床前研究、临床研究、药学研究以及药物生产中，化学对照品有着非常重要的作用[1]。根据来源不同，化学对照品可分为法定对照品和工作对照品。法定对照品通常由各药典委员会等管理机构授权的实验室制备并发放。常用的法定对照品有中检院对照品、美国药典对照品、欧洲药典对照品等。工作对照品是指使用机构按照相应法规要求进行赋值的活性物质。药品研究中应首先选用法定对照品，但是药物研究中普遍存在对照品的应用超前于授权机构制备、杂质对照品不全、价格过于昂贵等情况，此时也可以使用工作对照品进行研究。

本文拟参考国家药品标准物质的要求，结合药物研究实际情况，对药物研究过程中工作对照品的获得、表征、赋值和使用等管理进行讨论。

1 工作对照品的获得

工作对照品可以通过购买或者自制的方法获得。供应商可以是西格玛、默克等知名的试剂公司，也可以是其他具有较好质量管理体系的供应商。应对供应商进行审核确认，并对相关凭证进行保存。

如果原料药的纯度达到要求，可以直接使用原料药，也可以采取适当条件对原料药进行精制。杂质对照品除可以通过合成外，也可通过对原料药进行破坏降解、分离纯化等方法进行制备。在未知杂质的获得上，制备色谱技术目前得到了越来越广泛的应用。

2 工作对照品的表征

应选择专属性较强的方法对工作对照品进行结构表征。可以通过元素分析、红外光谱法、核磁共振谱、单晶X射线衍射等方法进行。由于杂质对照品（特别是光学异构体）往往结构相似度较高，因此结构表征往往需要多种方法互相印证来证明样品的结构与预期结构一致。

3 工作对照品质量标准的建立

若有法定标准，工作对照品的标准可以参考法定标准的基础上提高纯度要求制定。若无法定标准，则可参照《原料药质量研究及质量标准制定指导原则》并结合对照品的用途来制定。一般应包括水分（或干燥失重）、残留溶剂、炽灼残渣、有关物质和纯度等。有时熔点、比旋度等作为纯度的重要指标也需要订入。

工作对照品纯度要求可以根据用途来确定[2-3]，如供含量测定纯度应不低于99.5%；仅供有关物质检查纯度不低于95.0%；仅供红外鉴别纯度不低于98.0%；仅供薄层鉴别纯度不低于90.0%；其他鉴别纯度不低于85.0%。

4 工作对照品的赋值

工作对照品的赋值应根据情况分别选用不同的方法进行[4]。

（1）当待赋值的工作对照品有法定对照品的情况下，首选按法定用途的方法与法定对照品比对来赋值。

（2）若无法定对照品进行比对，可采用质量平衡法进行赋值。以经验证的色谱法确定纯度后扣除无机杂质、水分和有机溶剂等后的理论含量来赋值。需要注意的是虽然均使用质量平衡法，但是WHO和USP给出的含量的计算公式并不一致。

（3）鉴别、检查用工作对照品可以在一个实验室内通过不同实验人员进行赋值，而对于含量测定用工作对照品应经过多个实验室协作标定。

5 工作对照品的贮藏和使用

当建立一个新的工作对照品时，必须同时建立其贮藏和使用的方法。一般来说使用冷藏的方法可以显著提高工作对照品的稳定性。但是在常规的冰箱中，湿度可能会对工作对照品的稳定性产生很大的影响。因此需要充分研究工作对照品的引湿性以及热稳定性。工作对照品的贮藏使用方法可参考下列要求。

（1）当工作对照品无引湿性时，可密封后冷藏储存，按照标定的含量直接使用。

（2）工作对照品有引湿性时但是对热不敏感，此时应密封保存，干燥后使用。

（3）当工作对照品有引湿性时且对热敏感，此时应密封后冷藏储存，使用前测定水分。

6 工作对照品的稳定性考察

应根据对照品的不同用途，分别制定其稳定性考察的计划，规定其考察周期、实验方法和接受标准。譬如如红外鉴别用对照品可以其红外光谱与初始图谱进行每年一次进行比对。对于色谱法含量测定用化学对照品则应通过更密集的取样检测确定其降解情况，并可根据稳定性检查结果来预测其后续稳定性情况，同时对检查频率进行调整。

对于可能会开封后反复使用的对照品，应建立适当的方法对开封后对照品的稳定性进行考察，以确定开封后的使用条件。

7 工作对照品的换批

由于药物研究是一个周期性非常长的过程，制备的工作对照品稳定性可能无法覆盖整个研究过程。因此我们需要对工作对照品的稳定性结果及时评估，确认好需要换批的时机，防止对药物的研究造成不良影响。