人工繁育冬虫夏草与野生冬虫夏草的质量对比研究

★ 陈培武 苏杨青 李小凤（华润江中制药集团有限责任公司 南昌 330004）

冬虫夏草Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.为麦角菌科真菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体，具有补肾益肺、止血化痰的功效［1］。我国冬虫夏草主要分布于西藏、青海、四川、云南、甘肃等省区海拔3 600～5 200 m 的局部高山草甸地带［2］。研究发现冬虫夏草的主要成分有虫草多糖、虫草酸、虫草素、脂肪、氨基酸、生物碱（腺苷、脲苷）和30 余种微量元素［3-6］。冬虫夏草在国内外被视为珍品，因价格昂贵，素有“黄金草”之称。但因市场需求量巨大，野生资源匮乏，虫草市场始终呈现供不应求的现象，而且过度的开发也使高原地区的生态遭到严重破坏，加剧了野生虫草资源萎缩的危险。近年来，在政府的大力扶持下，人工繁育的冬虫夏草品种相继问世，而人工繁育品种与野生品种的质量差异也备受关注。本文结合《中国药典》中规定的冬虫夏草质量标准，从性状、有效成分含量测定、重金属及有害物质检查三个方面，对人工繁育的冬虫夏草及来自青海、四川、西藏加查、西藏江达4 个产地的野生虫草的质量进行对比研究。

1 仪器与材料

1.1 仪器 液相色谱仪（美国安捷伦公司）；A3 原子吸收分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；Agilent6890N，ECD 检测器（美国安捷伦公司）。

1.2 试药 腺苷对照品（110879-200202）、脲苷（110887-201803）对照品、重金属、农药残留标准品均购于中国药品生物制品检定院；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析纯；

1.3 药材 人工繁育冬虫夏草（西藏）来源于亳州中信中药饮片厂，人工繁育冬虫夏草（湖北）1和人工繁育冬虫夏草（湖北）2 来源于江西樟树天齐堂中药饮片有限公司，青海冬虫夏草购于益丰大药房，四川冬虫夏草购于江西省中医院药剂科，西藏加查和西藏江达冬虫夏草来源于河北省安国药材市场。

2 方法与结果

2.1 性状检查 对人工繁育及野生冬虫夏草的性状进行检验发现：人工虫草的直径约0.4～0.6 cm，表面颜色呈深黄色，与来自青海的野生虫草相比，除直径较小、颜色略浅外，其他各项性状无明显差异。人工繁育冬虫夏草与野生品种的性状均符合药典规定。

2.2 腺苷、脲苷含量的测定

2.2.1 供试品溶液的制备 分别取人工繁育冬虫夏草、野生冬虫夏草粉末各0.2 g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入90 %甲醇10 mL，称定重量，加热回流30 min，放冷，用90 %甲醇补重，滤过，取续滤液即得。

2.2.2 对照品溶液的制备 称取腺苷对照品适量，加90%甲醇制成每毫升含腺苷0.4108 mg 的溶液。另称取脲苷对照品适量，加甲醇制成每毫升含0.4202 mg 的溶液。

2.2.3 色谱条件 C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相为乙腈—水（4∶96）；柱温为35 ℃；检测波长260 nm；流速为1.0 mL/min；进样量20 μL。

2.2.4 测定结果 人工繁育冬虫夏草腺苷含量与青海野生冬虫夏草无明显差异，略低于来自四川、西藏加查和西藏江达的野生虫草，但所检人工繁育品种和野生虫草均符合药典规定的冬虫夏草中腺苷含量的质量标准；而虫草中另一种主要的生物碱成分脲苷的含量在人工繁育品种和野生品种间无明显差异。结果见表1。

表1 腺苷、脲苷含量测定结果 %

2.3 重金属检测

2.3.1 检测方法 根据《中国药典》（2015 年版）四部通则2321 铅、镉、砷、汞、铜中B 法进行样品处理及检测［7］。

2.3.3 检测结果 如表2 所示，人工繁育冬虫夏草的重金属砷（As）含量为0.4 mg/kg，符合药典规定，而来自青海、四川、西藏加查和西藏江达的野生冬虫夏草As 检测含量均超出药典标准2.0 mg/kg；人工繁殖冬虫夏草重金属Pb、Cu 均低于青海野生冬虫夏草；西藏加查草重金属Pb、Cu 低于人工繁殖冬虫夏草；人工繁殖冬虫夏草重金属Hg、Cd 与四个不同产地的野生虫草无明显差异。

表2 冬虫夏草重金属检验结果 mg/kg

2.4 农药残留检测

2.4.1 检测方法 根据《中国药典》（2015 年版）四部通则2341 农药残留量测定法第一法进行9 种有机氯农药残留量测定法样品处理及检测。

2.4.2 检测结果 人工繁育冬虫夏草和来自青海、四川、西藏加查、西藏江达的野生虫草中均未检出六六六、滴滴涕、五氯硝基苯，因此农药残留项均符合药典规定

3 讨论

从实验结果可知，人工繁育冬虫夏草与来自青海、四川、西藏等地的野生冬虫夏草在外观性状、有效成分含量及农药残留检测方面并无明显差异，均符合药典规定；而人工繁育冬虫夏草重金属Pb 和Cu 的检测结果明显低于来自青海的野生虫草，且人工虫草重金属As 的检测结果更是远低于来自4 个产地的野生品虫草。查阅文献也有人工培育冬虫夏草重金属检验结果优于野生冬虫夏草的论述［8］。

实验表明，人工繁育的冬虫夏草与野生冬虫夏草按药典标准检测性状、有效成分含量和农药残留无明显质量差异，同时人工繁育的冬虫夏草可以更有效的控制重金属等危害物质的含量，提高冬虫夏草使用的安全性。另一方面，目前野生冬虫夏草为珍贵稀缺药材，人工繁育品的出现可以补足市场空缺，同时避免过度采挖虫草而造成高原生态环境的破坏。本次实验结果为使用人对冬虫夏草购买提供参考、为冬虫夏草有害物质控制提供方向，同时也为进一步对人工繁育虫草的质量研究做了铺垫。由于本次实验样品较少，今后还将进一步对人工繁育冬虫夏草进行深入研究。