抗磷脂抗体综合征与不明原因习惯性流产的相关性分析

李智全

(濮阳市人民医院 血研所，河南 濮阳 457000)

流产为妊娠期常见并发症之一，特别是不明原因习惯性流产，每次流产往往发生于同一妊娠月份，且流产过程与一般流产过程相同。资料显示，不明原因习惯性流产患者体内多分离出自身抗体，以抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody，APA)居多[1]。APA常见抗体类型为抗心磷脂抗体(anticardiolipin antidody，ACA)，其表达与多种疾病有关，如深静脉血栓、视网膜血栓、肺栓塞、胎盘栓塞，同时可导致产妇出现一系列病理妊娠现象，如死胎、早产、习惯性流产[2]。另有研究表明，APA是导致抗磷脂抗体综合征患者病理妊娠、血栓形成的危险因素[3]。本研究通过检测不明原因习惯性流产孕妇和健康孕妇ACA抗体的表达情况，旨在分析ACA表达与流产的相关性，为临床确定合理治疗方案提供指导信息。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2016年11月至2018年12月濮阳市人民医院收治的71例不明原因习惯性流产孕妇作为习惯性流产组：年龄19～35岁，平均(27.02±2.67)岁；孕周6～11周，平均(8.56±0.82)周；流产次数为2次25例，3次29例，4次17例；体质量指数(body mass index，BMI)19～26 kg·m-2，平均(22.71±1.33)kg·m-2。纳入65例同期健康孕妇作为对照组：年龄20～35岁，平均(27.51±2.13)岁；经产妇20例，初产妇45例；孕周6～12周，平均(8.60±0.75)周；BMI 20～26 kg·m-2，平均(23.02±1.11)kg·m-2。对照组和习惯性流产组年龄、流产时孕周、BMI一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。 本研究经濮阳市人民医院医学伦理委员会审核通过。

1.2 选取标准

1.2.1纳入标准 (1)习惯性流产组符合《妇产科学》不明原因习惯性流产诊断标准[4]：夫妇双方染色体核型正常，自身免疫抗体(抗核抗体、APA)阴性，男方精液常规检查正常，封闭抗体阴性。(2)对照组：B超显示宫内妊娠，胎心搏动，无死流产、死胎史。

1.2.2排除标准 (1)遗传、解剖、感染及内分泌等因素所致流产；(2)重要器官器质性病变；(3)严重妊娠合并症；(4)近期参与类似试验；(5)依从性差，无法配合研究。

1.3 检测方法于清晨采集患者空腹肘静脉血5 mL，进行ACA-IgM、ACA-IgG、ACA-IgA检测，按加样方案向相应微孔分别加100 μL校准品、阳性对照、阴性对照，室温(18～25 ℃)温育30 min；倒掉微孔板内液体，用稀释后的清洗缓冲液3次，每次300 μL，用稀释后清洗缓冲液清洗3次，每次450 μL，将TECAN洗衣板设置为“Overflow Modus”，清洗时注意缓冲液在微孔中至少保留40 s，之后倒掉，清洗后将微孔板倒置在吸水纸上拍打，去除残存清洗液，注意清洗后遗留在微孔中残液可干扰底物反应，从而降低吸光度值，而清洗不充分可能会导致吸光度值偏高，滴加100 μL酶结合物至每一微孔，室温温育30 min，倒掉微孔板内液体；滴加100 μL色原/底物液至每一微孔，室温避光温育15 min，以与加色原/底物液相同速度、顺序滴加100 μL终止液至每一微孔，在450 nm下比色，参考波长620～650 nm，加完终止液后30 min内比色，凡样品孔OD值>阴性对照孔均数2倍即为阳性。上海酶联生物科技有限公司提供所用试剂和试剂盒，完全参照试剂盒说明书操作。

1.4 妊娠结局妊娠结局分为保胎成功和保胎失败。保胎成功：先兆流产症状(腰酸、阴道流血、腹坠、腰痛)基本消失，妊娠继续；孕10周及以上行彩超检查胎儿大小与孕周基本符合，胎心搏动正常。保胎失败：血清β-人绒毛膜促性腺激素水平持续降低，临床无继续保胎意义；彩超显示胚胎或妊娠囊畸形，或孕7周后未见胎心搏动，1周后复查仍未见者，或先兆流产发展成不全流产、难免流产。

1.5 观察指标(1)对照组和习惯性流产组ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG阳性表达率。(2)随访所有患者至妊娠12周，统计不同妊娠结局患者ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表达阳性率。(3)ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表达阳性率与不明原因习惯性流产关系。(4)ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表达阳性率与不明原因习惯性流产患者妊娠结局关系。

1.6 统计学方法通过SPSS 22.0统计软件处理数据。采用χ2检验比较组间ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表达阳性率；采用Spearman相关性分析、logistic回归分析ACA表达与不明原因习惯性流产及其妊娠结局的关系。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组和习惯性流产组ACA表达情况习惯性流产组ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表达阳性率高于对照组(P<0.001)。见表1。

表1 对照组和习惯性流产组ACA表达情况比较[n(%)]

2.2 习惯性流产组不同妊娠结局患者ACA表达情况习惯性流产组保胎成功患者ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM表达阳性率低于保胎失败患者(P<0.05)。见表2。

表2 习惯性流产组不同妊娠结局患者ACA表达 情况[n(%)]

2.3 ACA表达与不明原因习惯性流产的关系logistic回归分析显示，ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM是不明原因习惯性流产的独立危险因素(P<0.05)。见表3。

表3 ACA表达与不明原因习惯性流产的关系

2.4 ACA表达与妊娠结局的关系Spearman相关性分析显示，ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM与妊娠结局呈负相关(P<0.001)。见表4。

表4 ACA表达与妊娠结局的关系

3 讨论

不明原因习惯性流产病因包含遗传、内分泌、解剖、免疫等因素，其中免疫因素占40%～60%[5]。可能与母胎之间存在免疫失衡，发生免疫排斥，使得胎儿同种异位移植失败有关。在寻找不明原因习惯性流产患者的免疫因素时，ACA逐渐引起了关注。

相关研究指出，ACA是导致不明原因习惯性流产的主要免疫因素[6]。关于ACA引起流产原因尚无明确、统一机制，部分研究认为与前列腺素抑制说有关，当机体受到损伤时，ACA可结合血管内皮细胞产生抗原-抗体反应，抑制血管内皮细胞合成前列腺素，促进血栓形成，同时ACA损伤血管内皮细胞后，可减少致活物质，降低纤溶活性，增加血栓倾向，且可诱发凝血物质黏附、部分凝血因子活化，增加血栓倾向[7-8]。在此背景下，本研究选取ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG等相关指标，经对比分析发现，习惯性流产组ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表达阳性率高于对照组，与夏书琴等[9]研究结果一致。logistic回归分析显示，ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM与不明原因习惯性流产有关。由此可见，ACA-IgA、ACA-IgM、ACA-IgG表达升高可引起较强抗原抗体反应，增加流产风险。

此外，本研究结果还显示，习惯性流产组保胎成功患者ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM表达阳性率低于保胎失败患者，ACA-IgA、ACA-IgG、ACA-IgM与妊娠结局呈负相关，该结果提示ACA表达与不明原因习惯性流产患者妊娠结局密切相关。考虑原因可能与以下几方面有关：(1)ACA可与胎盘血管的磷脂受体发生作用，减少胎盘部分血液，导致胎盘缺血，从而诱发胎儿死亡并流产；(2)ACA可吸附滋养层磷脂，致使抗原无法得到足够吸附分化，抑制胚胎顺利着床，导致保胎失败；(3)ACA可直接结合滋养细胞，影响滋养细胞功能，导致胚胎无法顺利着床，从而引发流产；(4)ACA可诱发胎盘血管炎症反应，造成胎盘无法及时、足量提供氧气及营养物质，无法供胎儿生长发育，出现胎死宫内[10]。

综上，不明原因习惯性流产患者ACA呈高表达，与妊娠结局密切相关，可为临床明确病因、制定干预方案提供参考，值得临床推广及应用。