东莞地区新生儿G6PD缺乏症发生率及基因突变分析

叶立新 黄锐华 莫润旺 谢彩连 蔡小娟

【摘要】 目的：了解東莞地区出生人群葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症发生率及其基因突变情况。方法：选择2016年9月1日-2019年12月31日东莞市送检的新生儿疾病筛查标本，共432 820例，其中男232 254例，女200 566例，出生后72 h采集足跟血制作成干血斑，采用荧光定量法进行G6PD缺乏症筛查，对筛查阳性者召回采集静脉血采用G6PD/6PGD比值法进行确诊，对部分确诊者采用荧光定量PCR多色熔解曲线法（MMCA）进行G6PD基因突变分析。结果：东莞地区新生儿G6PD缺乏症筛查总体阳性率为3.60%（15 588/432 820），其中男、女阳性率分别为5.06%（11 750/232 254）和1.91%（3 838/200 566），两者筛查阳性率比较，差异有统计学意义（字2=3 067.24，P<0.001）;本市户籍、本省户籍、外省户籍新生儿筛查阳性率分别为3.50%（4 684/133 719）、5.79%（5 303/91 553）、2.70%（5 601/207 548），本市户籍新生儿筛查阳性率与本省户籍、外省户籍比较，差异均有统计学意义（字2=672.31、179.95，P<0.001）。筛查阳性新生儿召回7 044例，召回率45.19%，确诊5 907例，确诊符合率83.86%，推算东莞地区新生儿G6PD缺乏症总体发生率为3.02%;男女的确诊符合率比较，差异有统计学意义（字2=1 164.83，P<0.001）。219例确诊G6PD缺乏症新生儿中，检测出基因突变216例，共检出10种突变类型：67例（31.02%）c.1376G>T、67例（31.02%）c.1388G>A、26例（12.04%）c.871G>A、25例（11.57%）c.95A>G、7例（3.24%）c.1024C>T、7例（3.24%）c.392G>T、3例（1.39%）c.517T>C、2例（0.93%）c.1004C>A、1例（0.46%）c.1360C>T、1例（0.46%）c.592C>T和7种复合突变。结论：东莞地区是G6PD缺乏症的高发区，最常见的三种基因突变类型为c.1376G>T、c.1388G>A、c.871G>A，积极扎实开展新生儿G6PD缺乏症筛查具有重要意义。

【关键词】 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 新生儿疾病筛查 多色熔解曲线法 基因突变

[Abstract] Objective： To investigate the incidence of G6PD deficiency and its gene mutation in the population born in Dongguan. Method： Choice on September 1， 2016 to December 31， 2019， the city makes the newborn screening specimens， a total of 432 820 cases， including male 232 254， female 200 566， 72 h after birth to collect heel blood into dried blood spots， using the fluorescent quantitative method for screening G6PD deficiency， for screening positive recall venous blood was collected， using G6PD/6PGD ratio method to carry on the diagnosis， for part of those Diagnosed G6PD gene mutation were analyzed by fluorescence quantitative PCR multicolor melting curve assay （MMCA）. Result： This study showed that the overall positive rate of screening for G6PD deficiency in newborns in dongguan was 3.60% （15 588/432 820）， and the positive rates of male and female were 5.06% （11 750/232 254） and 1.91% （3 838/200 566）， respectively， the difference between the two screening positive rate was statistically significant （字2=3 067.24， P<0.001）; the positive screening rate of newborns with the citys household registration， provincial household registration and non provincial household registration was 3.50% （4 684/133 719）， 5.79% （5 303/91 553） and 2.70% （5 601/207 548）， respectively， the positive rate of newborn screening in this city was statistically significant compared with that in this province and other provinces （字2=672.31， 179.95， P<0.001）. There were 7 044 cases of recall of positive newborns after screening， with a recall rate of 45.19%， 5 907 cases confirmed， and a confirmed compliance rate of 83.86%， the overall incidence of G6PD deficiency among newborns in Dongguan was calculated to be 3.02%; there was a significant difference in the confirmed compliance rate between men and women （字2=1 164.83， P<0.001）. Among the 219 newborns diagnosed with G6PD deficiency， 216 were detected with gene mutations， and a total of 10 mutation types were detected： 67 cases （31.02%） of c.1376G>T， 67 cases （31.02%） of c.1388G>A， 26 cases （12.04%） of c.871G>A， 25 cases （11.57%） of c.95A>G， 7 cases （3.24%） of c.1024G>T， 7 cases （3.24%） of c.392G>T， 3 cases （1.39%） of c.517G> c， 2 cases （0.93%） of c.1004C >T， 1 case （0.46%） of c.1360C >T， 1 case （0.46%） of c.592C>T and 7 compound mutations. Conclusion： Dongguan area is a high incidence area of G6PD deficiency， and the three most common gene mutations are c.1376G>T， c.1388G>A， and c.871G>A， it is of great significance to actively and effectively carry out screening for G6PD deficiency in newborns.

2.3 219例G6PD缺乏症确诊阳性新生儿基因突变分析 219例确诊G6PD缺乏症新生儿中，检测出基因突变216例，共检出10种突变类型：67例c.1376G>T、67例c.1388G>A、26例c.871G>A（25例c.95A>G、7例c.1024C>T、7例c.392G>T、3例c.517T>C、2例c.1004C>A、1例c.1360C>T、1例c.592C>T和7种复合突变，见表4。

3 讨论

G6PD缺乏症是目前全球人类最常见的遗传性酶缺陷病，在全球主要分布在非洲、拉丁美洲、地中海沿岸及东南亚地区;在中国呈“南高北低”分布，主要在云南、广西、海南、广东、贵州、四川等南方地区高发[4-5]。据文献[6-7]报道，广西地区新生儿G6PD缺乏症筛查阳性率为7.36%，广西户籍新生儿G6PD缺乏症筛查阳性率为8.37%;云南10个民族G6PD缺乏症筛查阳性率为0～8.6%[8];海南省新生儿G6PD缺乏症筛查阳性率为3.17%，确诊阳性率为1.46%[9];1988年，杜传书教授首次报告广东地区人群G6PD缺乏症发病率为4.2%[10];广东省内多个地区人群G6PD缺乏症筛查阳性率也有相继报道，江门地区4.14%、广州4.60%、中山3.6%、梅州5.18%、河源7.371%、珠海3.2%[11-16]。本研究数据显示，本地区新生儿G6PD缺乏症筛查阳性率为3.60%，根据确诊符合率推算确诊发生率为3.02%，低于全省平均水平，但与笔者前期文献[17]研究数据对比显示，本地区出生人群G6PD缺乏症发生率有所上升，可能与本地区人口结构变化及不同地区户籍人群间婚配生育有关;同时，本次研究样本基数大，应该更能客观反映本地区新生儿G6PD缺乏症发生率情况。按户籍分类统计分析，本市户籍新生儿G6PD缺乏症筛查阳性率低于本省户籍新生儿，但高于省外户籍新生儿，说明G6PD缺乏症在本地区也属于高发区，符合世界卫生组织（WHO）建议在男性患病率>3%～5%的地区应常规开展G6PD缺乏症的产前健康教育及新生儿筛查[3]。

G6PD缺乏症属于X连锁不完全显性遗传病，由于男性只有1条X染色体而女性有2条X染色体，因此，在基因缺陷上，男性患者只存在半合子形式，女性患者则存在杂合子与纯合子两种形式。男性半合子与女性纯合子常出现比较严重的酶缺陷而容易被检出。而女性杂合子，存在缺陷的G6PD基因既可以在失活的X染色體上，也可以在非失活的X染色体上，致使其体内同时存在G6PD缺乏红细胞和正常红细胞但非平均分布。不同女性杂合子患者体内G6PD缺乏红细胞和正常红细胞比例不同，决定其G6PD活性具有异质性，酶活性即可表现正常、中度缺乏或显著缺乏。因此，女性杂合子难以单纯根据酶活性进行准确诊断[18-19]。李磊等[20]研究显示，采用酶活性检测的方法，对携带G6PD基因突变的女性，漏检率达70.2%，漏检均为单一G6PD基因杂合突变。这可能也是G6PD缺乏症筛查阳性率女性显著低于男性的一个重要原因。因此，采用酶活性检测联合基因突变检测的方式，更有利于女性杂合子的检出。

目前，全世界已报道180多种G6PD基因突变类型[21]，在我国人群中发现的突变有33种，其中最常见的突变类型为c.1388G>A、c.1376G>T、c.95A>G[18]。本文219例确诊G6PD缺乏症新生儿中，检测出基因突变216例，共检出10种突变类型和7种复合突变，占比最大的前三种突变类型为c.1376G>T、c.1388G>A、c.871G>A，c.95A>G为第四位，基本与文献[22]报道相一致。由于条件限制，其余3例基因突变检测阴性者未能做进一步测序以确定是否存在其他基因突变类型。

G6PD缺乏的早期新生儿高胆红素血症发病率高、发病早、程度重，可引起核黄疸[23]，如处理不及时可造成智力低下甚至致死。目前，对G6PD缺乏尚无根治办法，临床上仅对症治疗。因此，进行新生儿G6PD筛查非常必要，对筛查出G6PD缺乏的新生儿家长进行健康教育，告知其避免让新生儿接触特殊药品、食品，防止溶血的发生;同时，可对G6PD缺乏新生儿生理性黄疸期纳入高危儿管理，有效预防高胆红素血症、核黄疸和神经系统后遗症的发生、提高人口素质。

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（收稿日期：2020-04-03） （本文编辑：张爽）