PCOS患者IL-17A、Betatrophin、可溶性CD68表达水平及与卵巢功能的关系

席彦东 沈自旺 白虹

多囊卵巢综合征（Polycystic ovarian syndrome，PCOS）是临床常见的女性内分泌疾病，发病率5%～10%［1］。研究指出，PCOS 可增加2 型糖尿病、心血管疾病、以及子宫内膜癌的发生风险，严重影响女性身心健康［2］。PCOS 相关病理生理机制研究较多，但目前尚无定论，其中慢性炎症因子与疾病的发生发展密切相关，白细胞介素-17A（Interleukin-17A，IL-17A）被证实在PCOS 患者体内表达增加，可促进疾病进展［3］。可溶性CD68（Soluble CD68，sCD68）作为单核/巨噬细胞的特异性表面分子标志物，在卵巢型子宫内膜异位症的发生发展中发挥重要作用［4］。此外，Betatrophin 是一种新发现的影响糖脂代谢的因子，被认为有调节脂代谢、改善糖耐量的双重作用，在PCOS 患者体内表达升高［5］。基于此，本研究尝试分析PCOS 患者选取IL-17A、Betatrophin、sCD68 表达水平及与卵巢功能的关系，旨在为临床治疗本病提供数据支持。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年4月至2019年4月银川市第一人民医院妇科102 例PCOS 患者作为研究组，另选同期48 例健康体检者作为对照组。纳入标准：①研究组均符合PCOS 诊断标准［6］，对照组均为体检结果正常者；②自主行为能力良好，能配合完成研究；③近2 个月内未使用过激素类药物、胰岛素和降脂类药物；④月经周期规律；⑤知晓本研究，已签署同意书。排除标准：①精神疾病患者；②恶性肿瘤患者；③血液系统疾病患者；④全身感染性疾病患者；⑤合并卵巢早衰、子宫畸形、宫腔粘连、甲状腺功能异常等疾病者；⑥严重心脑肝肾功能不全者。

1.2 方法

研究组均参照相关指南［7］行促排卵治疗，持续治疗3 个月后根据获卵数评估卵巢反应，控制性促超排卵周期卵数≤5 个为卵巢低反应，获卵数＞5 个为卵巢正常反应。治疗前，于月经来潮后2～5 d，采集研究对象空腹静脉血6 mL，以3 500 rpm 转速离心处理5 min，取血清标本置于-70℃冷藏室待检，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平，试剂盒分别购自苏州浩欧博生物医药有限公司、辽宁迈迪生物科技有限公司、湖南省丽拓生物科技有限公司，检测操作均按照试剂盒说明书进行。

1.3 观察指标

①研究组与对照组血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平。②研究组不同卵巢反应患者临床资料及血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平，临床资料包括年龄、初潮年龄、病程、结婚时间、性生活史、不孕年限、流产史、初潮月经紊乱、家族遗传史、BMI、胰岛素抵抗指数（Homa-insulin resistance，HOMA-IR）、血清黄体生成素（Luteinizing hormone，LH）/卵泡刺激素（Follicle stimulating hormone，FSH）、抗缪勒管激素（Anti-Müllerian hormone，AMH），HOMA-IR=空腹血糖×空腹胰岛素/22.5；取血清标本，采用化学发光免疫分析法检测血清LH 及FSH 水平，试剂盒购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，计算LH/FSH 值；采用酶联免疫吸附法检测血清AMH 水平，试剂盒购自辽宁迈迪生物科技有限公司。③探究血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、临床指标与卵巢反应性的相关性，及血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 与临床指标的相关性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行数据处理，计量资料以（±s）表示，采用t检验，计数资料以n（%）表示，采用χ2检验，通过Logistic 进行多因素回归分析，采用Pearson 进行相关性分析，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较

对比两组年龄、初潮年龄、性生活史、体质量指数（Body Mass Index，BMI）、吸烟和饮酒情况，比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 两组一般资料比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of 2 groups of general data［n（%），（±s）］

表1 两组一般资料比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of 2 groups of general data［n（%），（±s）］

注：饮酒定义：每日饮白酒≥2 两或啤酒≥2 瓶，每周饮酒≥1 次；吸烟定义：每天抽烟≥1 支，连续吸烟时间＞6月。

项目年龄（岁）初潮年龄（岁）性生活史（年）BMI（kg/m2）吸烟t/χ2值1.528 1.197 1.096 1.502 0.388 P 值0.129 0.233 0.275 0.135 0.533是否饮酒0.558 0.270是否研究组（n=102）31.15±4.35 13.48±1.61 5.39±1.09 25.91±1.77 26（25.49）76（74.51）20（19.61）82（80.39）对照组（n=48）29.86±5.71 13.15±1.49 5.61±1.26 25.46±1.58 10（20.83）38（79.17）7（14.58）41（85.42）

2.2 研究组与对照组血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平

研究组血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平较对照组高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum IL-17A，Betatrophin and sCD68 levels between the 2 groups（±s）

表2 两组血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum IL-17A，Betatrophin and sCD68 levels between the 2 groups（±s）

组别研究组对照组t 值P 值n 102 48 IL-17A（pg/mL）18.75±3.52 5.07±1.03 26.358＜0.001 Betatrophin（pg/mL）178.34±48.19 106.12±35.26 9.274＜0.001 sCD68（μg/mL）2.22±0.41 1.68±0.30 8.150＜0.001

2.3 不同卵巢反应患者临床资料

不同卵巢反应性患者HOMA-IR、血清LH/FSH、AMH 水平相比，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 不同卵巢反应患者临床资料［n（%），（±s）］Table 3 Clinical data of different ovarian responses［n（%），（±s）］

表3 不同卵巢反应患者临床资料［n（%），（±s）］Table 3 Clinical data of different ovarian responses［n（%），（±s）］

资料t/χ2值P 值年龄（岁）初潮年龄（岁）病程（年）性生活史（年）结婚时间（年）不孕年限（年）初潮月经紊乱0.960 1.658 0.629 0.973 1.015 0.862 0.003 0.339 0.100 0.531 0.333 0.313 0.391 0.959有无流产史0.060 0.807有无家族遗传史0.039 0.844有无BMI（kg/m2）HOMA-IR LH/FSH AMH（ng/L）卵巢低反应患者（n=48）31.56±4.17 13.74±1.59 3.27±1.02 5.49±1.13 6.43±1.27 2.84±0.51 14（29.17）34（70.83）8（16.67）40（83.33）16（33.33）32（66.67）25.77±1.71 5.53±1.14 1.84±0.30 0.40±0.06卵巢正常反应患者（n=54）30.73±4.52 13.21±1.63 3.14±1.06 5.28±1.05 6.17±1.31 2.75±0.54 16（29.63）38（70.73）10（18.52）44（81.48）19（35.19）35（64.81）26.04±1.83 3.26±0.82 1.23±0.27 1.53±0.35 0.767 11.635 10.809 22.070 0.445＜0.001＜0.001＜0.001

2.4 不同卵巢反应患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD 68 水平

卵巢低反应患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平较卵巢正常反应患者高差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4 不同卵巢反应患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平比较（±s）Table 4 Comparison of serum IL-17A，Betatrophin and sCD68 levels in patients with different ovarian reactions（±s）

表4 不同卵巢反应患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 水平比较（±s）Table 4 Comparison of serum IL-17A，Betatrophin and sCD68 levels in patients with different ovarian reactions（±s）

组别卵巢低反应患者卵巢正常反应患者t 值P 值n 48 54 IL-17A（pg/mL）23.31±4.72 14.70±3.06 11.048＜0.001 Betatrophin（pg/mL）211.46±53.37 148.90±42.08 6.609＜0.001 sCD68（μg/mL）2.57±0.52 1.91±0.23 8.447＜0.001

2.5 血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、临床指标与卵巢反应性的关系

Pearson 相关性分析显示，血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、HOMA-IR、LH/FSH 与卵巢反应性呈负相关，AMH 与卵巢反应性呈正相关（P＜0.05），见表5。

表5 血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、临床指标与卵巢反应性的关系Table 5 Relationship between serum IL-17A，Betatrophin，sCD68，clinical indicators and ovarian reactivity

2.6 血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 与临床指标的关系

Pearson 相关性分析，血清IL-17A（r=0.524、0.725、0.514）、Betatrophin（r=0.695、0.632、0.597）、sCD68（r=0.328、0.485、0.540）与HOMA-IR、LH/FSH、AMH 呈正相关（P＜0.05），见图1。

2.7 多元线性逐步回归分析

多元线性逐步回归分析，将HOMA-IR、LH/FSH、AMH 等其他因素控制后，血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 仍与卵巢反应性显著相关（P＜0.05），见表6。

表6 多元线性逐步回归分析Table 6 Multiple linear stepwise regression analysis

3 讨论

PCOS 受基因遗传和环境因素的共同影响，发病机制复杂，文献报道证实，PCOS 患者多数处于一种低度慢性炎症状态，炎症与胰岛素抵抗相互影响，最终共同促进了PCOS 的发生与发展［8-9］。本研究发现，PCOS 患者血清IL-17A 表达水平明显高于健康体检者，提示PCOS 患者处于慢性炎症状态，与上述研究结论一致。IL-17A 水平升高可直接或间接诱导多种细胞因子、趋化因子、炎症因子和抗微生物蛋白识别介导自身免疫和慢性炎症反应，炎症反应增强可促进胰岛素抵抗，从而参与PCOS 的发生。研究指出，巨噬细胞广泛分布在女性生殖系统如胎盘、乳腺、子宫、卵巢等组织中，作为免疫系统中能够导致炎症的细胞，其可释放多种炎性因子［10］。CD68 主要在单核细胞、巨噬细胞、粒细胞等细胞中表达，被认为是巨噬细胞最可靠的标记物，广泛应用于检测人体组织中存在的巨噬细胞［11-12］。本研究发现，PCOS 患者血清sCD68水平处于高表达状态，提示血清sCD68 表达升高可能参与PCOS 的发生。本研究还发现，Betatrophin在PCOS 患者血清中呈异常高表达状态，也可能参与PCOS 的发生。Betatrophin 由Yi P 等［13］于2013年在胰岛素抵抗小鼠模型中首次发现并命名，认为胰岛素抵抗可诱导肝脏合成、分泌Betatrophin。且新近研究显示，Betatrophin 可能通过抑制脂肪酶活性，调节脂代谢，从而促进PCOS 患者体内的脂代谢紊乱，参与PCOS 的发生发展［14］。

本研究进一步通过相关性分析发现，血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 与HOMA-IR、LH/FSH、AMH 呈正相关，其中HOMA-IR 是反映机体胰岛素抵抗的重要措施，LH/FSH、AMH 是反映卵巢功能的主要指标，因此我们认为通过检测血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 表达情况可在一定程度上反映PCOS 患者胰岛素抵抗及卵巢功能，有助于判断患者病情。促排卵是临床治疗PCOS 的主要方法之一，治疗前需结合患者具体情况，如病情、卵巢储备功能等，制定治疗方案，以提高卵巢对治疗的反应性，保障卵子回收效率。本研究发现，PCOS 患者血清IL-17A、Betatrophin、sCD68、HOMA-IR、LH/FSH、AMH 均与卵巢反应性存在密切相关性，且在控制了HOMA-IR、LH/FSH、AMH等其他因素后，血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 仍与卵巢反应性显著相关，提示血清IL-17A、Betatrophin、sCD68 表达水平升高反映出PCOS 患者存在卵巢低反应性，治疗效果可能较差，应积极调整治疗方案，以改善治疗效果。