抗癌性中药材蛇莓、无花果、蒲公英脂肪酸组成研究

冉乾鸿，姜 波，谭凯升，罗 艺，刘月洋，徐志芊

（大连民族大学生命科学学院，辽宁大连 116600）

南方降雨多且气候温和，适合动植物的生长，因此自然资源极为丰富，特别是中药材种类多不胜数。平时经常接触到的一些常见的植物或者水果在中药配方中都频繁出现。本研究选用的中药材都是南方普遍存在的，同时都具有抗癌性。经检测，无花果的叶子、果实及乳汁中均含有不同成分的抗癌性元素，如补骨脂素、苯甲醛、佛手柑内酯、多糖和硒等抗癌活性物，有研究表明，能提高人体的免疫力、有抑制4 种癌细胞发生发展的功效，故有人称其为“抗癌斗士”[1]。蛇莓的根、茎、叶均可入药，常用于临床医治多种热病惊痫、咳嗽吐血、咽喉肿痛、疔疮痈肿、蛇虫咬伤、湿疹、痢疾及烫火伤等。近年来发现了蛇莓有显著的抗肿瘤活性[2-3]，从而引起国内外学者的注意。蒲公英作为临床治疗研究常用的中草药，其药味苦甘、性寒,无毒，具有消肿散结、止痛散淤、通乳、利尿通淋、通便胃、保肝利胆、增强免疫和防癌抗衰等功效[4]。

这3 种中药材都具有抗癌性，近年来才开始有关方面的研究。当前对其脂肪酸组成与其药用成分价值的研究极少。因此，本研究分别对蛇莓、无花果、蒲公英的脂肪酸进行分析和比较，通过所得的数据来确定其脂肪酸的组成。GC－MS 法将色谱法的分离能力与质谱法的定性能力相结合，由色谱柱对各组分分配能力不同而对组分进行分离，同时利用不同离子在电磁场的运动行为不同而进行分离相结合，具有高灵敏度、定性准确、分析快速的优点[5]。

1 试验方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 试剂。石油醚、甲醇、氢氧化钾、三氟化硼-乙醚溶液等试剂，分析纯：正己烷，优级纯。

1.1.2 仪器。GCMS：QP2010 plus 气相色谱-质谱联用仪，日本岛津公司；气相色谱部GC-2010，AOC-20i 自动进样器，日本岛津公司；RE52CS 型旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；恒温水浴锅，巩义市英峪予华仪器厂；BSA1245 型分析天平（万分之一感量），赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；DHG-9036A 型电热恒温鼓风干燥箱，上海精宏实验设备有限公司；250mL 索氏提取器，上海豫明仪器有限公司生产；蛇形冷凝管，上海豫明仪器有限公司生产。

1.2 中药材的脂肪酸的测定

1.2.1 样品处理。试验步骤参照姜波等[6]论文内容进行，中药材蛇莓、无花果、蒲公英采购于贵州铜仁药店。首先将3 份样品在70℃的烘箱中烘干，干燥后分别放入研磨机粉碎成粉末，然后将已粉碎的样品分别过60 目筛，并放入袋中密封储存。

1.2.2 中药材油脂的提取。精确称取干燥粉碎后3 种中药材样品各10g（精确至0.0001g）于索氏提取器中，加入180mL 石油醚（30～60℃），在42℃恒温水浴回流6h，在37℃（水浴温度）下蒸发至无溶剂，然后在60℃水浴中使溶剂完全蒸发，得到蛇莓油脂、无花果油脂和蒲公英油脂。

1.2.3 油样品甲酯化。分别精确量取0.2mL 已提取的3种中药材油脂，分别放入3 个10mL 塞管中，分别添加2.0mL 5%氢氧化钾甲醇溶液，立即摇匀。将装好反应溶液的塞管放入60℃恒温水浴中反应30min，待冷却至室温，加14%三氟化硼甲醇溶液1.0mL 至塞管，摇匀。置60℃恒温水中3min，然后冷却至室温，加入正己烷2mL，摇匀。静置完成后，依次取上层溶液进行GC-MS 分析。

1.2.4 气相色谱-质谱条件。气相色谱条件：rxi-5si1ms毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）；控制程序连续升温，初始工作为温度150℃，保持1min，以12℃/min 升至200℃，保持20min，以15℃/min 升至230℃，保持45min；进样温度250℃；柱温180℃，进样量1μL；载气为高纯氦气，柱流速为1mL/min。质谱条件：离子源为EI 源，电力电压参数70eV，离子源温度200℃，接口端温度230℃，溶剂延迟1.6min，质量扫描控制范围40.00～600.0m/z。

1.2.5 3 种中药材油脂脂肪酸测定及相对含量的计算。通过气相色谱-质谱联用仪来测定3 种中药材油中的脂肪酸组成，采用GC-MS solution 工作站对植物油中的脂肪酸进行定性分析，以确定蛇莓、无花果和蒲公英的脂肪酸类型。然后用归一化法计算脂肪酸的相对含量。

2 试验结论

2.1 3 种中药材的得油率

表1 3 种中药材得油率

2.2 3 种中药材的脂肪酸甲酯总离子流图

图1 蛇莓的脂肪酸甲酯总离子流图

图2 蒲公英的脂肪酸甲酯总离子流图

图3 无花果的脂肪酸甲酯总离子流图

表2 蛇莓中所含脂肪酸种类及各种脂肪酸相对含量

以气相色谱-质谱联用仪检测3 种中药材甲酯化的油脂，通过GC-MS solution 工作站解析谱图，确定各样品油脂中脂肪酸种类和相对含量。3 种中药材的总离子流图分别见图1、2、3。

2.3 脂肪酸相对含量计算公式

根据归一化方法计算分析3 种样品中各种脂肪酸的相对含量，按如下公式计算：

相对含量（%）=一种脂肪酸甲酯峰面积/各种脂肪酸甲酯峰面积之和×100。

2.4 结果与讨论

由表2 可知，通过索氏提取法提取蛇莓、蒲公英、无花果中的油脂，其得油率分别为0.91%、0.29%、0.69%，其中蛇莓的得油率最高，蒲公英的得油率最低。

表3 蒲公英中所含脂肪酸种类及各种脂肪酸相对含量

表4 无花果中所含脂肪酸种类及各种脂肪酸相对含量

由表2 得，蛇莓油脂中共分离出14 种脂肪酸，其中主要的脂肪酸成分8,11-十八碳二烯酸（55.102%）、8-十八烯酸（17.623%）、11-油酸（12.691%）、硬脂酸（9.307%），主要成分是不饱和脂肪酸。

由表3 得，蒲公英油脂中共分离出14 种脂肪酸，其中主要的脂肪酸成分11-油酸（31.710%）、8,11-十八碳二烯酸（27.020%）、9,12,15-亚麻酸（8.207%）、硬脂酸（7.651%），主要成分是不饱和脂肪酸。

由表4 得，无花果油脂中分离出14 种脂肪酸，其中主要脂肪酸成分为棕榈酸（8.889%）、8,11-十八碳二烯酸（45.815%）、9,12,15-亚麻酸（25.925%）、8-十八烯酸（9.206%）、硬脂酸（5.692%），主要成分是不饱和脂肪酸。

3 种中药材中一共含有脂肪酸21 种，主要几种为棕榈酸、8,11-十八碳二烯酸、9,12,15-亚麻酸、8-十八烯酸、硬脂酸，均为不饱和脂肪酸，是人体重要的营养物质，是人体必需的脂肪酸，也是构成人体不饱和脂肪的脂肪酸，由此可见不饱和酸对人类的重要性，同时表明它与许多疾病密切相关。

目前有很多研究表明不饱和脂肪与许多疾病密切相关，流行病学研究发现多不饱和脂肪酸和癌症间有相互关系；主要为n-3 多不饱和脂肪酸有抗癌作用，而N-6 多不饱和脂肪酸对癌症只有促进作用[7]。通过这3种中药材的脂肪酸的组成及其相对含量分析，表明这3 种中药材对抗癌都有一定的积极治疗作用，有效成分可能是多不饱和脂肪酸。