名老中医丁启后治疗绝经综合征的参麦黄连阿胶汤药效学实验

丁丽仙 李一哲 李琼 朱瑛

【摘 要】目的：采用丁氏妇科原国家级名老中医丁启后教授治疗绝经综合征的有效经验方“参麦黄连阿胶汤”进行药效学实验，为“参麦黄连阿胶汤”的临床有效性提供理论和实验依据。方法：采用戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠实验，观察参麦黄连阿胶汤的协同促睡眠作用;采用毛果芸香碱诱导小鼠发汗实验，观察参麦黄连阿胶汤的抑制发汗作用;采用小鼠负重游泳实验，观察参麦黄连阿胶汤的抗疲劳作用。结果：参麦黄连阿胶汤有缩短小鼠的睡眠潜伏期时间，延长睡眠持续时间，增加戊巴比妥钠最大阈下睡眠剂量小鼠的入睡比例;参麦黄连阿胶汤能改善腋下皮肤汗腺扩张作用;参麦黄连阿胶汤延长小鼠游泳时间。结论：参麦黄连阿膠汤有明显改善睡眠、抑制出汗、抗疲劳的作用。

【关键词】丁启后;参麦黄连阿胶汤;绝经综合征;药效学实验

Abstract： Objective： To use the former national famous old Chinese medicine doctor Ding Qi of Dings gynecology for the treatment of menopausal syndrome “Shenmai Huanglian Ejiao Decoction” to make pharmacodynamic experiments， which is clinically effective for “Shenmai Huanglian Ejiao Decoction” Sex provides theoretical and experimental basis. Methods： Using pentobarbital sodium to induce sleep in mice， observe the synergistic effect of Shenmaihuanglian Ejiao decoction; use pilocarpine to induce sweating in mice， observe the anti-sweat effect of Shenmaihuanglian Ejiao decoction; swim with weight-bearing mice Experiment to observe the anti-fatigue effect of Shenmai Huanglian Ejiao Decoction. Results： Shenmaihuanglian Ejiao Decoction can shorten the sleep latency period of mice， prolong the duration of sleep， and increase the proportion of pentobarbital sodium submaximal sleep dose in mice; Shenmaihuanglian Ejiao Decoction can improve the swelling of armpit skin sweat glands Situation; Shenmai Huanglian Ejiao Decoction prolongs the swimming time of mice. Conclusion： Shenmai Huanglian Ejiao Decoction can significantly improve sleep， suppress sweating and resist fatigue.

Keywords： Ding Qihou; Shenmai Huanglian Ejiao Decoction; Menopause Syndrome; Pharmacodynamic Experiment

【中图分类号】R249【文献标识码】A【文章编号】1672-3783（2020）10-30--01

绝经综合征（climacteric syndrom或 menopausal syndrome，MPS），又称为围绝经期综合征，是指妇女绝经前后出现性激素波动或减少所致的一系列躯体及精神心理症状，如月经紊乱、潮热出汗、失眠心悸、眩晕耳鸣、激动易怒、焦虑抑郁、骨质疏松、心血管疾病等症状[1]。其自然绝经潮热发生率在75%以上，约持续1-2年，25%妇女将持续4-5年或更长。潮热往往伴出汗。据统计，绝经妇女中精神神经症状发生率为58%，其中失眠52%[2]。西医治疗该病以性激素治疗为主，通过调节激素分泌，改善或消除相关症状，提高妇女生活质量，但如长期使用或大剂量使用会诱发子宫内膜癌、乳腺癌、心血管意外等，且停药后易复发，患者依从性差[3]，还有肝肾功能不全等使用禁忌症。中医治疗绝经综合征从整体调整，不仅疗效肯定，而且副作用小，患者依从性好。“参麦黄连阿胶汤”是丁氏妇科原国家级名老中医丁启后教授治疗绝经综合征临床疗效显著的经验方，根据该方已有的临床有效性研究，采用小鼠睡眠实验、抑汗实验、负重游泳实验，为“参麦黄连阿胶汤”能治疗改善绝经综合征的失眠多梦、潮热出汗、疲乏等相关症状提供理论和实验依据。

1 药物、试剂与动物

5%戊巴比妥钠（由贵州医药大学实验中心提供）;更年安（江西南昌桑海制药厂，国家准字Z20073293）;10%毛果芸香碱（由贵州中医药大学实验中心提供）;HE（苏木素、伊红）染色试剂盒（Solarbio公司，货号G1120）二甲苯（上海鼎国生物技术有限公司，DS104-1Xylene）;无水乙醇（上海鼎国生物技术有限公司）;4%多聚甲醛（上海鼎国生物技术有限公司，AR-0211）;参麦黄连阿胶汤药物于贵州中医药大学第一附属医院购买。

雌性昆明小鼠，体质量（18±10）g，由湖南实验动物中心提供，清洁级动物，许可证号：SCXK（湘）2009-0012。

2 方法与结果

2.1 小鼠睡眠时间

2.1.1 戊巴比妥钠预实验

阈剂量戊巴比妥钠可致小鼠睡眠。因小鼠对该药的敏感性存在差异，据文献报道35-50mg/kg范围内，为了确定100%小白鼠进入睡眠的戊巴比妥钠最小剂量和90%-100%的小鼠翻正反射不消失的戊巴比妥钠阈下睡眠最大剂量，各组动物腹腔注射不同浓度戊巴比妥钠，记录半小时内入睡的动物数。如表1：

预实验得到的使90%-100%的小鼠翻正反射不消失的最大剂量为35mg/kg，预实验测得引起100%小鼠睡眠的最小阈剂量为50mg/kg。

2.1.2 戊巴比妥钠阈下实验

取小鼠60只，随机分为5组，每组12只，分为参麦黄连阿胶汤高、中、低剂量组，更年安组、空白对照组。空白对照组给予0.2mL/只/10g生理盐水，参麦黄连阿胶汤高、中、低剂量组分别按成人剂量的20倍（89.33g/kg）、10倍（44.67g/kg）、5倍（22.35g/kg）给药，更年安按成人剂量的10倍（0.93g/kg）给药，治疗组均予0.2mL/只/10g，连续灌胃给药7d，于末次灌胃给药1h后，给予小鼠腹腔注射戊巴比妥钠35mg/kg，注射后，记录各组小鼠的入睡数。

参麦黄连阿胶汤低剂量与更年安有增加戊巴比妥钠最大阈下睡眠剂量小鼠的入睡比例（P<0.05），参麦黄连阿胶汤中剂量和高剂量作用显著（P<0.01）。如表2：

2.1.3 戊巴比妥钠阈上实验

分组及给药方式同“2.1.2”项下，连续灌胃给药7d，于末次灌胃给药1h后，小鼠腹腔注射戊巴比妥钠50mg/kg。分别记录各组入睡的潜伏期及睡眠持续时间。

参麦黄连阿胶汤各组与更年安组均有可以缩短小鼠的睡眠潜伏期时间，延长睡眠持续时间，增加戊巴比妥钠最大阈下睡眠剂量小鼠的入睡比例（P<0.05或P<0.01），中、高剂量组优于更年安组（P<0.01）。如表3：

2.2 小鼠抑汗实验

取小鼠60只，随机分为6组，每组10只，分为参麦黄连阿胶汤高、中、低剂量组分别按成人剂量的20倍（89.33g/kg）、10倍（44.67g/kg）、5倍（22.35g/kg），更年安组（0.93g/kg），毛果芸香碱组，空白对照组，除毛果芸香碱组及空白对照组给予0.2mL/只/10g生理盐水外，治疗组均予0.2mL/只/10g，连续灌胃给药7d，末次灌胃给药1h，除空白组外，各组分别腹腔注射10%毛果芸香碱（35mg/kg），30min后用颈椎脱臼法处死小鼠，取小鼠右侧腋窝部皮肤组织进行固定、脱水与透明、浸蜡与包埋、切片、脱蜡与水化、染色与封片。在显微镜下观察汗腺，选取10条汗腺导管，测量导管内径，取其平均值[4]。

毛果芸香碱组较空白组有明显扩张汗腺导管直径作用（P<0.01），参麦黄连阿胶汤各组与更年安组均有明显能改善腋下皮肤汗腺扩张情况（P<0.01），中、高剂量组优于更年安组（P<0.01）。如表4：

由图1可知毛果芸香碱组（图1A）腋窝部皮肤汗腺导管扩张，腺体扩张，腺上皮胞浆丰富，分泌旺盛，出现核下空泡，个别腺体可见分泌物。空白组（图1C）正常腺体，腺体成小管状分布，汗管不扩张，腺上皮排列致密，未见分泌现象。更年安（图1B）、参麦黄连阿胶汤低（图1D）、中（图1E）、高剂量（图1F）组均有缩短汗管的作用。参麦黄连阿胶汤中、高剂量组汗管大小接近与空白组。

2.3 小鼠负重游泳时间

分组及给药方式同“2.1.2”项下，连续灌胃给药7d，于末次灌胃给药1h，选取各小鼠相同尾部部位负荷5%体重的铅皮，栓时松紧适宜，放入水温在25±2℃水箱中游泳，水深大于30cm，每次水箱中放入3只小鼠，防治互相挤靠。不断轻轻搅动水面使之不停游动，用秒表记录小鼠从入水至死亡时的游泳时间。

参麦黄连阿胶汤低剂量组与更年安组能延长游泳时间（P<0.05），中、高剂量组能显著延长游泳时间（P<0.01）。中、高剂量组优于更年安组（P<0.05）。如表5：

3 讨论

参麦黄连阿胶汤是原国家级名老中医丁启后教授以《伤寒论》治“少阴病，得之二三日，心中烦，不得卧”的“黄连阿胶汤”为基础灵活变通治疗绝经综合征临床疗效显著的经验方。该方由太子参、麦冬、黄连、阿胶、酸枣仁、白芍、五味子、生地、浮小麦、龙骨、牡蛎、大枣、甘草等13味药组成。全方滋阴益气，清心泻火，宁心安神，收敛止汗。因绝经综合征表现失眠多梦、潮热汗出、疲乏无力等症状最为明显，故课题选择做了诱导小鼠睡眠实验，观察参麦黄连阿胶汤的促睡眠作用;诱导小鼠发汗实验，观察参麦黄连阿胶汤的抑制发汗作用;小鼠负重游泳实验，观察参麦黄连阿胶汤的抗疲劳作用。实验研究结果表明本方有缩短小鼠的睡眠潜伏期时间，延长睡眠持续时间;能改善腋下皮肤汗腺扩张作用;延长小鼠游泳时间。这些实验研究结果说明可能就是参麦黄连阿胶汤临床能明显改善绝经综合征患者失眠多梦、潮热汗出、疲乏无力等症状的机理所在。现代药理学研究表明，白芍、龙骨、牡蛎、酸枣仁、甘草、大枣等具有镇静作用[4-8];黄连有中枢抑制作用，小襞碱对小鼠有降温、镇静、安定作用[9];浮小麦组大鼠光镜下足趾汗腺导管未见明显扩张具有明显止汗作用[10];太子参具有抗疲劳、增强人体免疫力作用[11-12];五味子对大脑皮层的兴奋和抑制过程均有影响，并能使其趋于平衡，其中枢兴奋作用能改善人的智力活动，提高工作效率。五味子有类似人参的适应原样作用，能增强机体对非特异性刺激的防御能力;阿胶能促进血液中血红蛋白与红细胞的生长，促进钙吸收;麦冬能提高心肌收缩力及耐缺氧力，临床应用对冠心病心绞痛及改善心电图有一定作用;1%地黄浸膏对离体蛙心有明显强心作用[4];大枣有增强肌力、抗肿瘤、增强抵抗力等作用[13];甘草有抗癌、防癌、增强免疫力作用[14-15]。方中这些药物的药理协同作用可能使参麦黄连阿胶汤有明显改善睡眠、抑制出汗、抗疲劳等功用，这些实验结果也为该方临床的有效性提供了相关的理论依据。

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