白及提取物乳膏剂的处方筛选研究

赵春丽，申孝灵，晏合吕，李 婷，李秀雅，周永强

(贵州中医药大学，贵州 贵阳 550025)

皮肤具有一定的弹性和韧性，经常会或轻或重地受到损伤，手足皲裂就是最令人烦恼的损伤之一。不仅是可以直接观察到的皲裂称为损伤，事实上，皮肤粗糙也可以认为皮肤已受到损伤。近年来，有报道在中医美容方中加入一种或几种药性相容、疗效强的外伤中草药，能够对防治皮肤皲裂取得很好的效果。例如“纯中药萃取养肤霜”，其中添加的中草药(丹参、红景天等)有清热活血养肤生肌之效，在皮肤干燥、脱屑、脱皮及皮肤皲裂方面疗效显著[1]。白及为兰科植物白及BletillaStriata(Thunb.) Reichb. f .的干燥块茎。具有收敛止血，消肿生肌的作用，多用于咯血，吐血，外伤出血，疮疡肿毒，皮肤皲裂[2]。《新修本草》云：“此物，山野人患手足皲拆，嚼以涂之有效[3]。”《本草易读》中也有记载：“除头面，使皮黑反白，手足皴裂，令涩肌变滑。去腐逐瘀甚速，生肌止痛良效。肺痈脓血未尽者勿用。手足皴裂，水合末塞之。勿犯水[4]。”目前研究发现白及中主要含有联苄类、二氢菲类、联菲类、联菲醚类、菲并吡喃类、联苄葡萄糖苷类、甾体、三萜、脂肪酸、多糖蒽醌、黄酮等多种成分[5]。白及的这些功效与其所含有的药效成分密切相关，其块茎提取物主要成分为白及多糖，化学组成分为葡甘聚糖[6]。故本研究选用中药白及作为天然添加剂，通过制备O/W型乳膏剂，优化其制备工艺，并结合白及中胶状成分愈合创伤的优点，以治疗手足皲裂、保持手部肌肤柔嫩细腻为主要目的，研制含有白及提取物的乳膏剂，以期为进一步深度开发白及相关产品提供参考依据。

1 材料

1.1 药材

白及购买于施秉县富民高新农业发展有限公司。

1.2 主要试剂

硬脂酸，卡波姆、三乙醇胺、司盘-60等购自国药集团化学试剂有限公司；蜂蜡，二甲基硅油、高级脂肪醇、棕榈酸异丙酯、尼泊金乙酯等购买于天津市科密欧化学试剂有限公司。

1.3 主要仪器

电热恒温鼓风干燥箱(101-1AB，天津市泰斯特仪器有限公司)；电子分析天平(XS205DU，瑞士梅特勒公司)，电子恒温水浴锅(DKW-4，上海科西实验仪器厂)；台式低速离心机(L600，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司)。

2 方法

2.1 正交设计法筛选白及胶提取工艺

取约50 g白及新鲜药材切丁，进行水煮提取，纱布过滤，合并滤液，浓缩，取浓缩滤液，加入3倍量醇沉，静置至无沉淀生成，计算白及胶得率。以白及胶的得率为指标，设计L9(34)正交优化试验，以提取次数(1、2、3)、料液比(1∶5、1∶10、1∶14)及醇沉浓度(95%乙醇、70%乙醇、80%乙醇)为考察因素，根据实验结果，对提取时间(0.5、1、1.5)实施单因素考察，确定最终白及提取最优工艺。

2.2 乳膏剂基质处方的考察

2.2.1 单因素考察

以稳定性为指标，即在离心、耐寒、耐热测试时同时稳定。具体为2000 r/min旋转30 min离心后，观察其是否分层；进行耐寒测试时，置于-6～-10℃保持24 h后，恢复室温后应与试验前相比，观察是否有明显性状差异；进行耐热测试时，置于(40±1)℃保持24 h，恢复至室温后观察膏体是否有油水分离现象。具体为只改变一个因素组成的加入量，其他因素含量固定不变[6]。

2.2.2 多因素试验设计

根据单因素实验结果，设计多因素试验考察对稳定性影响较大的硬脂酸、蜂蜡、二甲基硅油、高级脂肪醇原料的质量配比，在符合稳定性(耐热、耐寒、离心)要求，同时兼顾外观，细腻度、粘度、涂展性、吸收性等方面满足要求。

表1 多因素实验设计

2.2.3 考察指标及评分标准

参照参考文献[7]及《中国药典》[8]要求乳膏剂应均匀、细腻、具有适当的粘稠度、易于涂布，故设计考察指标以稳定性和乳膏的外观性状进行评分，综合评分满分为100分，每项各占10分。同时对乳膏剂的外观(形态、色泽、透光度)、细腻度、粘度、涂展性、吸收性进行评价，评分标准见表2。

表2 处方筛选各项考察指标评分标准

2.2.4 乳化时间和乳化温度的选择

乳化时间和乳化温度对乳化体系亦有较大的影响，分别对乳化温度及乳化时间进行的单因素考察。参照评分标准优选最佳乳化时间及温度。

2.3 白及胶乳膏的制备及质量评价

根据课题组前期研究，发现白及胶含量为5%时治疗皮肤皲裂效果最好[9]，故最优工艺为5%白及胶与空白基质制备成白及胶乳膏剂。参照文献[10]的方法，根据最优工艺制备三批白及胶乳膏剂，对乳膏剂的外观性状、物理稳定性进行评价，并对其pH值进行测定。

3 结果与分析

3.1 白及胶的最佳提取工艺确定

以水提次数(A)、水提料液比(B)、醇沉时醇的浓度(C)为影响因素，以白及胶得率为测定指标，设计L9(34)正交优化试验，优选白及的提取工艺，正交实验因素水平见表3，正交实验结果见表4，方差分析结果见表5。

表3 正交试验因素水平

表4 白及提取正交试验结果

表5 方差结果分析

由表3和表4可知，影响白及胶得率的先后顺序依次为A>B>C，即水提次数>水提料液比>醇沉浓度。其中，水提取次数和料液比有显著影响，醇沉浓度也有一定影响，结合极差分析，最佳提取方案确定为A3B2C1，即加10倍量的水，提取3次，并用95%乙醇进行醇沉。

3.2 单因素实验设计及结果

实验设计及结果见表6。

表6 单因素实验设计及结果

表6(续)

由单因素实验可知，硬脂酸、蜂蜡、二甲基硅油、高级脂肪酸醇对乳膏稳定性影响较大，硬脂酸的稳定范围为4%～6%，蜂蜡的稳定范围为3%～5%，二甲基硅油稳定范围为1%或3%，高级脂肪醇为1%～2%。

3.3 多因素实验结果

对上述指标进行综合评分，结果见表7。

表7 综合得分表

由表7中数据可知，油相的比例会对稳定性的各指标具有极大影响，尤其是硬脂酸、蜂蜡、高级脂肪醇和二甲基硅油的比例对乳膏剂的耐寒、耐热、离心稳定性影响较大，当上述四者比例发生变化时，护手霜在耐寒、耐热、离心方面的稳定性也发生了较为明显的变化。尤其在实验6～8中，不仅在稳定性上出现了某方面或某几方面明显较差的情况，而且乳膏剂的其他性能也受到了不同程度的影响。

实验结果表明，白及乳膏剂的最佳油相基质的组成为添加5%硬脂酸、1%高级脂肪醇、4%蜂蜡、1%二甲基硅油及1%棕榈酸异丙酯；最佳水相基质的组成为添加0.2%尼泊金乙酯、0.2%卡波姆、1%三乙醇胺及1%司盘-60。

3.4 乳化温度及时间的筛选结果

将所述油相、水相混合后，在60～80℃下乳化5～25 min。根据评分标准优选乳化温度为80℃，乳化时间为15 min。故空白乳膏的最佳制备工艺为最佳油相组成与最佳水相组成混合，加入适量蒸馏水在80℃搅匀、乳化15 min。

3.5 白及胶乳膏剂的制备及质量检查的结果

制备的三批白及胶乳膏，呈现均匀的乳白色、细腻无颗粒感、涂展性良好，粘稠度良好，pH适宜，且耐热、耐寒、离心稳定性良好。结果见表8。

表8 外观性状、物理稳定性及pH值测定结果

4 讨论与结论

根据《中国药典》对于乳膏剂的要求，达到标准的乳膏剂需要满足膏体均匀，细腻，应具有适当的粘稠度，同时在稳定性(耐热、耐寒、离心考验)等方面满足要求。本研究发现，将硬脂酸、蜂蜡、二甲基硅油、高级脂肪醇以重量比为5∶4∶1∶1复配，可以达到很好的稳定性。在添加剂可以进一步改善乳膏剂的各方面性能考察时，仅添加氮酮或同时添加氮酮、羊毛脂、棕榈酸异丙酯、甘油时，对乳膏剂的耐热稳定性较为不利。而相较于其他单一组分或复配添加剂，在仅使用棕榈酸异丙酯时，对乳膏剂的各方面性能改善效果最好。三乙醇胺和司盘-60可以改善乳膏剂的乳化效果，且其合用比任一单用效果更好，尤其在重量比2∶1比例时，乳化效果最佳。相较于现有技术中的其他防腐剂(如苯甲酸)，尼泊金乙酯对乳膏剂的各方面性能无不利影响，同时具有很好的防腐效果。充分考察以上处方各组成因素特征后确定该工艺。制备工艺简单，质量易控，可实现大规模生产，具有较大的经济效益。