反复呼吸道感染儿童的免疫状态与维生素A/E缺乏情况▲

陈洁琳 覃 敏 杨晓祥 谭 杰 莫荣浩 庞夏玲 冯燕华 黄丽莲 李英乔 江蕙芸

(广西壮族自治区妇幼保健院/广西壮族自治区儿童医院1 呼吸内科，2 儿童保健科，南宁市 530002，电子邮箱：313372046@qq.com)

反复呼吸道感染是儿童常见的呼吸道疾病，占我国儿科呼吸道疾病就诊原因的10%～20%[1]，其发病率较高且有逐年上升的趋势[2]。儿童呼吸道反复感染的原因除与儿童时期呼吸道特殊解剖结构及生理功能有关外，可以还与营养状况及免疫状态有关。脂溶性维生素是人体代谢必不可少的营养素，其中维生素A、E对儿童的气道发育、免疫系统、呼吸道感染等均有一定影响[3]。本研究分析反复呼吸道感染儿童的免疫状态与维生素A、E缺乏情况，探讨维生素A、E缺乏与儿童发生反复呼吸道感染的关系，为反复呼吸道感染儿童的治疗及生活保健提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2017年1月至2019年12月在我院就诊的100例反复呼吸道感染患儿作为观察组，其中87例有咳嗽表现，64例有喘息，47例有鼻塞、流涕。纳入标准：(1)年龄在6个月至14岁之间；(2)符合反复呼吸道感染诊断标准[4]，且两次感染间隔时间大于7 d；(3)近1月内未服用过维生素A、E制剂，未使用免疫球蛋白及激素等药物。排除标准：合并有其他先天性脏器发育畸形的患儿；合并免疫缺陷的患儿；早产儿；中重度营养不良、重度贫血的患儿；合并肿瘤、结核的患儿；有重大手术史的患儿。另外选取同期在门诊进行体检的80例儿童作为对照组。纳入标准：(1)年龄在6个月至14岁之间；(2)近1月内无呼吸道感染症状，否认合并其他系统感染；(3)近1个月内未服用过维生素A、E制剂，未使用免疫球蛋白及激素等药物。排除标准同观察组。观察组中男童65例、女童35例，年龄7个月至9岁7个月[1.96(1.81)岁]；对照组中男童49例、女童31例，年龄8个月至9岁5个月[2.10(1.57)岁]。两组的年龄及性别差异均无统计学意义(均P>0.05)。所有儿童家属均对本研究知情并签署知情同意书，本研究获得医院伦理委员会批准。

1.2 相关指标的检测方法 所有入组儿童均采集外周静脉血2 mL，放置于普通生化管中，室温避光保存，1 h后离心(3 500 r/min，10 min)，取上清液(至少300 μL)放置于干净EP管中，4℃避光保存。使用安捷伦1290高效液相色谱仪(购自北京和合医学诊断技术股份有限公司)，利用高效液相色谱法检测维生素A、E含量；使用Cobas 8000全自动生化分析仪(购于上海罗氏公司)，利用免疫比浊法测定IgA、IgM、IgG水平；使用贝克曼FC500流式细胞分析仪，利用流式细胞技术测定T淋巴细胞亚群。

1.3 相关判断标准

1.3.1 维生素A的分级标准[5]：0.3 mg/L≤血清维生素 A含量≤0.5 mg/L为正常；0.2 mg/L≤血清维生素A水平<0.3 mg/L为可疑亚临床缺乏； 0.1 mg/L≤血清维生素A水平<0.2 mg/L为亚临床缺乏；血清维生素A水平<0.1 mg/L，同时伴有干眼，为临床型缺乏。本研究中的维生素A缺乏包括上述可疑亚临床缺乏、亚临床缺乏、临床型缺乏3种类型。

1.3.2 维生素E的分级标准[5]：血清维生素E含量<5 mg/L为缺乏，5 mg/L≤维生素E含量≤7 mg/L为不足，7 mg/L<维生素E含量≤20 mg/L为正常，维生素E含量>20 mg/L为过量。本研究中的维生素E缺乏包含缺乏和不足。

1.3.3 细胞免疫功能异常：CD4+/CD8+<1.0提示细胞免疫抑制；我院检验科CD3+T淋巴细胞水平正常范围为65%～79%，以<65%判定为CD3+T淋巴细胞下降。

1.4 统计学分析 采用SPSS 18.0软件进行统计分析。符合正态分布的计量资料以(x±s)表示，组间比较采用两独立样本t检验，如不服从正态分布则以M(Q)表示，组间比较采用秩和检验；计数资料以例数(构成比)表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组血清维生素A、E含量和T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白水平的比较 观察组血清维生素A水平以及IgA、IgG、IgM、CD3+T淋巴细胞水平均低于对照组(均P<0.05)，而两组血清维生素E含量、CD4+和CD8+T淋巴细胞水平、CD4+/CD8+比值比较，差异均无统计学意义(均P>0.05)。见表1。

表1 两组儿童血清维生素A、E水平和T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白水平的比较(x±s)

2.2 两组维生素缺乏和细胞免疫功能异常的发生率的比较 观察组维生素A缺乏、细胞免疫抑制、CD3+T淋巴细胞下降的发生率均高于对照组(均P<0.05)。见表2。

表2 两组维生素缺乏及细胞免疫功能异常的发生率的比较[n(%)]

3 讨 论

在机体的免疫功能中，T淋巴细胞及免疫球蛋白均对人体的免疫状态具有重要影响，其中CD3+T淋巴细胞代表外周血成熟T细胞总数，其可以反映细胞免疫功能水平[6]；CD4+T淋巴细胞为辅助性T细胞(helper T cell,Th)，可分为Th1、Th2、Th17、调节性T细胞等；在Th2的辅助作用下，B细胞合成并分泌免疫球蛋白及抗体，参与免疫应答。CD4+/CD8+比值是反映机体免疫平衡状态的指标， 当CD4+T淋巴细胞数值下降明显大于CD8+T淋巴细胞数值时两者比值<1.0，则提示机体处于免疫抑制状态；当CD4+T淋巴细胞数值下降时，其转化为各亚型细胞可能会受阻，其中Th2受到影响时，会累及产生免疫球蛋白的B细胞，从而导致IgA、IgG、IgM水平降低。 本研究中，观察组血清IgA、IgG、IgM、CD3+T淋巴细胞水平均低于对照组，细胞免疫抑制、CD3+T淋巴细胞下降的发生率均高于对照组(均P<0.05)，提示与普通儿童相比，反复呼吸道感染儿童存在免疫失衡，机体处于免疫抑制状态更为常见。

维生素A在胚胎发育、视力、基因表达、生殖和免疫功能中都占据重要地位，通过补充维生素A可降低发展中国家婴幼儿的死亡风险[7]。国内研究表明，维生素A缺乏与儿童反复呼吸道感染有相关性[8-9]。本研究中，观察组血清维生素A水平低于对照组，且维生素A缺乏发生率高于对照组(P<0.05)，这提示维生素A缺乏可能与儿童反复呼吸道感染有关，与上述研究结果相似。结合维生素A在维持正常免疫功能中的作用，以及反复呼吸道感染儿童存在免疫失衡的情况，我们推测维生素A缺乏或可引起机体免疫功能异常，而这或为导致儿童发生反复呼吸道感染的可能机制之一。有学者也发现，补充维生素A可降低呼吸道感染率，并改善反复呼吸道感染儿童的免疫功能[10]。然而本研究未能进一步分析各分型Th变化与维生素A水平的关系，今后可通过分析维生素A的缺乏对Th分型的转化有无影响，从而更进一步探讨维生素A缺乏与免疫应答的关联点。

抗氧化是维生素E最具代表性的功能，其还通过参与红细胞完整性的维持、血红蛋白的合成，以及影响细胞因子的分泌及多种免疫细胞的增殖分化等，而参与免疫应答[11]。本研究中，两组儿童的维生素E含量及维生素E缺乏发生率差异并无统计学意义(P>0.05)。分析原因主要为：维生素E缺乏的发生率在人工喂养的早产儿及低出生体重儿较高[11-12]；维生素E广泛存在于自然界中，随着摄入食物种类的丰富，维生素E缺乏率相对下降；本研究排除早产儿及营养不良等儿童，纳入的研究对象为6月龄以上的儿童，而大于该年龄段儿童的膳食摄入种类较广泛，故而对大部分出生发育正常儿童来说，维生素E缺乏较少见。今后在关于维生素E的研究中，建议放宽纳入对象的年龄段，扩大样本量，进一步研究维生素E摄入量与免疫功能的相关性。

综上所述，反复呼吸道感染儿童血清维生素A水平降低且机体免疫状态失衡，更易出现维生素A缺乏与免疫抑制；维生素A缺乏或通过影响机体的免疫状态而导致反复呼吸道感染的发生。反复呼吸道感染为儿科常见的临床现象，其在儿科门诊就诊原因中的占比逐渐增高。而根据世界卫生组织提供的数据，全球5岁以下儿童中近30%的儿童存在维生素A缺乏[13]，而挑食及偏食使儿童更容易出现维生素A缺乏，其影响机体生长发育的同时可导致免疫功能下降，进而使机体陷入反复感染的循环中。由此可见，补充维生素A对于反复呼吸道感染儿童来说刻不容缓。