外周血ICOS/ICOSL对乙肝患者病情的影响探究

河南省信阳市淮滨县疾病预防控制中心（464400）李和梅

乙型肝炎作为一种病毒感染性疾病，目前全球约3.5亿乙型肝炎病毒感染者[1]。我国是乙型肝炎病毒感染大国，长期感染乙肝病毒可逐步发展为肝硬化、肝衰竭和肝癌，有研究显示世界范围内每年有100多万死于HBV感染所导致的疾病[2][3]。HBV病毒本身并不能损伤肝细胞，乙肝病毒利用肝细胞摄取的养料赖以生存并在肝细胞内复制。病毒复制的乙肝表面抗原、乙肝e抗原和乙肝核心抗原释放在肝细胞膜上，激发人体的免疫系统来辨认，并发生反应从而造成肝细胞的损伤和破坏[4]。HBV特异性T细胞免疫及其产生的细胞因子具有参与免疫应答、清除病毒的作用，但其发生发展的免疫机制尚不清楚。ICOS及ICOSL作为T淋巴细胞活化、增殖及分化的免疫正性共刺激分子，在免疫传染性疾病及肿瘤方面发挥着重要作用，但在HBV感染中的作用尚不明确。本研究选取了86例乙肝患者为研究对象，通过检测ICOS及ICOSL水平，分析其对乙肝患者病情的影响。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2015年9月～2018年1月86例在我院接受治疗的乙肝患者为实验组，男性47例，女性39例，年龄23～68岁，平均年龄（43.27±3.31）岁，病程6～17月，平均病程（11.35±2.17）月，轻度40例，中度29例，重度17例。纳入标准：①研究对象乙型肝炎病毒表面抗原阳性且符合《慢性乙型肝炎防治指南》的诊断标准；②病程超过6个月；③患者均未进行免疫调节及抗病毒治疗。排除标准：①患有肝硬化、肝癌或其他病毒性肝炎的患者；②存在自身免疫性疾病，孕妇、酗酒的患者；③患有精神疾病、认知功能障碍、恶性肿瘤或重要脏器病变疾病的患者。选取同期86例健康体检者作为对照组，男性45例，女性41例，年龄20～70岁，平均年龄（45.02±3.41）岁。对照组乙型肝炎标志物测定为阴性，排除标准与实验组相同。本研究已经院伦理委员会审核同意，患者及家属均签署知情协议书。

1.2 方法

1.2.1 HBV血清标志物检测 采用电化学发光法检测HBsAg，使用仪器为罗氏cobase601电化学发光全自动免疫分析系统。阳性参考范围：HBsAg>0.05IU/mL、HBeAg>1.0S/CO。

1.2.2 ALT检测 采用Modular DDPP全自动生化分析仪操作说明书进行检测。

1.2.3 HBV DNA检测 使用实时荧光定量PCR法检测HBV DNA定量，试剂又达安基因有限公司提供。

1.2.4 ICOS及ICOSL水平检测。

1.3 统计学分析 本次研究采用SPSS15.0软件处理数据。计数资料以频数表示，比较采用χ2检验；计量资料以（±s）表示，比较采用独立样本t检验，采用非配对Mann-Whiney rankSumtest检验，并且进行相关性验证P ＜0.05为差异具有统计学意义。

附表1 检测对象基本情况比较

附表2 各组HBsAg、HBeAg、ALT及HBV-DNA指标比较

附表3 PBMC中共刺激分子的mRNA水平

2 结果

2.1 检测对象基本情况比较 86例实验组根据血清标志物HBsAg、HBeAg、ALT及HBV DNA检测结果分为免疫耐受期组、免疫活跃期组合免疫低复制期组。各组基本情况如附表1所示。

2.2 各组HBsAg、HBeAg、ALT及HBVDNA指标比较 免疫耐受期HBsAg、HBeAg及HBV-DNA水平高于其余两组，差异具有统计学意义（P ＜0.05），免疫活跃期ALT水平最高，与两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。见附表2。

2.3 P

BMC中共刺激分子的mRNA水平 免疫耐受期、免疫活跃期及免疫低复制期的患者ICOS及ICOSL水平均高于对照组，差异具有统计学意义（P ＜0.05），但三组患者比较差异无统计学意义（P>0.05）。见附表3。

3 讨论

乙型肝炎病毒逃避免疫系统的监控才能够存活，因此免疫监视和免疫应答能有效预防和消除疾病。系统刺激信号在机体产生细胞免疫效益的过程中发挥着重要的作用，ICOS及ICOSL结合介导协同刺激信号能有效提高T细胞活性，促进T细胞增殖和细胞因子的分泌。ICOS是由2个亚单位构成的同源二聚体，属于Ⅰ型跨膜蛋白，相关研究显示ICOS/ICOSL与炎性反应、自身免疫性疾病相关。ICOS缺陷会导致c-Maf转录降低及细胞因子IL-21分泌减少，引发T细胞功能障碍及记忆性T细胞减少，破坏效应T细胞及调节性T细胞的平衡。

滤泡辅助T细胞的主要作用为参与抗体类别的转换和体液免疫，而ICOS/ICOSL对滤泡辅助T细胞的形成也有影响。ICOS/ICOSL信号通路能促进T细胞CD40配体的表达，CD40配体复合物又能促进B细胞成熟和存活，对B细胞和T细胞的免疫应答都产生影响，从而在体液免疫和细胞免疫中发挥重要的作用。在本研究中，免疫耐受期、免疫活跃期及免疫低复制期的患者ICOS及ICOSL水平均高于对照组，差异具有统计学意义（P ＜0.05），但三组患者比较差异无统计学意义（P>0.05），表明乙肝患者ICOS及ICOSL水平的变化影响机体T细胞及B细胞，改变机体对HBV的免疫反应性。