贵州金花茶花的挥发性成分分析※

●罗在柒 刘 洁 姜运力 李 兰 田 凡 颜凤霞

(1.贵州省林业科学研究院贵州贵阳550005；2.贵州中医药大学第二附属医院贵州贵阳550001)

金花茶作为“茶族皇后”一直被世人珍爱。贵州金花茶作为金花茶属自然分布纬度最高的物种，其分布范围狭窄，种群数量少，加之人类的挖掘，濒危程度的等级高，被列为国家一级保护物种[1]。

金花茶具有丰富的生物学活性和营养元素[2，3]，对抗癌、抗衰老、保护心脏和细胞膜、降低胆固醇、提高机体免疫功能有显著效果[4-8]，普遍认为花朵为植株精华，营养成分含量高[9]。相关研究从金花茶花的乙醇提取物中分离得到13个化合物[10]，用水蒸气蒸馏法提取金花茶叶片的挥发性成分，共分离出42个组分，鉴定了37个化合物[11]。从凹脉金花茶（Camellia impressinervis）叶中的挥发性成分共分离出54个组分，确认了其中的43个组分[12]。目前，对贵州金花茶花朵的挥发性成分的研究未见报道。本研究通过测试原产贵州金花茶挥发性成分，为进一步开发和利用贵州金花茶作基础数据支撑。

1 材料和方法

1.1 材料来源

贵州金花茶（Camellia huana T.L.Ming et W.J.Zhang）的花朵材料采自贵州省罗甸县茂井镇大亭社区田坝组。

仪器HP6890/5975C气相(色谱)-质谱联用仪(美国安捷伦公司)，手动固相微萃取装置(美国Supelco公司)，萃取纤维为2cm-50/30mDVB/CAR/PDMS StableFlex，药品（试剂）均为分析纯。

1.2 方法

取0.3g混匀剪碎样品，置于10mL固相微萃取仪采样瓶中，插入装有2cm～50/30m DVB/CAR/PDMS StableFlex纤维头的手动进样器，在60℃条件下顶空萃取40min时间后，移出萃取头并立即插入气相色谱仪进样口(温度250℃)中，热解析5min进样。

色谱柱为FB-5MSI(30cm 0.25mm 0.25m)弹性石英毛细管柱，柱温40℃（保留2min），以2℃/min升温至110℃，再以10℃/min升温至280℃，运行时间：56min；汽化室温度250℃；载气为高纯He(99.999%)；柱前压6.98psi，载气流量1.0mL/min；不分流进样；溶剂延迟时间：1min。

离子源为EI源；离子源温度230℃；四极杆温度150℃；电子能量70eV；发射电流34.6A；倍增器电压1518V；接口温度280℃；质量范围29～500amu。

对总离子流图中的各峰经质谱计算机数据系统检索及核对Wiley275和Nist2005标准质谱图，确定了挥发性化学成分，用峰面积归一化法测定了各化学成分的相对质量分数。

2 结果与分析

2.1 贵州金花茶花朵TIC总离子图特征

检测持续时间55min，初始出峰时间1.66RT，末峰时间54.049RT，峰形对称良好，共分析得99个峰形及对应的化合物，见图1。

表1贵州金花朵挥发性物质TIC总离子图

2.2 贵州金花茶花朵挥发性物质组分分析

经分析，99个化合物共分为醇、烯、醛、烷、酮、酸、酯、酚、苯、吡嗪、咔唑等10类物质，其中吡嗪类物质比重最大，占67.41%；物质种类的组成数量较多的有醇类物质31个，烷烃类物质27个，烯类物质14个，醛类物质11个；还有酸、酯、酮、咔唑等物质组分，具体见表1。

表1挥发性物质类别、数量和峰面积比重

2.3 主要化合物的生物学特征分析

检测得到吡嗪类物质1个，为苯并吡嗪，出峰值峰时间24.703RT，峰面积1 409 893 630，占比67.41%，匹配度仅为23-59，综合分析2个系统的6个物质，即8-(2-Hydroxyethoxymethyl)guanine（8-（2-羟基乙氧基甲基）鸟嘌呤），Urea,N-propyl-N'-[3-[trifluorom（正丙基-N'-[3-[三氟]尿素），Diphenyl Telluride（二苯基碲化物），Benzopyrazine,1,2,3,4-tetrahydro-2-oxo-3-difluoroacetylmethylene（苯并吡嗪，1,2,3,4-四氢-2-氧代-3-二氟乙酰亚甲基）等，经分析，主要组成含2个苯环和2个N，根据出峰时间推测分子量大小在130左右，最为符合条件的为苯并吡嗪，俗称喹喔啉（Quinoxaline）。前期研究证明，吡嗪类化合物是一类具有重要应用价值的杂环类化合物，具有多种生物活性，抗肿瘤、抗HIV-1逆转录酶抑制剂、抗菌、抗血凝，降血压等功效。贵州金花茶花中富含吡嗪类化合物，赋予其多种特殊的功效，结果揭示了贵州金花茶花药用价值高的理论基础。

3 讨论

通过GC-MS方法测试原产贵州的贵州金花茶花香成分组成，结果得到贵州金花茶花朵含挥发性物质99个，主要有醇、烯、醛、烷、酮、酸、酯、酚、苯、吡嗪、咔唑等10类物质，相对比其他物种花朵物质成分多。如从灯盏花中挥发油组分共鉴定出了64种组分[13]；从普洱大叶种乔木茶花和普洱生茶中鉴定出挥发性成分分别为9种和67种[14]，从糠椴花中分离出52种挥发性成分，鉴定出了39种[15]，相对而言，贵州金花茶花中挥发性物质种类较多。