中药复方对猪大肠杆菌的体外抑菌活性探究

李 鼎，郭珊珊

西藏职业技术学院，西藏拉萨 850000

猪大肠杆菌是诱发仔猪消化道疾病、水肿病、黄痢疾的关键病菌，随着生猪养殖规模的扩大，因猪大肠杆菌引发小规模流行病的情况频繁出现，由于疾病具有较高致死率，对养殖户养殖效益造成直接影响。目前，发病后多以抗生素控制病情发展，降低病死率，但长期使用抗生素，易出现耐药性、药物残留等问题，并不利于生猪养殖的可持续发展。而中药副作用小、性价比高，相关报道中对中药在抑制猪大肠杆菌体外活性方面给予充分肯定[1]。本研究选择5 种中药复方，分析抑菌活性效果，以便推广最佳复方。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究选择5 种中药复方，详细内容如下。复方①：黄连、白术、赤石脂、黄柏、防风。复方②：黄连、白术、赤石脂、黄柏、党参。复方③：黄连、鱼腥草、赤石脂、黄柏，金银花。复方④：黄连、黄芪、赤石脂、黄柏、白头翁。复方⑤：黄连、板蓝根、赤石脂、黄柏、鱼腥草。

1.2 方法

培养基制取：选择肉汤与营养琼脂两种培养基，利用纯化水进行提炼，保持培养基pH值在7.2～7.4范围内。

药液制取：按比例取药材与水，提前用10 倍量水进行药材浸泡，时间为2 h，装置三角烧瓶内，利用电炉进行加热，持续微沸状态2 h，利用纱布进行过滤；过滤纱布厚度为8 层，滤出药渣称重，加入8 倍量水继续加热，维持煮沸状态1 h，进行过滤，获取浓度为1 g/mL 药液；对药液pH 值进行调整，最终值为7.3 时，进入高压灭菌环节；完成后使用冰箱进行保存，温度控制在4 ℃。

菌液制取：在培养基中接种菌种，放在37 ℃环境下培养24 h，并将具有典型性与代表性菌落接种于肉汤培养基中，放置在37 ℃环境下培养18 h。

试验方法：试验采用试管二倍稀释法，取11支试管，依次编号，先在试管1 中加剂量为2.0 mL肉汤培养基，将2.0 mL 中药液加入试管1 中，按梯度进行稀释，稀释至试管9 中取出2.0 mL 废弃，试管10 为单纯性肉汤培养基，作为阳性参照标准，试管11 中加入肉汤培养基与中药液，混合后废弃2.0 mL，作为阴性参照标准，每种复方按以上顺序平行制取3 份[2]。将完成培养的菌液与无菌肉汤培养基进行稀释，比例为1:100，将细菌稀释液按照0.1 mL 比例加入试管1 ～10 中，试管11 加入等剂量生理盐水，基于恒温环境下培养24 h。

1.3 观察指标

分析体外抑制猪大肠杆菌活性试验结果，包括抑菌浓度与强度、杀菌浓度、药物浓度与稀释度、平均抑菌圈。其中试管11 内无细菌，其它试管内有细菌生长，则可通过细菌生长情况判断抑菌浓度；利用管碟法进行药物敏感试验，计算其抑菌直径，其中抑菌圈直径不同，抑菌强度也存在差异，在15 mm 以下为低敏、15 ～20 mm 内为中敏、20 mm以上为高敏，未产生抑菌圈则代表不敏感[3]。

1.4 统计学方法

建立Excel 表格对所获数据进行统计分析。

2 结果

综合来看，复方1 与复方2 具有良好的抑菌性与杀菌性，抑菌浓度均达到15.63 mg/mL，其余3种复方抑菌效果并不显著，但有着相对较高的抑菌浓度与杀菌浓度；同时复方1 为中敏，平均抑菌圈范围最大，因此，复方1 抑制体外猪大肠杆菌活性效果最佳。体外抑制猪大肠杆菌活性试验结果如表1 所示。

表1 体外抑制猪大肠杆菌活性试验结果

3 讨论

中药复方基于辨证施治理念可根据各类疾病临床表现症状，予以针对性处方，直达病灶，消除疾病，并且基于辩证分析对药物剂量进行控制，其中利用多类药物复杂化学成分与反应，实现对多靶点的有效治疗。而关于中药在体外抑菌中的应用是近年来中药领域研究的重点与难点，但从现有研究成果来看，中药在抑制体外细菌方面具有积极作用，从本次研究来看，5 种中药复方基于科学性原则，每种药物成分具有一定针对性，其中黄芪、黄连、黄柏、赤石脂、白头翁、党参、板蓝根、金银花等药物多具有燥湿清热、解毒止痢之功效，而中药研究中发现清热类药物具有突出的抑菌作用[4]。本次研究结果显示，5 种中药复方均发挥了抑菌、杀菌作用，但由于成分各异，在效果上存在明显差异，综合统计数据来看，复方1 与复方2 具有良好的抑菌性与杀菌性，抑菌浓度均达到15.63 mg/mL，其余3 种复方抑菌效果并不显著，但有着相对较高的抑菌浓度与杀菌浓度；同时复方1 为中敏，平均抑菌圈范围最大，因此，复方1 抑制体外猪大肠杆菌活性效果最佳。

本次研究结果与王俊丽、张要齐等学者的研究结果相符，其研究中也从抗菌消炎、泻火解毒、清热燥湿等角度制取中药复方药液，其中7 种复方中，也以黄连、白术、赤石脂、黄柏、防风效果最为突出[5]。

从本次中药复方成分来看，多数复方中都有黄连、黄柏、黄芪、白术等药物，而在复方1 中出现防风，该药物主要功效为胜湿止痛，常用于治疗腹痛腹泻，与白术配合可发挥健脾功效，通过健脾、调理气机进行肠道调节。

综上所述，5 组中药复方对体外抑制猪大肠杆菌活性都有一定作用，但综合对比来看其中以黄连、白术、赤石脂、黄柏、防风复方（复方1）效果最为突出，抑菌强度高、抑菌范围广，建议广泛推广。