张 泰,高 畅,李抒柏,金英海
(延边大学农学院,吉林延吉 133000)
胍基乙酸是肌酸的前体物,含有高磷酸基团转移势能的磷酸肌酸在肌肉、神经组织中广泛存在,由于其使用安全无需停药期,被广泛用作饲料添加剂[1]。中药源于自然界,具有天然活性、多功能型、无毒副作用、无抗性和无残留等特点,作为饲料添加剂具有提高动物生产性能和饲料转化率等作用[2]。山楂可促进胃液分泌,增加胃肠道蠕动,促进营养物质消化吸收;陈皮补脾为主,补中益气,增强食欲[3];山楂性味酸甘,具有促生长作用[4]。已有研究表明,胍基乙酸具有提高肉仔鸡对能量的利用率、提高生产性能和屠宰性能的作用[5]。饲料中添加中草药可改善机体代谢水平,促进生长发育,提高机体免疫力[6]。本试验通过研究胍基乙酸中药制剂对小鼠生长性能、日粮养分表观消化率和血清生化指标的影响,为胍基乙酸中药制剂在畜禽生产中的应用提供参考。
1.1 胍基乙酸中药制剂的配制 胍基乙酸(≥96.0%,占饲料添加剂的12%,由固安均德同创生物工程有限公司提供),蛋氨酸(≥99%,占饲料添加剂的4%,赢创蛋氨酸有限公司),红枣、山楂、陈皮、白术均由毫州市众益堂中药材销售有限公司提供),粉碎过40 目筛,按一定比例配制成胍基乙酸中药制剂。
1.2 试验设计及日粮组成 采用完全随机设计,选用体重(20±2)g 的雄性昆明小白鼠(购自于延边大学小动物实验中心),将小鼠随机分成2 组,每组5 个重复,每个重复6 只。预试期 3 d,正试期30 d。对照组饲喂基础日粮(表1),试验组在基础日粮中添加0.5% 胍基乙酸中药制剂。
1.3 检测指标
1.3.1 生长性能 每周逐只小鼠空腹称重并记录,详细记录每天采食量,计算平均日增重、平均日采食量及耗料增重比。
1.3.2 养分表观消化率 饲养结束前5 d 分别收集各代谢笼中小鼠粪便,65℃烘干粉碎混匀,除去杂质后称重,制成分析样,测定日粮和粪便的粗脂肪(EE)、粗蛋白质(CP)、干物质(DM)、粗纤维(CF)、粗灰分(Ash)、钙(Ca)和磷(P)含量,并计算养分表观消化率。
表1 基础日粮组成及营养成分
表观消化率=[(食入营养物质质量-对应粪中营养物质质量)/食入营养物质质量]×100%
1.3.3 脏器指数 试验结束后,对照组和试验组各选取5 只,每个重复选取1 只小鼠采用颈椎脱臼法处死后称重,迅速解剖取出脾脏、肾脏、肝脏等脏器称重,计算脏器指数。
脏器指数=待测脏器质量(g)/小鼠体质量(g)×100%
1.3.4 血清生化指标 全期正式试验结束后,及时清理料槽余料,保证12 h 空腹状态,每个重复随机选取1 只小鼠,采用眼球取血的方法,将血液静止1 h 后3 000 r/min 离心10 min,用移液将血清上清液枪分离,在-20℃保存备用。测定总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶活力(CAT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、胰岛素(ΙNS)、胰岛素样生长因子-1(ΙGF-1)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)均采用试剂盒法,由北京华英生物科技研究所提供。
1.4 统计分析 采用SPSS 17.0 统计软件中的ANOVA分析试验数据,结果用平均值± 标准误表示。P<0.05表示差异显著,P>0.05 表示差异不显著1。
2.1 胍基乙酸中药制剂对小鼠生长性能的影响 由表1可知,与对照组相比,试验组小鼠的平均日增重显著提高,耗料增重比显著降低;试验组小鼠的平均日采食量有所提高(P>0.05)。
表1 胍基乙酸中药制剂对小鼠生长性能的影响
2.2 胍基乙酸中药制剂对小鼠养分表观消化率的影响 由表2 可知,与对照组相比,试验组小鼠EE 表观消化率极显著降低,CP、CF 和P 表观消化率显著提高,试验组小鼠的DM、Ash 和Ca 表观消化率有所降低(P>0.05)。
表2 胍基乙酸中药制剂对小鼠日粮养分表观消化率的影响 %
2.3 胍基乙酸中药制剂对小鼠脏器指数的影响 由表3可知,与对照组相比,试验组小鼠的心、肝脾和肾的脏器指数略有提高(P>0.05)。
2.4 胍基乙酸中药制剂对小鼠抗氧化指标的影响 由表4 可知,与对照组相比,试验组小鼠的T-AOC、GSHPX和SOD 极显著提高,MDA 极显著降低,CAT 显著提高。
表3 胍基乙酸中药制剂对小鼠脏器指数的影响 %
表4 胍基乙酸中药制剂对小鼠抗氧化指标的影响
2.5 胍基乙酸中药制剂对小鼠血清生长激素指标的影响由表5 可知,与对照组相比,试验组小鼠的ΙNS、T3和T4极显著提高,ΙGF-1 显著提高。
表5 胍基乙酸中药制剂对小鼠血清生长激素指标的影响
3.1 胍基乙酸中药制剂对小鼠生长性能的影响 胍基乙酸是动物机体内合成肌酸的唯一前体物,添加胍基乙酸可提高肌肉中肌酸含量,使磷酸肌酸/三磷酸腺苷(ATP)的比值上升[7]。磷酸肌酸/ATP 值可反映细胞能量代谢状态,其数值高表明改善细胞能量代谢,可为肌肉组织收缩、细胞运动、合成代谢和离子平衡提供更多及时的ATP[8]。胍基乙酸(GAA)可能是通过改善肌肉组织能量代谢,促进肌纤维的发育,进而改善肉仔鸡的生长性能[9]。山楂中富含的酒石酸、山楂酸及降脂酶具有促进胃酸分泌及胃蠕动等作用[10]。白术多糖具有提高采食量,促进生长的作用[11]。陈皮具有理气健胃、助消化的作用,少量服用可以增加胃液分泌、增进食欲、促进消化等作用[12]。
研究报道胍基乙酸可以提高生长猪的日增重,降低耗料增重比[13]。在肉鸡饲料中添加胍基乙酸可提高仔鸡的平均日增重和饲料利用率[14-15]。ΙGF-1 是反映动物生长状况的重要指标,能够促进细胞增生、分化,血液中生长激素(GH)不能直接促进动物机体的生长,可通过刺激ΙGF-1 生成而发挥作用。T3、T4是动物机体生长所必需的激素类型,促进动物脂肪组织与骨骼肌对葡萄糖的吸收和氧化,使血糖浓度降低,促进机体糖原分解,调节蛋白质、脂肪的代谢[16]。本试验结果显示,胍基乙酸中药制剂可显著提高平均日增重、降低耗料增重比,显著提高ΙNS、ΙGF-1、T3和T4血清生长激素指标,表明胍基乙酸中药制剂具有改善生长性能、促进机体生长的作用。
3.2 胍基乙酸中药制剂对小鼠养分表观消化率的影响 中草药中的活性成分对胃肠道内有害菌具有抑制作用,改善胃肠道环境,从而提高对营养物质的消化吸收能力[17]。本试验结果显示,添加胍基乙酸中药制剂可提高CP、CF 和P 的表观消化率,表明添加胍基乙酸中药制剂可提高对物质的消化吸收能力。
3.3 胍基乙酸中药制剂对小鼠脏器指数的影响 脏器指数是动物重要的生物学特性指标之一,可反映病理情况和功能强弱[18]。当饲喂物质导致脏器损伤,脏器指数会发生变化[19]。张德福等[9]研究表明,日粮中添加8 000 mg/kg 胍基乙酸对AA 肉仔鸡心脏、肝脏、脾脏和肾脏指数无显著影响,表明胍基乙酸不会产生毒性作用。江涛[20]研究表明,在日粮中添加胍基乙酸可提高肉鸡的胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数,对提高肉鸡的免疫功能有一定促进作用。也有研究表明中药对小鼠多种脏器指数无明显影响[21-22]。本试验中,试验组小鼠脏器指数较对照组略有升高,表明添加胍基乙酸中药制剂对免疫功能具有一定的促进作用。
3.4 胍基乙酸中药制剂对小鼠抗氧化指标的影响 T-AOC、GSH-PX、CAT、MDA、SOD 是反映抗氧化能力的重要指标。SOD 是生物体内氧自由基的天然清除剂。GSHPx 及CAT 将H2O2分解为水和氧,并防止羟基自由基的形成[23]。动物通过抗氧化系统及时清除体内过多的自由基,维持机体的自由基平衡;MDA 是脂质过氧化反应的最终产物,可反映机体内的过氧化程度[24]。添加的GAA 作为肌酸的有效前体,可以促进肌肉的能量代谢,不仅影响肌肉中肌酸总量,还影响磷酸肌酸和ATP 的含量,促进动物生长[3]。红枣中的红枣多糖是由多种单糖聚合而成,具有提高机体免疫力、抗氧化、抗衰老功能[25]。山楂提取物对DPPH 自由基具有较强清除能力和抗氧化能力[26]。韩东魁等[27]研究表明,包含白术、山楂、大枣的负离子中药复合制剂显著提高了血清中SOD 含量,并显著降低了血清中MDA 含量,提高了血清中抗氧化能力。王连生等[28]研究表明,育肥猪日粮中添加胍基乙酸可显著提高GSH-PX、CAT、T-AOC、SOD 等抗氧化物酶活性,且极显著降低MDA 浓度。本试验结果显示,添加胍基乙酸中药制剂组的T-AOC、GSH-PX、CAT 和SOD 高于对照组,且MDA 低于对照组,这表明添加胍基乙酸中药制剂可提高机体抗氧化能力。
本试验结果表明,在小鼠日粮中添加胍基乙酸中药制剂可提高小鼠生长性能、日粮养分表观消化率和抗氧化能力。