GRB7在乳腺癌中表达及其临床意义

戴玉鑫

（内蒙古民族大学第二临床医学院（内蒙古林业总医院），内蒙古 呼伦贝尔 022150）

在临床上，HER2（人类表皮生长因子受体蛋白2）的浸润性导管癌阳性表达模式是曲妥珠单抗治疗靶点，并且也已经广泛地应用到临床治疗工作中，但是，这种治疗方法费用高昂且对心脏会产生一定的毒副作用，所以仍存在操作争议。生长因子受体结合蛋白-7基因（GRB7）作与HER2有相似性，并且被认为与乳腺癌发生和发展有一定联系[1]。基于此，探究生长因子受体结合蛋白-7基因在乳腺癌中的表达以及意义成为了一项重要课题，本文就此展开研究，具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院病理科在2017年1月～2019年1月未经放化疗治疗的乳腺浸润性导管癌组织标本档案作为研究组，女80例，年龄25～51岁，平均（44.12±0.33）岁。同时，选择其中30例癌旁正常乳腺组织作为对照组。两组患者基本指标均无明显差异性，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

选择上海艾博康贸易有限公司生产的GRB7鼠抗人单克隆抗体，选择北京中杉金桥生物技术有限公司的人类表皮生长因子受体蛋白2。为研究组和对照组提供相同的方法处理。

选择北京金菩嘉生产的HER2基因检测试剂盒，按照试剂盒的说明步骤进行所有操作。（1）先采用脱蜡处理方式，将样本组织脱蜡和脱二甲苯。（2）使用进行15 min孵育，使用胃蛋白酶。（3）进行洗涤和干燥处理。在干燥之后的样本中中加入10 μL的DAPI显色液，在使用荧光显微镜完成样本组织检查。

1.3 观察指标

（1）判定两组成分的免疫组化，参考ASCO分级标准，GRB7阳性呈棕黄色定位于细胞膜或者细胞质位置。肿瘤细胞染色阳性分别计数为0～3+。HER2阳性呈现棕黄色定位于细胞膜：①肿瘤细胞膜染色≤10%；②弱完整膜染色≥10%；③微弱不完整膜染色≥10%；④强完整膜阳性≥10%，计数分别为0～3+。

（2）参考美国临床肿瘤学会检验标准，17号染色体丝粒为绿色信号。红色信号为HER2基因，随机计数为30个肿瘤细胞。

2 结 果

2.1 GRB7与临床病理特征关系

研究得出，在进行乳腺癌临床诊断中，患者GRB7表达率为48%。对照组30例样本中，仅有1例为高表达3.33%。GRB7高表达和淋巴肿瘤结转移、肿瘤体积增大、组织学分级高等密切相关，但是与患者的年龄、ER和PR无明显关联。

2.2 乳腺癌组织中GRB7表达生存分析

根据GRB7不同的表达可以分为（-）、（+～++）和（+++）三组，按照kaplan meier计算方法，将其累计的无肿瘤生存率进行计算，可以得出（-）组的患者无肿瘤生存时间在10.2年左右，（+～++）的无肿瘤生存率为9.9年，其余患者的生存率为10.7年，可以看出，GRB7表达时间累计无肿瘤生存的时间最长，具体见下图：

图1 GRB7不同表达对预后影响生存曲线示意图

3 讨 论

乳腺癌的治疗方法主要包括了传统手术模式、放化疗以及内分泌模式为主，近几年，明确将曲妥珠单抗作为乳腺癌病症治疗的新靶点。而且，在治疗期间，辅助放化疗治疗方法，能取得较好的治疗效果。但是，相关领域研究中得出，未经扩张染色体HER2呈阴性，血清转移后的阳性细胞乳腺癌患者预后并不能达到理想状态。针对乳腺癌细胞生物学特点、疾病治疗手段和患者预后等多项内容的研究工作，已经成为疾病治疗与抗癌研究的新热点。

治疗效果好、毒副作用小且能极大提升患者生存质量并降低死亡率，是乳腺癌抗癌治疗的主要研究方向，通过对GRB7蛋白在乳腺癌中表达作用进行研究，为疾病治疗提供了较好的方向。乳腺癌疾病发生证明与人类17号染色体有密切关系，这一染色体由超过8000万碱基构成，其中含有1500个基因片段，并且与遗传细胞编码片段有较高重复性，能直接参与到多种蛋白表达和基因编码合成，与多个乳腺癌表达基因位点有相关性。

人体细胞内存在许多SH2结构蛋白，且这些结构蛋白会直接参与到信号窜到级联酶促反应中。GRB7蛋白是最近发现乙类具有多域编码特征的接头蛋白，且有较多SH2蛋白结构性特征。GRB7蛋白中包含了三种功能分区，分别位于脯氨酸功能前端N区域、C端SH2结构区域与中间GM区域。这一蛋白主要是通过信号从多种细胞表面受体介导，传达到下游信号通路的方式，发挥出联动作用。在研究中发现，人体内的GRB7蛋白细胞在胰腺中属于高表达状态，因此认为该细胞主要是通过SH2结构域完成与胰岛受体的结合。为能更广泛地参与到细胞受体信号、转导与各种信号通路中，在肿瘤组织研究环节，重点对其侵入乳腺癌细胞进行研究，结果证明，在是乳腺癌细胞的生长和转移中，HER2阳性粒子始终受到GRB7蛋白高表达状态的影响，进而产生促进作用。HER2是当前研究领域中，较为透彻且具有酪氨酸酶活性特征的同源蛋白质，主要在胞内区与结合区等位置形成，分子内部包含23个氨基酸，质量约为185kDa。

GRB7在乳腺癌中表达肿瘤体积大、淋巴细胞转移、组织学分级等有密切关系，但是与患者的年龄等其他因素无关。研究证明了在乳腺浸润性导管癌中，GRB7高表达与临床病理特征有直接关联，所以这一指标可以作为评估患者乳腺癌预后的重要参考依据，能抑制患者乳腺肿瘤转移，延长生存期。乳腺癌的治疗只要以传统手术、内分泌治疗与放化疗为主，近几年，HER2成为治疗靶点，辅助化疗治疗效果明显提升，但是未扩增17号染色体HER2成阴性，血清转移预后不佳[2]。受到乳腺癌细胞表皮生长因子刺激，表皮生长因子受体与GRB7结合会被磷酸化，此达到刺激肿瘤生长的作用。研究结果显示，RB7和HER2有较强相关性，主要体现在在乳腺癌细胞中表达方面，这以结果证明GRB7对乳腺癌细胞转移有重要影响，抑制其高表达，有可能提高HER2抑制效果，改善治疗结局[3]。