浅谈法医物证DNA自动化检验技术的有效运用

张二伟 何 军 桑志明 李曼曼

1.周口三川司法鉴定所，河南 周口 466000；

2.洛阳市公安局，河南 洛阳 471000

公安局可以快速破案离不开物证的支持，在到达案发现场后，首先技术人员会采集有效物证，并对物证进行DNA检测，通过检测结果可以为侦破案件提供方向，更可以快速锁定嫌疑人。基于此，检测DNA物证时，选择高科技检验技术可有效提高结果可信度，为破案提供便利。在本次研究中对收集到的生物检材进行不同技术法（工作站-chelex法、手工-chelex法）检验，并对不同技术法检验结果进行对比分析，以下为详情资料。

一、材料与方法

（一）检测材料

随机取2018年10月至2019年10月在各案件中收集的600份证物作为本次主要检验对象，生物检材包括血迹、毛发、组织、骨、烟蒂、指甲拭子、精斑，分别为230份、104份、62份、46份、76份、44份、38份。

（二）检测方法

将精斑置入96个孔的U型板，当精斑中混有女性上皮细胞时，应先将其裂解，彻底去除女性上皮细胞，然后实施离心处理，取上清备用。血迹标本：3-5根长3mm纱线，毛发：需带有毛囊且长为3mm；软骨样本：1-2片厚为1mm肋软骨切面；烟蒂：烟蒂需含三分之一圈口端烟纸；指甲拭子：3-5根长3mm纱线；精斑：3-5根长3mm纱线。

1.提取DNA

按照chelex流程提取DNA，将“DNA-chelex”自动提取程序装载到freedom EVO 100-4工作站内，严格按照流程使用工作站法、手工法提取受检材料DNA。

2.PCR扩增

按照PCR操作流程进行，将“PCR-Chelex”自动程序装载到freedom EVO 75-2工作站内，构建PCR反应体系，扩增使用仪器型号为AB-9700。

3.毛细管电泳检测

按照STR操作流程进行，将“STR-Chelex”自动上样程序装载到freedom EVO 75-2工作站内，构建PCR扩增产物DNA变性、STR检测体系，使用仪器为型号为AB3130。

（三）观察指标

①对比两种检测技术检测结果。②当样品数为96、192时，检验材料予以同板STR检测，对比两种检测技术检测时间。③取96份没有关系的个体血斑样本，以交叉形式放入96个孔的U型板中，余下96个空白孔，提取DNA后检测STR，连续做五次，对交叉污染状况进行分析。

（四）统计学处理

研究取得资料经统计学软件SPSS19.0进行对比，检测结果数据采用检验模式为卡方，检测时间数据采用检验模式为t计算器，P值结果＞0.05表示无差异，P值＜0.05表示有差异。

二、结果

（一）不同检验技术检测结果比较

手工-chelex法与工作站-chelex法检测成功率比较并无差异，P＞0.05。具体数据，见表1。

表1 不同检测技术检测结果比较（%/份）

（二）不同检验技术检测时间比较

与手工-chelex法检测时间比较，工作站-chelex法检测时间较短，数据差异显著P＜0.05，见表2。

表2 不同检验技术检测时间比较（±s，min）

表2 不同检验技术检测时间比较（±s，min）

样本数量 工作站法 手工法 t P 48 3.4±0.8 5.2±1.2 5.581 ＜0.05 96 4.0±0.9 9.1±1.7 11.857 ＜0.05

（三）交叉污染状况

本次研究中共连续做了五次交叉污染实验，在试剂空白孔内并没有检测到临近样本STR分型，自动化工作在提取DNA时不会发生孔间交叉感染现象。

三、讨论

DNA存储着遗传信息，在破案过程中DNA是重要证据，将在现场获取重要证物交到法医手中，法医通过相关技术在证物中提取DNA，为案件破获提供证据。想要保证DNA检验准确性，最关键的是提取DNA，DNA自动化检验技术体统可以提取不同载体上DNA，在载体上提取DNA后进行检验，可为破案提供有效证据。

机体细胞较为稳定，也就是说一个人机体血液、毛发等产生DNA图形是一致的，这也为法医检测提供了便利，即使是最细微的肌肉、骨片等，利用先进技术均可以提取到DNA，并与犯罪嫌疑人DNA进行比对，不仅为破案提供了证据，更可以快速定罪。科学技术的提升，使得DNA分析技术也越来越完善，目前法医使用的DNA分析技术甚至可以从多年前保存样本中将DNA提取出来，现有DNA分析检测技术多种多样，可以分析不同时期细胞残留。

在此研究中，对600份检材分别使用工作站-chelex与手工-chelex方法，通过比较得知：虽然工作站-chelex法检验成功率略高于手工-chelex法，但是并不具有统计学意义；与手工-chelex法比较，工作站-chelex法检验花费时间较短，且具有统计学意义；进行交叉污染实验证实，DNA自动化检验技术并不会产生孔间交叉污染。

虽然通过DNA自动化检验技术系统可以提取DNA并进行检测，但是在实际中也会受到一些因素影响，一旦有异常势必会影响检测结果，一些证物收集极为不易、证物数量少等，一旦被损害，就失去了价值，为破案增加了难度，甚至使犯罪嫌疑人逃脱法律制裁。由此可见法医在提取DNA时，应严格按照DNA自动化检验鉴定标准进行操作、控制物证保管等，更要强化对法医培训、建立完善检测制度、证物管理等制度，保证法医物证DNA自动化检验结果、保障检验结果科学性、权威性。

总而言之，在检验物证时，法医可使用DNA自动化检验技术系统，可及时为破案提供有效证据，利于案件破获。