植物乳杆菌菌粉对肥胖大鼠肠道黏膜屏障功能的影响

刘尧尧，李 璐，柳婷婷，张珊珊，荀一萍，朱 宏，王世杰,3，边艳青，赵宝华,*

（1.河北师范大学生命科学学院，河北 石家庄 050011；2.石家庄君乐宝乳业有限公司研发中心，河北 石家庄 050221；3.河北科技大学生物科学与工程学院，河北 石家庄 050018）

近年来，肥胖已成为严重威胁人类健康的主要疾病之一[1]。肥胖是由遗传、饮食习惯等多因素综合作用引发的代谢综合征之一，不仅会造成人体内脂肪大量堆积，同时也可能继发性地引起糖尿病、高血压等慢性疾病[2]。

饮食引起的肥胖症，其疾病进展过程中一大特征是肠道屏障功能受损，而该特征也是其并发症产生的主要原因之一[3]。肠道屏障功能是指肠道上皮具有分隔肠腔内物质、防止致病性抗原侵入的功能[4]。肠上皮屏障的重要组成部分之一是紧密连接，能有效防止肠腔内致病性抗原或其他有害物质进入肠黏膜，引发肠道免疫反应。肠道紧密连接蛋白包括跨膜蛋白（如Occludin蛋白）、外周膜蛋白（如ZO-1蛋白）和细胞骨架蛋白（如Claudin-1蛋白）等，对维持动物肠道健康至关重要[5]。饮食习惯改变可能直接影响人体的肠道屏障功能。相对于普通饮食，高脂饮食的突出特点是脂肪比重高，大量摄入高脂饮食能引起机体脂质代谢紊乱，脂肪大量堆积。同时，也可能引起肠道屏障功能受损，导致肠道通透性增加，进而产生细菌易位、内毒素血症、慢性低度炎症等症状。有研究表明，肠道屏障损伤也可能是引起炎性肠病的重要因素之一[6]。因此，高脂饮食可诱导肥胖症及继发性肠道损伤、慢性炎症等疾病，严重危害着人类健康，急需寻找一种预防或治疗肥胖及其并发症的新方法。

目前针对肥胖症的治疗方法有外科手术疗法[7]、中医疗法[8]、药物疗法[9]、神经调控技术疗法[10]等，最新研究显示，某些益生菌或益生菌制剂能够调节饮食或谷氨酸钠诱导的肥胖动物模型肠道菌群变化，进而改善其脂质代谢紊乱状态[11]。益生菌是一类能黏附在宿主肠道并对宿主产生益生作用的有益菌体，已证明补充益生菌、益生元或一些益生菌产品对抵抗宿主肠道内病原体、调节宿主免疫应答、调控脂肪储存等均有有益效果[12]。益生菌也能够改善诸多肠道疾病如炎性肠病、腹泻等伴随的肠道屏障功能损伤，Liu Meiling等的研究表明，乳酸乳球菌ML2018可阻止促炎因子的过量产生，抑制巨噬细胞的浸润，从而改善肠上皮细胞屏障的完整性，抑制硫酸葡聚糖钠诱导的肠道炎[13]。同时，益生菌也可以在一定程度上改善高脂饮食诱导的肥胖患者体内肠道屏障功能受损的症状。Krumbeck等的研究表明，双歧杆菌BB-12能调节肥胖人群肠道菌群紊乱的状态，改善结肠渗透性[14]。但目前针对菌粉类益生菌制品对肥胖患者的肠道屏障功能调节作用研究甚少，其作用机制也尚不清楚。

本研究利用植物乳杆菌菌粉干预肥胖模型大鼠，菌粉的主要活菌成分为植物乳杆菌N3117菌株，分离自内蒙古传统发酵乳制品，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心的保藏编号为CGMCC 10133。通过对该菌株pH值在线发酵情况分析、保质期内活菌数、酸度、pH值的评价，以及其与Caco-2细胞的黏附性的检测，发现其耐酸性强，能耐受动物体肠道的不良环境并有效黏附于宿主肠道，发挥益生作用[15]。因此，本实验探究植物乳杆菌菌粉对肥胖大鼠肠道屏障功能影响将为预防或治疗高脂饮食引起的肥胖患者肠道屏障功能损伤寻找新方法。

1 材料与方法

1.1 动物、材料与试剂

清洁级健康雄性SD大鼠50 只，体质量（130±10）g，合格证号：1806113，生产许可证号：SCXK（冀）2013-1003，购自河北医科大学实验动物中心。所有大鼠同室分笼饲养，每笼5 只，自由进食和饮水，昼夜光照变化周期为12 h光照12 h黑暗。环境温度控制在（23±2）℃，相对湿度55%～65%。实验动物购入后在动物饲养室适应性喂养1 周后开始造模。基础饲料购自河北医科大学实验动物中心。高脂饲料购自北京博泰宏达生物技术有限公司，含碳水化合物42.1%（质量分数，下同）、脂肪25.4%、蛋白质24.2%，于-20 ℃冰箱保存。

植物乳杆菌菌粉由石家庄某公司提供，植物乳杆菌N3117菌粉接种至MRS固态琼脂培养基倒置培养48 h，对培养后的益生菌菌落计数，确定活菌数为4×1011CFU。

ZO-1 一抗、辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）标记山羊抗兔二抗 武汉赛维尔生物科技有限公司；Occludin一抗 武汉Proteintech公司；Claudin-1一抗 美国Abcam公司；蛋白提取试剂盒 北京康为世纪生物科技有限公司；二喹啉甲酸（bicinchoninic acid，BCA）法蛋白定量试剂盒上海捷瑞生物工程有限公司；反转录试剂盒及荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）试剂盒 南京诺唯赞生物科技有限公司；大鼠脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）酶联免疫吸附测定（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒、大鼠D-乳酸（D-lactic acid，D-LA）ELISA试剂盒 苏州艾莱萨生物科技有限公司。

1.2 仪器与设备

高压蒸汽灭菌锅 日本Panasonic公司；-80 ℃超低温冰箱 青岛海尔集团；低温离心机 德国Eppendorf公司；电子称 宁波美佳宁公司；电子天平 日本Shimadzu公司；烘箱 北京永光明医疗仪器有限公司；台式高速冷冻离心机、超微量分光光度计 美国Thermo Fisher公司；酶标检测仪 美国BioTek公司；全自动生化分析仪 深圳Mindray公司；37 ℃恒温培养箱 上海新苗医疗器械；荧光定量PCR系统、蛋白发光成像系统 美国Bio-Rad公司；蛋白电泳及转移系统北京六一生物科技有限公司；脱水机、包埋机 武汉俊杰电子有限公司；病理切片机 德国徕卡仪器有限公司；组织摊片机 浙江科迪仪器设备有限公司；脱色摇床 美国Scilogex公司；组化笔 美国Gene Tech公司；正置光学显微镜 日本尼康公司。

1.3 方法

1.3.1 动物分组

50 只雄性SD大鼠依随机数字表法分为正常对照组（ND组，n＝10）和高脂饮食组（HFD组，n＝40），分别给予普通饲料及高脂饲料饲喂。饲喂5 周后，分析两组大鼠的体质量数据，以高脂饮食组大鼠体质量超过正常对照组大鼠（ND组，n＝10）体质量的20%为造模成功标准，最终高脂饮食组中造模失败的6 只大鼠予以剔除，34 只诱导肥胖成功的大鼠随机分为肥胖模型组（HFD组，n＝8）、高剂量菌粉干预组（High组，n＝9）、中剂量菌粉干预组（Middle组，n＝9）、低剂量菌粉干预组（Low组，n＝8）。菌粉干预组大鼠给予菌粉灌胃液，使用生理盐水配制，高、中、低剂量组每1 mL生理盐水分别溶解332、166、33.2 mg菌粉，灌胃剂量为1 mL/100 gmb，对照组以同体积生理盐水灌胃，每日1 次，共干预8 周。

1.3.2 样品采集及体脂率测定

实验期间每周记录大鼠体质量，8 周干预结束后，所有大鼠禁食不禁水12 h后用10%水合氯醛麻醉，心尖取血处死，4 ℃、4 000 r/min离心10 min，获得血清于-80 ℃超低温冰箱保存。取肾周脂肪、附睾脂肪、腹腔脂肪并称质量。取大鼠小肠组织，部分固定于通用型组织固定液，其余液氮冷冻后于-80 ℃超低温冰箱保存备用。体脂率按下式计算。

1.3.3 指标测定

1.3.3.1 血清LPS及D-LA水平的测定

根据ELISA试剂盒说明书检测血清LPS及D-LA水平。

1.3.3.2 小肠组织病变评估

根据Lang Junchao等[16]对大鼠小肠组织进行常规石蜡包埋，并进行HE染色，光学显微镜下观察大鼠小肠组织形态结构。

1.3.3.3 小肠Occludin、ZO-1、Claudin-1基因表达的检测

采用TRIzol法提取大鼠小肠组织总RNA并测定其纯度及浓度。去除基因组DNA后，依据反转录试剂盒说明书对所有RNA样品进行反转录处理。根据美国国家生物技术信息中心中GenBank公布的大鼠Occludin、ZO-1、Claudin-1、β-actin的基因序列，采用Primer 5软件设计引物，引物序列如表1所示。

表 1 引物信息及退火温度Table 1 Primer sequences and annealing temperatures used in this study

依据荧光定量PCR试剂盒说明书，设计荧光定量PCR反应体系，设定程序并进行扩增，结果以2-ΔΔCt法计算其相对表达量。

1.3.3.4 小肠Occludin、ZO-1蛋白表达的检测

取大鼠小肠组织包埋，切片并脱蜡。将脱蜡后的切片置于盛满柠檬酸抗原修复缓冲液（pH 6.0）的修复盒中进行热修复，3%双氧水溶液阻断内源性过氧化物酶，3%牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）均匀覆盖组织以封闭非特异性抗原。甩掉封闭液，在切片上滴加磷酸盐缓冲液（pH 7.4）按抗体效价比例配好的一抗，切片平放于湿盒内4 ℃孵育过夜。磷酸盐缓冲液洗涤3 次后加入与一抗相应种属的HRP标记的二抗，室温孵育50 min。之后经二氨基联苯胺显色、苏木精复染、梯度乙醇和二甲苯脱水，中性树胶封片。显微镜下镜检，每张切片随机挑选3 个100 倍视野进行拍照并应用Image-pro plus 6.0软件计算切片免疫组化平均光密度值。

1.3.3.5 小肠Claudin-1蛋白表达的检测

依据蛋白提取试剂盒说明书提取大鼠小肠组织总蛋白，BCA法测定蛋白质量浓度。取40 μg蛋白上样后进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳。电泳完成后，湿转法将蛋白从凝胶上转至聚偏氟乙烯膜上，5% BSA封闭。一抗孵育过夜，TBST快摇洗膜后二抗孵育，电化学发光试剂发光，扫描图像，蛋白分析软件对蛋白图像进行灰度分析。

1.4 数据统计分析

采用GraphPad Prism 5软件进行统计学分析，实验数据以平均值±标准差表示，两组间比较采用单因素方差T-test分析，P＜0.05为具有显著性差异，P＜0.01为具有极显著差异。

2 结果与分析

2.1 植物乳杆菌菌粉对各组大鼠体质量的影响

表 2 各组大鼠体质量比较Table 2 Comparison of body masses of rats from different groups

由表2 可知，实验前各组大鼠体质量差异无统计学意义。实验结束后，HFD组体质量极显著高于ND组（P＜0.01），High组体质量显著高于ND组（P＜0.05），Middle组及Low组体质量平均值高于ND组，但差异无统计学意义（P＞0.05）；与HFD组相比，High组体质量无显著差异（P＞0.05），Middle组显著降低（P＜0.05），Low组极显著降低（P＜0.01）。表明高脂饮食可诱导大鼠体质量显著增加，而中、低剂量植物乳杆菌菌粉干预可显著降低由高脂饮食引起的体质量升高。

2.2 植物乳杆菌菌粉对各组大鼠体脂率的影响

图 1 各组大鼠体脂率比较Fig. 1 Comparison of body fat percentages of rats from different groups

由图1可知，与ND组相比，HFD组、High组及Middle组大鼠体脂率显著升高（P＜0.05），Low组无显著差异（P＞0.05）；与HFD组相比，High组体脂率无显著差异（P＞0.05），Middle组及Low组均显著降低（P＜0.05）。由此可知，高脂饮食引起大鼠体脂率显著升高，中剂量及低剂量植物乳杆菌菌粉干预可显著缓解大鼠体脂率的升高。

2.3 植物乳杆菌菌粉对各组大鼠血清LPS和D-LA质量浓度的影响

表 3 各组大鼠血清LPS和D-LA质量浓度Table 3 Serum LPS and D-LA levels in rats from different groups

由表3可知，与ND组相比，HFD组大鼠血清LPS、D-LA水平均显著升高（P＜0.05），其余各组均无显著差异（P＞0.05）；与HFD组相比，Middle组血清LPS水平显著降低（P＜0.05），D-LA水平无显著变化（P＞0.05），Low组两指标均极显著降低（P＜0.01）。表明高脂饮食可引起大鼠血清中LPS、D-LA质量浓度升高，低剂量菌粉干预可极显著降低高脂饮食升高的血清LPS、D-LA质量浓度。

2.4 植物乳杆菌菌粉对各组大鼠小肠组织病理情况的影响

如图2所示，ND组肠黏膜组织无损伤性改变，肠上皮细胞和绒毛完整、排列整齐；与ND组相比，HFD组大鼠肠上皮细胞大量脱落，肠黏膜受损严重，小肠绒毛出现水肿及脱落现象；8 周菌粉干预后，High组肠黏膜组织损伤有轻微改善，Middle组和Low组可较明显缓解上述病变，表现为肠上皮细胞轻度受损，绒毛少量脱落，尤以Low组改善效果最优。

图 2 各组大鼠小肠组织病理情况（×200）Fig. 2 Pathological conditions of small intestine in rats from different groups (× 200)

2.5 植物乳杆菌菌粉对各组大鼠小肠ZO-1、Occludin、Claudin-1 mRNA表达水平的影响

高脂饮食可诱导大鼠肥胖，并影响大鼠肠道屏障功能，但具体机制尚不明确。本研究选取大鼠小肠紧密连接蛋白进行研究，通过检测其mRNA表达水平变化来探究植物乳杆菌菌粉对肥胖大鼠肠道屏障功能的影响。

图 3 各组大鼠小肠ZO-1 mRNA相对表达水平Fig. 3 mRNA expression of ZO-1 in small intestine of rats from different groups

利用GraphPad Prism 5软件对数据进行统计学分析，标准差对差异的显著性有影响，不能通过柱状图直观判断。该结果核验无误。由图3可知，与ND组相比，HFD组小肠组织中ZO-1mRNA相对表达量显著下降（P＜0.05），其余各组无显著变化（P＞0.05）。与HFD组相比，High组无显著差异（P＞0.05），Middle组、Low组小肠组织ZO-1mRNA相对表达量极显著提高（P＜0.01）。说明高脂饮食引起的大鼠肥胖伴随着小肠组织ZO-1mRNA相对表达量显著降低，但经过中剂量、低剂量菌粉干预后可显著缓解这种降低趋势。

图 4 各组大鼠小肠Occludin mRNA相对表达水平Fig. 4 mRNA expression of Occludin in small intestine of rats from different groups

由图4可知，与ND组相比，HFD组、High组及Middle组小肠组织中OccludinmRNA相对表达量无显著变化（P＞0.05），Low组相对于ND组及HFD组均有升高趋势，且差异均具有统计学意义（P＜0.05）。说明高脂饮食并没有引起小肠组织OccludinmRNA表达水平的显著降低，但经过低剂量菌粉干预后可显著提高Occludin基因的表达量。

图 5 各组大鼠小肠Claudin-1 mRNA相对表达水平Fig. 5 mRNA expression of Claudin-1 in small intestine of rats from different groups

图5结果显示，与ND组相比，HFD组、High组小肠组织中Claudin-1mRNA相对表达量均显著下降（P＜0.05）。与HFD组相比，High组、Middle组无显著差异（P＞0.05），Low组小肠组织Claudin-1mRNA相对表达量显著提高（P＜0.05）。这表明高脂饮食引起小肠组织Claudin-1mRNA表达水平显著降低，低剂量植物乳杆菌菌粉干预可显著缓解这种降低趋势。

2.6 植物乳杆菌菌粉对各组大鼠小肠ZO-1、Occludin蛋白表达水平的影响

由图6可知，ZO-1在ND组的肠上皮细胞和腺上皮细胞细胞质及细胞膜中呈阳性表达，表现为较多棕黄色着色。HFD组棕黄色着色明显减少，表明该组大鼠小肠组织ZO-1蛋白的表达减少。各剂量菌粉干预组棕黄色着色均增多，其中Low组棕黄色着色增多情况最为显著，提示低剂量植物乳杆菌菌粉对高脂饮食引起的大鼠小肠组织ZO-1蛋白表达下降有明显缓解作用。由图7可知，肠紧密连接蛋白Occludin在ND组的肠上皮细胞和腺上皮细胞的近胞膜胞质中阳性表达，表现为较多棕黄色着色。HFD组棕黄色着色明显减少，表明该组大鼠小肠组织Occludin蛋白的表达减少。Low组棕黄色着色显著增多，提示低剂量植物乳杆菌菌粉对高脂饮食引起的大鼠小肠组织Occludin蛋白表达下降有缓解作用。

图 6 免疫组织化学检测ZO-1蛋白表达（×100）Fig. 6 Immunohistochemical detection of ZO-1 protein expression (× 100)

图 7 免疫组织化学检测Occludin蛋白表达（×100）Fig. 7 Immunohistochemical detection of Occludin protein expression (× 100)

表 4 免疫组织化学分析ZO-1和Occludin平均光密度值Table 4 Average optical density of ZO-1 and Occludin in immunohistochemical analysis

应用Image-pro plus 6.0软件分析免疫组化切片平均光密度值可知（表4），与ND组相比，HFD组大鼠的小肠组织中ZO-1蛋白表达水平显著降低（P＜0.05），其余组无显著变化（P＞0.05）。与HFD相比，Middle组、Low组ZO-1表达量显著升高（P＜0.05），High组差异无统计学意义（P＞0.05）。与ND组相比，HFD组大鼠小肠组织中Occludin蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。与HFD组相比，Low组Occludin表达量显著升高（P＜0.05），其余各组无显著变化（P＞0.05）。

2.7 植物乳杆菌菌粉对各组大鼠小肠Claudin-1蛋白表达水平的影响

图 8 各组大鼠小肠Claudin-1蛋白相对表达水平Fig. 8 Protein expression of Claudin-1 in small intestine of rats from different groups

由图8可知，与ND组相比，HFD组、High组、Middle组Claudin-1蛋白相对表达水平均显著下降（P＜0.05），Low组无显著变化（P＞0.05）。菌粉干预后，与HFD组相比，Low组Claudin-1蛋白相对表达水平显著提高（P＜0.05）。这表明高脂饮食引起小肠组织Claudin-1蛋白表达水平显著降低，低剂量植物乳杆菌菌粉干预可显著缓解这种降低趋势。

3 讨 论

饮食、肠道菌群、氧化应激等多种因素均可改变肠道黏膜的通透性[17]，其中饮食与生活最为息息相关。研究发现，长期高脂饮食可引起机体脂质代谢紊乱，脂质合成水平高于分解代谢水平，从而引起机体脂质堆积。与此同时，不当的饮食习惯也会使机体肠道屏障功能异常，肠道通透性的增加可能导致内毒素、炎症介质、病原体等物质渗透入血，随肝门静脉进入血液循环，进而使机体产生炎性肠病、内毒素血症、慢性炎症等多种疾病，进一步恶化肠道屏障受损的程度[18-19]。已有大量实验和临床数据证明，益生菌能够通过调节肥胖患者肠道菌群以达到缓解肥胖症相关症状的作用，目前市面上常见的益生菌产品中使用最多的菌属是双歧杆菌和乳杆菌，其中乳杆菌属常用嗜酸乳杆菌，以植物乳杆菌为主要成分的益生菌产品较少。由于植物乳杆菌有稳定定植宿主体内等优良特性，探究植物乳杆菌菌粉对肥胖患者常伴随的肠道屏障功能受损状况保护作用具有现实意义。

大量研究已经报道了益生菌或益生菌产品可有效抑制高脂饮食引起的大鼠体质量增加和脂肪积累[20-21]。本实验结果表明，长期高脂饮食能显著提高SD大鼠的体质量及体脂率，与高脂饮食诱导的肥胖模型大鼠相比，经过中、低剂量植物乳杆菌菌粉干预的大鼠体质量和体脂率显著下降，提示该剂量下菌粉对改善动物肥胖程度有积极作用。

为全面评价长期高脂饮食对肠黏膜造成的损伤及植物乳杆菌菌粉的保护作用，本实验对各组大鼠血清LPS及D-LA含量进行了检测。LPS又称内毒素，是多数革兰氏阴性菌细胞壁成分，健康状况下，机体血液中的LPS含量很低，当肠道屏障功能受损时，肠道通透性增加，肠道内产生的内毒素便渗透入血液循环中，过量的LPS可与细胞膜上的TLR4受体结合并激活下游的NF-κB通路，引起促炎因子大量产生，造成机体炎症[22]。因此，血清中LPS含量是判断机体炎症与肠道通透性的重要指标之一。D-LA是肠道菌群的发酵代谢产物，在哺乳动物体内缺少将其快速降解的酶，一旦哺乳动物肠黏膜损伤从而导致肠道通透性增加时，肠腔内的D-LA便会大量释放入血，引起机体血清中D-LA水平显著升高[23]。本实验结果表明，经过高脂饮食诱导的肥胖模型组大鼠的血清LPS、D-LA质量浓度显著升高，与肥胖模型组相比，低剂量植物乳杆菌菌粉干预组大鼠血清中的上述指标水平均显著降低，这提示该剂量的植物乳杆菌菌粉可能对肥胖患者常伴有的慢性炎症及肠道屏障功能受损有保护及缓解作用。梁惠等[24]的研究中也提出了相同的结论。

为直观观察肥胖大鼠的肠道损伤程度及菌粉的干预效果，对大鼠小肠组织进行了HE染色。HE染色结果显示，肥胖模型组大鼠小肠上皮细胞组织破碎，肠黏膜受损严重，腺体以及肠黏膜大量脱落。低剂量菌粉干预组相对于肥胖模型组，小肠上皮组织破裂较少，黏膜轻度受损，腺体及肠黏膜少量脱落。这一结果进一步直观说明了该菌粉能较大程度地改善由高脂饮食引起的肠道黏膜屏障受损情况。

Xue Li等[25]在复合益生菌在改善大鼠非酒精性脂肪肝实验中，发现模型组大鼠小肠组织中紧密连接蛋白Occludin表达水平极显著下调，益生菌干预后该蛋白表达水平显著提高。这可能是由于复合益生菌定植在大鼠肠道，可改善模型大鼠肠道菌群紊乱情况，使肠道屏障功能得到恢复。紧密连接是肠上皮屏障的重要组成部分，由多种肠道紧密连接蛋白组成，主要包括跨膜蛋白、外周膜蛋白和细胞骨架蛋白等[26]。Occludin是紧密连接蛋白中跨膜蛋白的重要成员之一，多表达于肠上皮细胞、腺体细胞表面、胞浆及少数细胞核内，主要负责调控紧密连接的通透性并且维持细胞极性[27]。ZO-1是外周膜蛋白中的代表性蛋白，在细胞骨架形成中发挥重要作用[28]。Claudin-1是构成紧密连接的主要骨架蛋白，对于维持细胞间紧密连接的完整性和上皮细胞屏障功能的发挥具有重要作用[29]。大量研究显示，紧密连接蛋白表达水平的显著下调是导致机体肠道屏障功能损伤的主要原因[30-31]，因此猜测植物乳杆菌菌粉可能是通过上调紧密连接蛋白的表达水平来恢复受损肠道屏障功能的。本实验为探究其具体的作用机制，从mRNA与蛋白质水平分别检测了肠道紧密连接蛋白Occludin、ZO-1及Claudin-1的表达情况。实验结果显示，肥胖模型组大鼠肠道中的Occludin、ZO-1及Claudin-1蛋白表达水平均显著下降，低剂量菌粉干预后其表达水平显著上升，这一结果表明植物乳杆菌菌粉对肥胖大鼠肠道屏障功能的保护机制可能是通过上调肠道紧密连接蛋白的表达，进而促进受损伤的肠道屏功能得以恢复。

本实验设计高、中、低3 个剂量的菌粉对肥胖大鼠进行干预处理，结果表明高剂量菌粉干预在缓解肥胖及肠道黏膜损伤中未显示出显著作用，中剂量仅在部分指标上显示出显著作用，而低剂量菌粉干预对肥胖大鼠脂质堆积水平和肠道黏膜损伤状况均显示出显著有益效果。根据实验结果，推测植物乳杆菌菌粉可能通过上调Occludin、ZO-1及Claudin-1蛋白表达，从而保护高脂饮食诱导的肥胖大鼠肠道黏膜屏障功能。因此，深入研究开发以植物乳杆菌为主要成分的益生菌制品可能对于缓解肥胖引起的肠道屏障功能损伤具有重要意义，本实验所体现的剂量差异效果也可能对益生菌制品的开发提供有效参考。