高危型HPV 感染患者做宫颈细胞DNA 定量分析的临床意义探讨

刘倩文 薛永杰 周刘勇

（东莞康华医院病理科 广东 东莞 523080）

宫颈癌是女性高发的恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌，严重威胁女性健康，并有较高的病死率。宫颈癌的病变是一个长期的过程，如果能在发病早期及时诊断并治疗，能有效防治病情进展，甚至逆转恶变[1]。因此，临床对宫颈癌的早期筛查十分重视。高危型HPV 感染是引发宫颈癌的重要致病因素，如何提高这类患者的宫颈癌筛查效果是临床需要解决的问题。宫颈细胞DNA 定量分析是一种常用的检测方法，能够对宫颈癌进行诊断和预测[2]。本研究进一步分析高危型HPV 感染患者做宫颈细胞DNA 定量分析的临床意义，现具体汇报如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

分析2019 年1 月—2020 年1 月在我院妇科治疗的90 例高危型HPV 感染患者的临床资料，年龄23 ～68 岁，平均年龄（41.8±9.7）岁；所有患者均经宫颈HPV 检测确诊为高危型HPV感染，并行宫颈病理活检证实，其中，炎症38 例、CIN Ⅰ24 例、CIN Ⅱ18 例、CIN Ⅲ10 例（阴性38 例、阳性52 例）；排除检查依从性差者、妊娠及哺乳期女性、精神或意识障碍、合并其他严重躯体疾病。

1.2 高危型HPV 感染的诊断方法

采用荧光PCR 法行高危型HPV 分型定性检测，使用上海罗氏公司Cobas Z 480 实时荧光定量PCR 仪检测高危型HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，66，68。根据质控阳阴性对照判定结果[3]。

1.3 方法

所有患者均行宫颈细胞DNA 定量分析，使用厦门麦克奥迪全自动细胞肿瘤筛查分析系统，宫颈癌筛查试剂由厦门麦克奥迪公司提供；刷取宫颈细胞装入固定液中，用液基细胞制片仪制片，行Feulgen 染色，最后行DNA 定量分析，用全自动细胞肿瘤筛查分析系统扫描处理，共扫描至少5000 个细胞核，根据DNA 指数（DI），统计患者的宫颈癌危险性[4]。

1.4 DI 标准

DI ＜2.5 为正常，建议1 ～2 年后进行复查；2.5 ≤DI ＜4.5（n ＜3）为有少量DNA 倍体异常细胞，细胞数不足3 个，建议4-6 个月后进行复查；2.5 ≤DI ＜4.5（n ≥3）为可见DNA倍体异常细胞，且异常细胞数≥3 个，建议立即行阴道镜活检；DI ≥4.5 为有多个异倍体细胞，建议立即行阴道镜活检。将DI ≥2.5 作为DNA 倍体异常[5]。

1.5 观察指标

分析DNA 异倍体与病理活检结果之间的关系，计算DNA 定量分析的敏感度、特异度和准确度。

1.6 统计学方法

数据采用SPSS22.0统计学软件分析处理，计数资料采用率（%）表示，行χ2检验，计量资料用均数±标准差（±s）表示，行t检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 DNA 异倍体与病理活检结果之间的关系

宫颈病变程度与DI 呈正比，宫颈病变程度越高，DI 越高，见表1。

表1 DNA 异倍体与病理活检结果之间的关系（n）

2.2 DNA 定量分析的敏感度、特异度和准确度分析

DNA 定量分析的敏感度90.38%（47/52）、特异度92.11%（35/38）、准确度91.11%（82/90）。

表2 DNA 定量分析和病理活检结果（例）

3.讨论

我国每年新发的宫颈癌病例高达13 万以上，虽然临床在宫颈癌的早期筛查和治疗上有显著提高，但仍有较高的发病率和病死率。近年来，宫颈癌发病向年轻化趋势发展，防治形势不容乐观。高危型HPV 感染患者是宫颈癌的潜在发病人群，与宫颈癌的发病密切相关，其发展为宫颈癌的几率较高，是临床重点筛查对象。但临床可供选择的宫颈癌筛查方法较多，效果不一，其中，宫颈细胞DNA 定量分析是重要的筛查方法之一，其对宫颈癌及癌前病变的诊断在国内外已有大量报道。

人体的体细胞具有较为恒定的DNA 含量，当细胞发生病变或癌变，染色体基因可发生突变，导致DNA 含量的改变，出现异倍体细胞。这给DNA 定量分析提供了理论基础。DNA 定量分析的主要方法是通过将获取的宫颈脱落细胞经离心、分层、分离等制成薄片，仔细观察细胞形态和结构，发现异常细胞，并通过全自动细胞肿瘤筛查分析系统计算DNA 倍体异常数量，能够客观、准确、快速的获得宫颈细胞DNA 信息，避免了以往巴氏涂片的不足，大大减少了人为差错的发生，检查结果准确可靠。同时，DNA 定量分析能够掌握正常宫颈细胞的周期变化特征，尽早发现宫颈细胞是否有恶性增殖[6]。

对于高危型HPV 的患者，单纯行宫颈LCT 检查，正确诊断率只有70%～80%，个别年轻患者因为过诊断而不可避免行宫颈锥切。如果对于高危型HPV 的患者，行宫颈LCT 检查联合宫颈细胞DNA 定量分析，正确诊断率达95%以上，有助于提高对宫颈癌的筛查效果及正确诊断率，并且避免不必要的宫颈锥切。

本研究结果显示，DNA 异倍体与病理检查结果呈正比，病变程度越高，DI 值越高；DNA 定量分析的敏感度90.38%（47/52）、特异度92.11%（35/38）、准确度91.11%（82/90）。充分证明DNA 定量分析对高危型HPV 患者筛查宫颈癌是可行的，能够准确检出DNA 异倍体，对病变宫颈细胞的敏感度及特异度高，从而提高了整体的准确度，有助于临床根据DI 值指导临床进行进一步检查，从而使阴道活检更具针对性，提高癌前病变及宫颈癌的诊断率。

综上所述，高危型HPV 感染患者做宫颈细胞DNA 定量分析有确切的临床意义，敏感度、特异度及准确度高，为病变的生物学行为提供了更多信息，有助于临床明确诊断，并能减少常规宫颈筛查带来的大量工作量，值得在临床应用。