咸金枣促消化作用研究

曾木花 黄英强 陈日春 郭泽镔 谢勇

摘 要：目的：评价咸金枣受试样品的促消化功能。方法：SD大鼠设空白对照组和低、中、高实验剂量组（46.3、 62、93mg/kg），每日灌胃1次，连续30d后，测定各组大鼠体重增重、进食量、食物利用率等指标;另取各组大鼠胃液，测定其胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。KM小鼠实验设空白对照组、模型对照组、阳性对照组和低、中、高实验剂量组（9.3、12.3、18.6mg/kg），每日灌胃1次，连续30d后，测定各组小鼠墨汁推进率。结果：SD大鼠体重、进食量、体重增重3项指标中，各实验剂量组大鼠体重增重有明显增长趋势，具有统计学差异（P<0.05）;消化酶实验结果表明，胃蛋白酶活性与空白组相比显著增加（P<0.05）。小鼠小肠运动实验表明，采用不同剂量咸金枣饲喂后，各组小鼠肠道墨汁推进率均有不同程度提高（P<0.05）。结论：咸金枣受试样可有效增加实验动物体重并显著提高实验动物胃蛋白酶活性，进而促进小鼠肠道运动能力，发挥促消化作用。

关键词：咸金枣;促消化;体重增重;胃蛋白酶活性

消化不良是消化科门诊较为常见的一种肠胃疾病，其主要症状包括胃脘痛、餐后饱胀、上腹灼热感、嗳气、食欲不振、恶心等[1]，对患者的工作和生活造成诸多不便。目前，临床上常用多潘立酮、伊托必利等药物治疗消化不良，但其不适用于肝肾功能障碍的患者长期使用[2];另外，增加胃动力药物或消化酶制剂等化学药物也是常用于治疗消化不良的方式。然而，该方法虽然见效快，但不能从根本解决问题，还会诱发过敏反应、产生耐药性等一系列问题[3]。因此，选择疗效确切、安全性高的药物成为缓解消化不良研究領域的热点。

咸金枣是以新鲜金枣为主要原料，辅以甘草、丁香、肉桂、川贝、砂仁、豆蔻等多种药食同源的中药材配伍加工而制得，其中各原料具有丰富的营养与中医功效特点。金兴咸金枣已被福建省人民政府纳入非物质文化遗产。新鲜金枣富含多种维生素，其酸性成分可促进唾液消化酶分泌，达到增强食欲的效果[4];甘草既可以益气又可以滋补脾胃[5];丁香是一种极好的温胃中药，可以有效缓解腹部胀气，增强人体的消化能力[6];肉桂对患有胃寒以及胃炎的人群具有良好的疗效[7];砂仁和豆蔻，开胃消食，可治疗脾胃虚寒气滞[8 9]。咸金枣选取的中药材都是药食同源的中药，且在中医功效上多具有温胃或促消化作用。咸金枣质地松软，芳香扑鼻，口味咸、酸、甜适中，滋味纯正，有健脾胃、助消化、除积食腹胀、润肺化痰之功效，成品具有改善消化的保健作用，适合消化不良的人群食用[4]。然而，目前缺乏科学实验证实咸金枣的促消化作用。本研究通过实验动物实验，评价咸金枣受试样品对大鼠体重、体重增重、进食量、食物利用率、消化酶以及小鼠小肠推进运动功能的影响，以验证咸金枣的促消化功能。

1 材料与仪器

1.1 材料

咸金枣，福建省诏安县四海食品有限公司;复方地芬诺酯（批号：1703003），湖南康普药业有限公司;阿拉伯树胶，上海祥瑞生物科技有限公司;活性炭粉，河南海韵环保科技有限公司;川奇消食片，南昌川奇保健品有限公司;水合氯醛（批号：20180813），国药集团化学试剂有限公司。

1.2 仪器

电子天平（型号：FB223），上海仪天科学仪器有限公司;低速离心机（型号：SC03），安徽中科中佳科学仪器有限公司;隔水式培养箱（型号：LRH 70），上海一恒科学仪器有限公司;破壁机（WBL1022S），广东美的生活电器制造有限公司。

1.3 实验动物

KM雄性小鼠60只，体重17～22g，SPF级，购自福建省福州市吴氏动物中心;SD雄性大鼠32只，体重范围130～160g，清洁级，购自福建省福州市吴氏动物中心;动物饲养温度24～26℃;空气湿度40%～70%;动物购入后适应环境7d后，进行正式实验。

1.4 受试样品制备

将咸金枣加水匀浆，制成匀浆液。阳性对照药选川奇健胃消食片。配制浓度为12.3g/50mL，每日灌胃2次，每次0.3mL。

1.5 实验分组及剂量设计

小鼠分组及剂量设计：KM小鼠，每组10只，设置空白组、阳性对照组、模型组和实验剂量组（低、中、高剂量）。空白组和模型组小鼠灌胃量为每天每只0.3mL蒸馏水;阳性对照组小鼠灌胃量为每天每只0.3mL川奇消食片溶液;小鼠低、中、高实验剂量组咸金枣每日灌胃剂量分别为9.3、12.3、18.6mg/kg，每日灌胃1次，连续灌胃30d。

大鼠分组及剂量设计：SD大鼠随机分配为4组，每组8只，设置空白组和低、中、高实验剂量组;大鼠低、中、高实验剂量组咸金枣每天摄取量分别为46.3、62、93mg/kg，空白组灌胃量为每天每只1.0mL蒸馏水，灌胃时间为30d。

1.6 实验方法和观测指标

1.6.1 SD大鼠体重、体重增重、进食量及食物利用率测定 采用清洁级SD大鼠，灌胃咸金枣溶液，剂量如1.4，灌胃30d。实验结束前测定大鼠的体重并计算大鼠体重增重、进食量及食物利用率。

食物利用率（%）=（单位时间体重增加/单位时间进食量）×100%（1）

1.6.2 KM小鼠墨汁推进率测定[10] 制备碳末指示剂：用量筒量取400mL蒸馏水加入锅中，200℃加热;用电子天平精确称量50g阿拉伯树胶倒进锅中，煮到是透明状溶液;称量25g活性炭到溶液中，沸腾几次后，放凉加入蒸馏水到500mL。复方地芬诺酯溶液配制与剂量：将复方地芬诺酯片研磨成细粉，精确称取1.0g加入蒸馏水至20mL混合均匀即可。小鼠小肠运动实验开始前，小鼠停止饲料供给但不断水16h，在实验当天各剂量组灌胃1次实验样品，空白组及模型组灌胃蒸馏水、阳性对照组灌胃阳性样品溶液;30min后各剂量组、阳性对照组和模型组灌胃0.05%复方地芬诺酯，空白组灌胃0.3mL蒸馏水;30min后空白组、模型对照组、阳性对照组、各剂量组灌胃0.4mL碳末指示剂，25min后颈椎脱臼杀死小鼠，剪开小鼠腹腔，仔细分离黏膜，剪取幽门到回盲部的小肠，将小肠拉直放在桌面上，用长尺测量墨汁推进的长度和小肠的总长度。

墨汁推进率（p）=碳末指示剂推进长度（cm）/小肠总长度（cm）×100%（2）

1.6.3 SD大鼠胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量测定 大鼠消化酶实验开始前24h，大鼠停止饲料供给，但不断水。大鼠进行腹腔注射水合氯醛麻醉，四肢固定在泡沫板上。剪去腹毛，消毒，剪开剑突下腹大约5cm;找到用细线绑住大鼠胃下端幽门部分;5h后打开大鼠腹腔，用细线绑住上端贲门部分，剪断并取出胃，用滤纸擦净血迹后，剪开胃腔，把内容物倒入刻度离心管中，放入低速离心机中以转速3 000r/min离心15min后，取上清液[11 13]。

测定胃蛋白酶活性：通过吸耳球把新鲜鸡蛋清（纱布过滤）吸入2.0mm的玻璃管，平放在恒温水浴锅上，温度设置为90℃，蛋白凝固后将蛋白管取出，选择没有气泡的蛋白管，使用前制成10cm长度;按照1mL的胃液量加15mL 浓度为0.05mol/L的盐酸倒入25mL带盖玻璃管中混合均匀，每个玻璃管加入2根蛋白管，密封后放入37℃隔水式培养箱中，24h后取出用长尺测量蛋白管四端减少的长度（mm）。

胃蛋白酶活性单位（μ/mL）=4端蛋白管透明长度均值2×16（3）

胃蛋白酶排出量（μ/h）=胃蛋白酶活性×每小时胃液量（4）

1.7 统计方法

采用SPSS 19.0 软件采取单因素方差分析LSD法处理数据，分析确定各组实验数据是否具有统计学差异。

2 结果与分析

由图1可见，模型对照组小鼠的小肠墨汁推进率明显低于空白组（P<0.01），说明复方地芬诺酯造模后引起小鼠肠道便秘。当用不同剂量咸金枣对小鼠进行干预饲养后，各组小鼠肠道墨汁推进率均有不同程度的提高（P<0.05），说明咸金枣通过促消化作用，起到促进肠道蠕动的效果。由图2～4可见，咸金枣受试样品给大鼠受试30d后，对大鼠体重增重、进食量和食物利用率均有明显的增长趋势（P<0.05）。体重增重、进食量和食物利用率是一组用于间接评价食物消化率的指标[13]，从这组指标可见，咸金枣混合物可有效地改善大鼠的消化性能。由图5～7可见，各咸金枣受试组大鼠胃蛋白酶活性相比空白组具有明显的增长作用（P<0.05），但各实验剂量组每小时胃液量没有明显的差别（P>0.05），而每小时内胃蛋白酶排出量相比空白组也没有明显的差别

3 讨论

功能性消化不良（FD）是由胃动力障碍引起无器质性疾病的一组临床综合征。FD的发病率逐年上升，且复发率高。世界各地区消化不良发病率为7%～63%，其中中国FD的发病率为18%～45%，占消化科门诊的20%～50%[14]。流行病学调查显示，普通人群中有消化不良者占19%～41%[2] 。因此，发掘有效的助消化食品具有重要研究意义。

本研究由实验大鼠评价咸金枣的促消化功能，通过测定SD大鼠体重、体重增重、摄食量、食物利用率，结合大鼠胃液量、胃蛋白酶活性、胃蛋白酶排出量和小鼠小肠运动能力等指标评价咸金枣的促消化作用。本研究发现，咸金枣受试样品对大鼠体重增重有明显的作用效果（P<0.05）。大量促消化研究认为，消化功能提高后，对食物消化吸收的能力增强、速度加快，进食量随之增加[15]，进而使得实验动物体重增重，即通过增强实验动物对饲料的消化吸收能力，以提高食物利用率[16]，使其转变成明显的体重增重，说明体重增重与促消化是相互关联的[11]。本研究发现，使用咸金枣受试样品后，大鼠低、高剂量组体重增重明显，因此，可以從一方面体现咸金枣对大鼠促消化作用的提高。同时，实验发现，咸金枣组大鼠的进食量也比对照组显著提高（P<0.05），其食物利用率相应得到改善。

人体中胃蛋白酶可以把食物中的蛋白质分解为小的肽片段，即具有助消化的作用[17]。在大鼠的消化酶测定实验中，低、高剂量组胃蛋白酶活性具有显著性差异（P<0.05），实验动物消化系统功能中重要标志之一是胃肠功能，其通过分泌消化酶对营养物质进行消化吸收[11]，故胃蛋白酶活性的增加从另一方面表明咸金枣对大鼠促消化作用的提高;实验发现，咸金枣组胃蛋白酶排出量相比对照组没有显著提高（P>0.05），其原因可能是各组胃液收集量之间没有显著差异，导致其总体排出量差异不显著。

本研究发现，SD大鼠体重、进食量、体重增重3项指标，在各剂量组大鼠中均有显著性增加（P<0.05），实验结果呈阳性;测定消化酶实验中低、高剂量组胃蛋白酶活性跟空白组相比明显增加（P<0.05）。结合小鼠墨汁推进率实验结果，可以得出咸金枣有显著的促消化功能。下一步将对咸金枣的促消化功能进行人体试食实验，并对其促消化功能的物质基础和作用机理进行深入研究。◇

参考文献

[1]牟亭亭.运用腹针治疗功能性消化不良72例[J].中西医结合研究，2015（5）：240 241.

[2]戴苏宁.多潘立酮与复方消化酶联合用药对功能性消化不良患者的疗效及并发症的影响[J].泰山医学院学报，2016，37 （12）：1361 1363.

[3]王莉.健脾调中消痞方治疗脾虚气滞型功能性消化不良的临床疗效观察[J].中国医药指南，2019，17 （9）：1 2.

[4]张玮玲.云霄特色名果金枣的现状与发展对策[J].东南园艺，2015 （1）：24 26.

[5]曹峰.茯苓甘草汤治疗功能性消化不良胃虚饮停证的理论及实验研究[D].北京：北京中医药大学，2009.

[6]郭永红.复方丁香开胃贴临床应用研究进展[J].世界最新医学信息文摘，2017，17 （95）：61 62.

[7]侯小濤，郝二伟，秦健峰，等.肉桂的化学成分、药理作用及质量标志物 （Q marker）的预测分析[J].中草药，2018，49 （1）：20 34.

[8]陈为凯.砂仁和胃汤治疗慢性浅表性胃炎86例[J].实用中医药杂志，2018，34 （11）：1323 1324.

[9]汪庆飞，高家荣，邢亚群，等.补骨脂 肉豆蔻药对对脾虚泄泻小鼠肠道功能的保护作用[J].安徽医药，2018，22 （9）：1661 1664、1855.

[10]阴文娅，曾果，郑卫东，等.阳春砂促进消化功能的实验研究[J].食品研究与开发，2008，29（6）：30 33.

[11]傅曼琴，肖更生，吴继军，等.广陈皮促消化功能物质基础的研究[J].中国食品学报，2018，18 （1）：56 59.

[12]姚莉，鞠洋.窄叶鲜卑花促消化作用的实验研究[J].中国中西医结合消化杂志，2009，17 （6）：376 378.

[13]陈江，章荣华，顾昉，等.獐宝提取物促消化吸收作用研究[J].中国卫生检验杂志，2012，22（4）：757 759.

[14]胡学军，杨小静，刘少南，等.枳术宽中胶囊治疗功能性消化不良的系统评价和Meta分析[J].安徽中医药大学学报，2018，37 （1）：16 22.

[15]黄文绮，吴仲，李煌，等.太子参保健酒促消化功能的研究[J].海峡药学，2015，27 （5）：32 34.

[16]Cost，Gregory J.Enzymatic ligatio assisted by nucleases：simultaneous ligation and digestion promote the ordered assembly of DNA[J].Nature Protocols，2007，2 （9）：2198 2202.

[17]温靖，徐玉娟，肖更生，等.青梅提取物的制备及体内促消化功能研究[J].食品科学，2010，31（5）：266 269.

Improving Effect of Salted Kumquat on The Function of Digestion

ZENG Mu hua1，HUANG Ying&nbsp;qiang2，CHEN Ri chun3，GUO Ze bin 1*，XIE Yong 4*

（1 College of Food Science，Fujian Agricultural and Forestry University，Fuzhou 350002，China;2 Fujian Zhaoan Sihai Food Co.Ltd.，Zhaoan 363500，China;3 Fujian Saifu Food Inspection Research Institute Co.Ltd.，Fuzhou 350001，China;4 College of Pharmacy，Fujian University of Traditional Chinese Medicine，Fuzhou 350122，China）

Abstract： Objective To evaluate whether the sample of salted kumquat has the function of improving digestion abilities of experimental animals. Result SD rats were divided into the groups of the blank control group and low/ medium/ high dose groups（46.3mg/kg，62mg/kg and 93mg/kg）administrated with the Salted Kumquat once a day.The body weight gain，food intake and food utilization rate of the rats in each group were measured after 30 days，and pepsin activity and pepsin output of SD rats in each group were measured after 30 days.On the other hand，KM mice were divided into the blank control group，model control group，positive control group and low/medium/high dose groups（9.3mg/kg，12.3mg/kg and 18.6mg/kg）administrated with the Salted Kumquat once a day，the ink advance rate of KM mice in each group were measured after 30 days. Result The results indicated that the weight gains，food intake and food utilization rate of SD rats in the low/medium/ high dose groups were significantly increased （P<0.05），and the ink advance rate of KM mice in each group administrated with the Salted Kumquat was also significantly increased.On the other hand，the pepsin activity in all test groups were significantly higher than that in the blank group （P<0.05）. Conclusion The tested sample of Salted Kumquat can achieve the purpose of promoting digestion by effectively increasing the weight of experimental animals and significantly improving the activity of pepsin in experimental animals.

Keywords：salted kumquat;improving digestion;weight gain;pepsin activity