血清7-AABs、CEA、ProGRP 水平变化与肺癌患者预后的关系研究

李曼，翟成凯，张祥杰

（新乡市第一人民医院呼吸与危重症医学科，河南 新乡453000）

部分地区的报道研究发现,肺癌的发病率或者致残率均具有明显的上升趋势[1]。 在长期吸烟或者合并有肺癌家族史的群体中,肺癌的发病风险可持续上升[2]。临床上肺癌患者的整体临床预后较差,肺癌患者远期生存时间较短。 而通过对于肺癌临床预后的预测或者评估,能够为临床上肺癌的诊疗提供理论方面的参考。 血清学肿瘤蛋白的检测，能够在肺癌的诊疗过程中发挥作用。7 种自身免疫性抗体（seven autoantibodies，7-AABs）能够通过反应癌细胞膜异常自身抗原的激活情况,反应癌细胞的持续性自我扩增过程,最终影响到肿瘤细胞的异常分裂[3]；癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）能够反应癌细胞的浸润和粘附过程,评估肿瘤细胞复发和转移的风险[4]；胃泌素释放肽前体(pro-gastrinreleasing peptide，ProGRP) 能够通过影响到肿瘤细胞内信号通路的激活,最终促进肺泡上皮细胞的持续病变过程[5]。 为了揭示7-AABs、CEA、ProGRP 的表达与肺癌患者临床预后的关系,从而为临床上肺癌的诊疗提供参考， 本次研究选取2015 年8 月-2017 年8 月在我院接受治疗的肺癌患者为研究对象，探讨了7-AABs、CEA、ProGRP 的表达及其与肺癌患者临床预后的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015 年8 月-2017 年8 月在我院接受治疗的肺癌患者为研究对象。 纳入标准：⑴年龄≥18 周岁；⑵病理确诊为肺癌者；⑶无其他系统严重疾病者；排除标准：⑴不愿参与本项研究者；⑵存在其他部位原发肿瘤者。 根据纳入排除标准共纳入病例数100 例，男85 例，女15 例，年龄49~78 岁，平均56.27±3.11 岁；对照组纳入标准：年龄≥18 周岁,无肿瘤相关疾病者,共纳入100 例，男70 例,女30 例，年龄56.29±3.07 岁。 本项研究经医院伦理委员会评审通过,且所有患者均知情同意。

1.2 研究方法 采用一次性静脉血采集器进行肘部静脉血采集，采集5ml 静脉血后自然放置，取上清液体进行检测。 采用贝克曼库尔特公司UniCel DxI 800 免疫发光仪器进行CEA、ProGRP 的检测，配套试剂盒购自北京九强生物公司。

采用ELISA 法进行7-AABs 的检测,采用十字交叉的方法进行抗原浓度的测定,采用碳酸盐缓冲液进行抗原稀释，加入96 孔的酶标板中，盖好酶标板盖后置于4℃冰箱过夜,蒸馏水冲洗3 次，每次5min,轻轻叩击酶标板甩干。每孔中加入5%的脱脂牛奶200μl，置于4℃冰箱过夜，蒸馏水冲洗3 次，每次5min,加入稀释好的抗体（购自abcum 公司 批号：20083845 浓度1：800），蒸馏水冲洗3 次，每次5min，每孔中加入100μl 的底物，显色后在酶标仪上进行吸光度的检测。

1.3 评价指标 观察两组患者7-AABs、CEA、Pro-GRP 水平的差异, 比较不同预后的肺癌患者7-AABs、CEA、ProGRP 水平的不同。

1.4 统计学处理 数据采用Excel 录入后,采用SPS S 11.5 软件分析。 7-AABs、CEA、ProGRP 水平使用均数±标准差表示, 采用t 检验和相关分析法进行统计处理。 P<0.05 为差异有统计学意义。

2 研究结果

2.1 两组患者7-AABs 水平的比较 观察组患者的抑 癌 基 因 产 物p53、PGP 9.5、SOX2、GAGE7、ATP结合RNA 解旋酶GBU4-5、MAGE A1、CAGE 水平高于对照组患者（P<0.001）。 见表1。

2.2 两组患者CEA、ProGRP 水平的比较 观察组患者的CEA、ProGRP 水平分别为85.23±4.24μg/L、46.79±5.08pg/ml，高于对照组患者（P<0.001）。 见表2。

表1 两组患者7-AABs 水平的比较

表2 两组患者CEA、ProGRP 水平的比较

2.3 不同预后肺癌患者7-AABs 水平的比较 存活组 患 者 的 抑 癌 基 因 产 物p53、PGP 9.5、SOX2、GAGE7、ATP 结合RNA 解旋酶GBU4-5、MAGEA1、CAGE 水平低于死亡组患者（P<0.001）。 见表3。

2.4 不同预后肺癌患者CEA、ProGRP 水平的比较存活组患者的CEA、ProGRP 水平分别为18.92±2.35μg/L、30.25±4.12pg/ml，明显低于死亡组（t=-8 9.555、-17.447，P<0.001）。 见表4。

2.5 p53、PGP 9.5、SOX2、GAGE7、ATP 结 合RNA解旋酶GBU4-5、MAGEA1、CAGE 水平与患者预后的相关性 相关分析法结果显示，p53、ATP 结合RNA 解旋酶GBU4-5 与患者预后密切相关(r=0.34 2、0.413，P<0.05）。

表3 不同预后肺癌患者7-AABs 水平的比较

表4 不同预后肺癌患者CEA、ProGRP 水平的比较

3 讨论

持续性的肺泡腺体上皮细胞的病变,或者长期环境、遗传基因等病理生理因素的刺激，均能够促进肺泡腺体上皮细胞的异常病变[6]。在年龄大于65岁长期吸烟的男性群体中,肺癌的整体发生风险可明显上升[7]。 流行病学随访观察研究发现，肺癌患者的5 年生存率不超过40%,同时肺癌患者的无瘤生存时间也明显的缩短[8]。 通过对于肺癌临床预后的早期评估,能够在肺癌的临床治疗方案的确定或者随访方式的制定等方面发挥参考作用。 影像学检查虽然能够在肺癌的诊断过程中发挥参考作用,但其对于肺癌临床转归或者病死风险的预测价值较低，对于肺癌生存预后评估的滞后性较为明显。血清鳞状细胞抗原或者CA199 等肿瘤指标, 虽然能够在肺癌的临床预后评估过程中发挥参考作用。 但依靠CA199 等指标评估肺癌临床预后的灵敏度不足35%,其对于肺癌临床预后评估的特异性较低[9]。 而本次研究的创新性在于探讨了7-AABs、CEA、ProGRP 的表达与肺癌临床预后的关系。

抑癌基因产物P53、 蛋白基因产物9.5（PGP 9.5）、性别决定区Y 框蛋白2（SOX2）、睾丸抗原G抗原7(GAGE7)、ATP 结合RNA 解旋酶（GBU4-5）、黑色素瘤抗原A1 （MAGEA1）、 肿瘤相关基因（CAGE）,作为肿瘤自身免疫性抗体，其能够在癌基因的激活或者肿瘤细胞核DNA 的异常分裂过程中发挥作用[10]； CEA 是非特异性的肿瘤相关抗原，在肿瘤细胞线粒体或者内质网中，CEA 可显著表达[11]；ProGRP 是胃泌素调控相关因子，其不仅能够参与到胃肠道激素的分泌过程,同时还能够影响到胃粘膜腺体上皮细胞的早期病变过程[12,13]。 目前为止多数研究探讨了CEA 在胃癌患者中的表达情况, 认为在胃癌患者中CEA 蛋白的表达水平可明显上升[14]，但对于7-AABs 的分析研究不足。

在本次研究中，可以发现的是胃癌患者中，肿瘤自身免疫性抗体成分如p53、PGP 9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1、CAGE 的表达均明显上升,高于肺囊肿对照组患者，统计学差异显著，表明p53、PGP 9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA 1、CAGE 的高表达均能够影响到肺癌的病情进展过程。 这主要由于肺癌癌细胞的增殖失控，能够通过诱导T 淋巴细胞及体液免疫抗体的激活,最终促进自身免疫性抗体的合成和释放。项保利等[15]研究者也一致认为, 在肺癌患者中SOX-2 的表达浓度可随着肺癌患者的病情进展为上升,在肺癌病情较晚严重或者远期生存预后较差的患者中，SOX-2的表达水平可进一步的上升。 肺癌患者中CEA、ProGRP 的表达浓度也明显上升，高于肺囊肿患者，统计学差异明显，CEA、ProGRP 的上升主要由于肺癌细胞异常凋亡的过程中,部分癌细胞膜结构蛋白的分解,能够显著促进癌细胞内CEA、ProGRP 的释放，从而导致外周血中CEA、ProGRP 的上升。 在探讨不同因子的表达与肺癌临床预后的关系中，发现在存活组肺癌患者中,p53、PGP 9.5、SOX2、GA GE7 等的表达水平明显下降，低于病死组患者，这主要由于存活组患者，其体内癌细胞的扩增、异常分化及浸润等病理过程程度较轻,降低了其对于机体免疫系统的侵犯,从而降低了自身免疫性抗体的合成。 存活组肺癌患者，其体内CEA、ProGRP 的表达浓度同样明显下降,低于病死组患者，提示CEA、ProGRP 的表达与肺癌患者的临床预后同样有关。临床上可以通过早期检测CEA、ProGRP 等指标，进而协助预测肺癌的临床预后和转归情况。 相关分析研究可见，p53、ATP 结合RNA 解旋酶GBU4-5 与患者预后密切相关,提示相比于其他指标,p53、ATP 结合RNA 解旋酶GBU4-5 与肺癌患者临床预后的紧密程度更高。 临床上可以通过检测p53、ATP 结合RNA解旋酶GBU4-5 等指标， 进而评估肺癌患者的临床预后。

综上所述,在肺癌患者中7-AABs、CEA、ProGR P 的表达水平明显上升, 同时7-AABs、CEA、Pro-GRP 的表达与肺癌患者的临床预后有关。 但关于7-AABs、CEA、ProGRP 诊断肺癌临床预后的具体血清临界值仍然需要进一步探讨。