重症脑出血病人血清HSP70、HSP90水平与应激性溃疡的关系

范路梅，魏 红，谢小红

脑出血是指非外力导致的血管破裂出血，其发生主要与脑血管病变有关，应激性溃疡是重症脑出血的主要并发症之一，增加了重症脑出血病人的死亡率[1]，应激性溃疡有血红蛋白(hemoglobin，Hb)、血细胞比容(hematocrit，HCT)下降以及便隐血阳性等典型症状，但三者均为非特异性指标，因此，寻求简便易行、特异性高的生化指标诊断是否发生应激性溃疡确有必要。热休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)是重要的应激蛋白，几乎在所有生物应激细胞中高水平表达，有研究表明其与应激性溃疡的发生密切相关[2]。热休克蛋白90(heat shock protein 90，HSP90)是一类结构保守、功能广泛的蛋白质[3]，其与应激性溃疡关系的研究较少。本研究通过分析重症脑出血病人血清HSP70、HSP90表达情况及其与应激性溃疡的关系，探讨血清HSP70、HSP90水平对重症脑出血病人发生应激性溃疡的诊断价值，以期为重症脑出血病人发生应激性溃疡的判断提供理论基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年9月—2018年6月收治的141例重症脑出血病人作为病例组，根据是否发生应激性溃疡分为应激性溃疡组与非应激性溃疡组。应激性溃疡组58例，男27例，女31例；年龄45～74(61.38±9.27)岁。纳入标准：符合重症脑出血诊断标准[4]；符合应激性溃疡诊断标准[5]。排除标准：急性糜烂性胃炎、消化性胃炎、食管静脉曲张破裂出血、肝硬化病人；合并肺、肾等多器官病变病人。非应激性溃疡组83例，男42例，女41例；年龄44～78(63.29±8.77)岁。另选取同期体检健康者60名作为对照组，其中男38名，女22名；年龄45～77(62.49±9.06)岁。3组性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 样本采集 病例组于入院24 h内、体检健康者于晨起空腹抽取静脉血5 mL，-4 ℃、3 000 r/min离心20 min，取上清液，贴标签，保存于-80 ℃冰箱中待用，避免反复冻融。

1.2.2 血清HSP70、HSP90水平及Hb、HCT、转铁蛋白(transferrin，TRF)水平检测 采用酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测血清HSP70、HSP90、TRF水平，试剂盒分别为HSP70试剂盒(上海基免生物科技有限公司)、HSP90检测试剂盒(镇江博研生物科技有限公司)、TRF测定试剂盒(武汉中太生物技术有限公司)，严格按照操作说明书进行。并进行血常规Hb、HCT水平检测。

2 结 果

2.1 3组HSP70、HSP90水平比较 3组HSP70、HSP90水平比较差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组相比，非应激性溃疡组HSP70降低(P<0.05)，HSP90差异无统计学意义(P>0.05)。应激性溃疡组HSP70、HSP90水平较对照组与非应激性溃疡组升高(P<0.05)。详见表1。

表1 3组HSP70、HSP90水平比较 (±s)

P<0.05。

2.2 3组应激性溃疡检测指标比较 3组Hb、HCT、TRF水平比较差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组相比，非应激性溃疡组Hb水平显著升高(P<0.05)，HCT、TRF水平差异无统计学意义(P>0.05)；应激性溃疡组Hb、HCT水平降低(P<0.05)，TRF水平升高(P<0.05)；与非应激性溃疡组比较，应激性溃疡组Hb、HCT水平降低(P<0.05)，TRF水平升高(P<0.05)。详见表2。

表2 3组Hb、HCT、TRF水平比较 (±s)

2.3 HSP70、HSP90水平与应激性溃疡指标的相关性 Pearson相关分析显示，血清HSP70水平与Hb、HCT水平呈负相关(P<0.05)，与TRF水平呈正相关(P<0.05)。HSP90水平与Hb、HCT水平呈负相关(P<0.05)，与TRF水平呈正相关(P<0.05)。详见表3。

表3 HSP70、HSP90水平与应激性溃疡指标的相关性分析

2.4 HSP70、HSP90水平对重症脑出血病人应激性溃疡的预测作用 ROC曲线显示，HSP70水平预测重症脑出血病人应激性溃疡曲线下面积为0.876，截断值为2.00 ng/mL，敏感度为82.8%，特异性为94.0%。HSP90水平预测重症脑出血病人应激性溃疡的曲线下面积为0.800，截断值为131.43pg/mL，敏感度为75.9%，特异性为88.0%。详见图1。

图1 HSP70、HSP90水平对应激性溃疡诊断作用的ROC曲线

2.5 Logistic回归分析影响重症脑出血病人应激性溃疡发生的因素 多因素Logistic回归分析显示，Hb、HCT、TRF水平是病人发生应激性溃疡的无关因素，高水平HSP70、HSP90是影响重症脑出血病人发生应激性溃疡的危险因素。详见表4。

表4 多因素Logistic回归分析

3 讨 论

应激性溃疡是泛指休克、创伤、手术后或严重全身性感染时发生的急性胃炎，是一种急性胃黏膜病变，是重症脑出血病人严重并发症之一[6]。随着重症监护的加强、抗感染药物的更新，提高了重症脑出血病人的生存率，应激性溃疡的发病率随之升高。目前，有关脑出血合并应激性溃疡的发病机制已有较多研究，但发病机制尚未完全明确。有研究表明脑出血诱导的一系列神经体液变化打破了胃黏膜稳态，致使胃局部出现出血[7]。

HSP70是重要的应激蛋白，几乎在所有生物应激细胞中高水平表达，热应激、氧自由基、缺血缺氧、严重创伤均可诱导HSP70产生[8-9]。Leu等[10]研究表明，应激性溃疡病人外周血细胞中HSP70 mRNA水平、HSP70蛋白阳性率表达显著高于非应激性溃疡病人及对照组。本研究表明，应激性溃疡病人胃黏膜上皮细胞HSP70 mRNA表达显著升高，可减少胃黏膜细胞的损伤，进而保护胃黏膜，并推测应激状态下胃黏膜HSP70增加的可能机制为：各种因素刺激下胃黏膜细胞蛋白质构型改变，激发细胞应激反应，激活并编码HSP70，HSP70可促进细胞内蛋白质合成、折叠，减少对黏膜细胞的损伤，从而保护胃黏膜[11]。有研究显示，HSP70家族可以修复损伤的前核糖体、防止溶酶体破坏、稳定细胞膜，从而维持细胞正常的形态和功能，对抗有害因素[12]。本研究中，重症脑出血病人合并应激性溃疡病人血清HSP70水平高于非应激性溃疡病人及体检健康者，推测HSP70在重症脑出血病人应激性溃疡发生过程中起一定作用。临床表明应激性溃疡病人血常规检查中Hb、HCT下降，便隐血呈阳性，TRF不受饮食、药物等因素影响，敏感度高，微量出血即可检出[13]。本研究中应激性溃疡病人Hb、HCT水平低于非应激性溃疡病人及体检健康者，TRF水平则高于非应激性溃疡病人及体检健康者。同时Pearson相关性分析显示，HSP70水平与Hb、HCT水平呈负相关，与TRF水平呈正相关，进一步表明HSP70与应激性溃疡的发生密切相关。HSP70预测重症脑出血病人应激性溃疡发生的曲线下面积为0.876，特异性、敏感度高，可作为重症脑出血病人发生应激性溃疡的诊断指标，截断值为2.00 ng/mL，表明当血清浓度HSP70高于2.00 ng/mL时，重症脑出血病人发生应激性溃疡的风险高。多因素Logistic回归分析显示，HSP70水平是重症脑出血病人并发应激性溃疡的影响因素，提示重症脑出血病人血清HSP70水平高则发生应激性溃疡的风险高，推测可通过检测血清HSP70水平评估病人发生应激性溃疡的风险，以便及时采取治疗。

HSP90是一类结构保守、功能广泛的蛋白质，目前认为其基本功能为分子伴侣功能[14]，通过帮助氨基酸链折叠成正确的三维结构，清除受损而无法正确折叠的氨基酸链，护送蛋白分子寻找目标分子以免受到其他分子的干扰发挥作用。在受到各种刺激诱导时，HSP90表达增加，以抵制外界刺激对细胞的损伤。HSP90与苏氨酸蛋白激酶及上游的3-磷脂酰肌醇依赖性蛋白1激酶相结合，在抗细胞凋亡作用中扮演重要角色[15-17]。有研究表明，HSP90蛋白在心血管系统应激反应时发挥保护性作用[18]。本研究中，应激性溃疡病人血清HSP90水平高于非应激性溃疡病人，推测HSP90可能在应激性溃疡中发挥重要作用。本研究发现HSP90水平与Hb、HCT水平呈负相关，与TRF呈正相关，进一步表明HSP90与重症脑出血病人应激性溃疡的发生密切相关。HSP90预测重症脑出血病人应激性溃疡发生的曲线下面积为0.800，截断值为131.43 pg/mL，表明当血清浓度HSP90高于131.43 pg/mL时，重症脑出血病人发生应激性溃疡的风险高。多因素Logistic回归分析显示，HSP90是重症脑出血病人合并应激性溃疡的影响因素，因此，重症脑出血病人血清HSP90水平高，则发生应激性溃疡的风险高，应对这些病人进行适当干预，加强监测，以改善病人病情。

综上所述，重症脑出血合并应激性溃疡病人血清HSP70、HSP90水平升高，检测血清HSP70、HSP90水平对早期诊断重症脑出血病人发生应激性溃疡具有一定价值。