门冬氨酸洛美沙星葡萄糖注射液处方工艺优化

龙宪军，仇 萍，刘 艳，陈迪钊，彭祖仁，杨雪纯，庞思远

(1 湖南正清制药集团股份有限公司，湖南 怀化 418005；2 怀化学院，湖南 怀化 418000)

洛美沙星(Lomefloxacin)是第三代喹诺酮类抗菌药物[1]，对绿脓杆菌的革兰氏阴性菌及阳性菌有广谱抗菌作用，广泛应用于敏感细菌引起的呼吸道、泌尿生殖系统、腹腔、胆道、肠道、皮肤软组织感染以及鼻窦炎等治疗，临床常用其盐类。门冬氨酸洛美沙星(Lomefloxacin Aspartate)是有机酸盐，相对常见的无机酸盐如盐酸洛美沙星[2-5]，对人体的刺激性更小，患者的耐受性更好。但是，门冬氨酸洛美沙星葡萄糖水溶液不稳定，有关物质、含量项目检测异常，贮藏过程有沉淀析出，影响了产品质量和疗效。因此，本文对门冬氨酸洛美沙星葡萄糖大容量注射剂制备工艺进行研究，筛选出最优处方和工艺，提高制剂的稳定性，为科学生产提供依据。

1 仪器与试药

液相色谱仪，岛津仪器(苏州)有限公司；乙腈(批号20070301)，郑州市国达仪器设备有限公司；磷酸二氢钾(批号020050310)，天津市科密欧化学试剂开发中心；磷酸(批号20030801)，长沙市分路口塑料化工厂；四丁基溴化铵(批号2030317)，天津市科密欧化学试剂开发中心；洛美沙星对照品(批号0452-200001)，中国药品生物制品检定所；门冬氨酸洛美沙星(编号Y-704003)，郑州永和制药有限公司；无水葡萄糖(编号Y-702001)，河北圣雪葡萄糖有限责任公司；亚硫酸氢钠(编号Y-702009)，湖南尔康制药有限公司。

2 方法与结果

2.1 制备工艺

取配制全量3/5的注射用水，加入处方量的葡萄糖和亚硫酸氢钠[6]，搅拌使溶解(活性炭先加法：加入活性炭过滤)；加入处方量的门冬氨酸洛美沙星(活性炭后加法：加入活性炭过滤)；再加入注射用水使成全量。0.45 μm和0.22 μm的滤芯过滤，检测含量、检查可见异物，合格后灌装，灭菌，灯检，包装。

2.2 高效液相色谱法含量测定

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钾6.7 g，磷酸2.8 mL，加水稀释至1000 mL)-0.05 mol/L四丁基溴化铵溶液(乙腈∶磷酸盐缓冲液∶四丁基溴化铵溶液=15∶85∶4)为流动相；检测波长为288 nm；理论塔板数按门冬氨酸洛美沙星计算，应不低于1500。门冬氨酸洛美沙星峰与各杂质峰的分离度应符合要求。

测定法：取洛美沙星对照品适量，加流动相溶解并稀释成每1 mL中约含洛美沙星0.4 mg的溶液，摇匀；精密量取5 mL置25 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取20 μL注入色谱仪，记录色谱图。另取样品2.0 mL，置于25 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，同法测定，按外标法以峰面积计算。

系统适用性实验：取洛美沙星对照品19.24 mg，置100 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀；精密量取5 mL，置25 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为对照品溶液。进样20 μL，测定，结果显示洛美沙星峰理论塔板数大于1500，主峰与其它杂质峰的分离度符合要求。

阴性干扰实验：按制备工艺方法不加门冬氨酸洛美沙星制得阴性对照品；按上述色谱条件，将对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品各进样20 μL，测定，结果表明样品中其他组分对门冬氨酸洛美沙星含量测定无干扰。

线性关系考察：精密称取洛美沙星对照品10.17 mg，置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀；精密量取5 mL置25 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。分别精密量取贮备液1 mL、2 mL、4 mL、6 mL、8 mL、10 mL，置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，制成浓度为0.4068 mg/mL、0.8136 mg/mL、1.6272 mg/mL、2.4408 mg/mL、3.2544 mg/mL和4.0680 mg/mL的溶液，进样20 μL，以对照品溶液浓度(X，mg/mL)对峰面积(Y)进行线性回归，线性回归方程：y=4.8364×106x+4.2445×105，r=0.9998)。结果表明，洛美沙星浓度在0.4～4.0 mg/mL范围内与峰面积有良好的线性关系。

精密度实验：取样品，照供试品溶液的制备方法制成供试品溶液。重复进样6次，结果6次的供试品峰面积的RSD为0.42%，表明仪器精密度较好。

重现性实验：取同一批样品，照供试品溶液的制备方法平行制备5份溶液，分别进样，测定。结果5份平行样含量RSD为0.52%，说明方法重现性较好。

稳定性实验：取同一供试品溶液，分别在0、2、4、6、8 h时测定。结果5次进样峰面积RSD为0.44%，表明供试品溶液在8 h内稳定。

回收实验：精密量取上述阴性对照液9份各100 mL，分别加入对照品制成已知含量的样品，照供试品溶液的制备方法制成供试品溶液测定。计算含量、回收率和RSD，结果见表1。

表1 回收实验结果

2.3 正交筛选与处方工艺优化

根椐门冬氨酸洛美沙星的性质和预实验结果，以门冬氨酸洛美沙星的含量和有关物质为考察指标，设立3个考察因素，每个因素3个水平(表2)。在满足自由度f试≤f表条件下，选择正交表L9(34)安排实验(表3)。实验按2.1项下方法生产，测量定样品含量和有关物质，考察3个因素对考察指标的影响。实验结果见表3，方差分析见表4。

表2 因素水平表

表3 正交实验设计与结果

表4 方差分析表

由表4可见影响含量的主要因素是B，最佳水平是B1，A、C对其影响不大，可任取一水平；影响可见异物的主要因素是C，其次是A，较佳工艺条件是C1A2，B对其影响不大，可任取一水平。综合两个考察指标没有冲突，最终确定最佳处方工艺是A2B1C1，即以0.01%亚硫酸氢钠作为稳定剂，配制时0.1%活性炭先加，采用115 ℃，30 min灭菌，灭菌后快速冷却至70 ℃以下。

3 结 论

活性炭对门冬氨酸洛美沙星有很强的吸附作用，致使含量降低。一般做法是采用加大投料量来保证含量合格，但成本较高。本文采用在门冬氨酸洛美沙星投料前先加活性炭过滤，经过实践效果较好，既保证了药液的吸附效果，又避免对主药造成影响，但此法不适用于主药投料量较大的情况。

亚硫酸氢钠对处方有稳定作用，而且0.01%作用明显强于0.05%。添加时温度不宜过高，保持约60 ℃即可，否则亚硫酸氢钠受热会分解，逸出SO2同时使处方不稳定。