基于TH1/TH2 细胞因子网络调控探讨补肺活血胶囊对II 期尘肺病干预作用研究＊

陈怡文，龚享文，刘典英

（1.江西省赣州市第三人民医院,赣州 341000；2.江西省赣州市第五人民医院,赣州 341000）

尘肺病是指长期在职业活动中吸入生产性尘粉且潴留在肺内而导致肺部发生进行性纤维化为主的全身性疾病，该病一旦发生呈进行性发展，随着病情的发展，各种并发症也逐渐增加，且各种并发症与尘肺可相互促进，对患者的生命健康造成严重的威胁，甚者可导致患者死亡[1,2]。因此，需及时有效的防治措施，以缓解患者的临床症状，提高患者的生命质量。 但临床并无治疗尘肺的特效药物，常采用药物治疗、肺灌洗治疗及对症治疗等，但均具有一定的局限性，不利于临床的推广应用，故采取何种有效的治疗措施是临床研究的重点课题之一。 随着中医药的不断发展，中医药治疗尘肺主要集中在中药单一成分或单味中药、 复方制剂及自拟处方的研究，且取得了不错的进展。 基于此，本研究以60 例II 期尘肺病患者为研究对象，观察了基于TH1/TH2 细胞因子网络调控探讨补肺活血胶囊对II 期尘肺病干预作用研究， 以期为临床提供借鉴。

1 资料与方法

1.1 临床资料 以 2018 年 4 月-2018 年 4 月于我院医院诊治的60 例II 期尘肺病患者为研究对象，随机将其分为研究组和对照组各30 例，所有患者均住院治疗。研究组：男22 例，女8 例；年龄为33-75 岁，平均年龄为（54.83±9.21）岁。 对照组：男 23例，女 7 例，年龄为 32-76 岁，平均年龄为（55.03±9.87）岁。两组患者一般资料比较P>0.05，具有可比性。 本研究方案经我院医学伦理委员会审核批准。

纳入标准：所有患者均符合尘肺病诊断标准，且均为II 期尘肺者； 所有患者及其家属均自愿参与研究并签署知情同意书。 排除标准：对本研究所用药物药物过敏者；伴有造血系统、肝及肾等严重原发病； 治疗前一周内使用过影响血小板功能药物者；尘肺病患者合并严重的并发症；经检查证实由肿瘤、结核、真菌等因素所致的咳喘；合并精神病；合并其他慢性消耗性疾病。 剔除标准：入选后无任何实验数据者；入选后没用使用试验药物者；盲态审核后不符合方案要求者。

1.3 治疗方法 对照组： 给予基础治疗包括止咳、抗感染、化痰等。 研究组：在基础治疗的同时给予补肺活血胶囊治疗（生产企业：广东雷允上药业有限公司， 国药准字：Z20030063）,3 粒/次，3 次/d，连续治疗6 个月。

1.4 观察指标 统计治疗前及治疗6 个月后两组患者肺功能、免疫功能（CD4＋、CD8＋；CD4＋/CD8＋）、TH1/TH2 细胞因子及生命质量的变化情况。

肺功能： 肺功能检测选用德国耶格大型肺功能仪进行以下肺功能监测： 实测值/预测值%[最大通气量（MVV）、一氧化碳弥散(DLco)、第一秒时间肺活量（FEV1）、用力肺活量(FVC)、第一秒时间肺活量/用力肺活量(FEV1/FVC)、最大用力呼气峰流量(PEF)]。

免疫功能及TH1/TH2 细胞因子: 分别在治疗前后抽取所用患者空腹8h 以上静脉血3-5ml，离心后将其置于-20°C 冻存。采用酶联免疫吸附法对TH1/TH2 平衡的细胞因子网络进行测定 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、 IL-10 的含量； 采用 CD3+、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋均采用流式细胞仪监测，上述所有试剂盒均由上海朗顿生物技术有限公司提供，需严格按试剂盒说明书检测。

生命质量：采用国际通用的ST. George's 呼吸问卷表[3]对生命质量进行评估，该量表共包括呼吸症状、活动受限及疾病影响等三个能区，得分范围为0-100 分，得分越高表示患者生命质量越差，反之则相反。

1.5 统计学方法 本研究所有数据均应用SPSS21.0 软件分析。 以()表示肺功能、计量资料，免疫功能及TH1/TH2 细胞因子等各组数据整体比较采用重复测量方差分析， 组间及组内数据的两两比较采用t 检验；以率（%）表示计数资料，采用卡方χ2检验进行比较。 以P<0.05 为差异显著。

2 结果

2.1 两组治疗前后肺功能比较 治疗前，2 组FVC、FEV1、FEV1/FVC、PEF、MVV 及 DLco 相比 P＞0.05;治疗后，2 组 FVC、FEV1、FEV1/FVC、PEF、MVV 及DLco 均较治疗前有所改善， 其中研究组FVC、FEV1、FEV1/FVC、PEF、MVV 及 DLco 均高于对照组（P＜0.05）。 见表 1。

2.2 两组免疫功能比较 治疗前， 两组患者CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD4＋/CD8＋相比 P＞0.05；治疗后，两组患者 CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD4＋/CD8＋均有所改善，其中研究组 CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD4＋/CD8＋均优于对照组（P＜0.05）。 见表 2。

2.3 两组TH1/TH2 细胞因子比较 治疗前，两组患者 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、 IL-10 相比 P＞0.05；治疗后， 两组患者 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、 IL-10 均有所改善， 其中研究组 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、 IL-10 均优于对照组（P＜0.05）。 见表 3。

2.4 两组生命质量比较 治疗前，两组患者生命质量相比P＞0.05；治疗后，两组患者生命质量均有所改善,其中研究组生命质量均优于对照组(P＜0.05)。见表4。

3 讨论

II 期尘肺病是我国最严重的职业病之一，被称为“中国头号职业病杀手”，该病发病率极高，极难治愈，其主要临床症状为咳嗽、咳痰、胸痛及呼吸困难，对呼吸系统造成严重的危险，可累及消化系统， 对患者的身体健康及生命质量造成严重的影响[4]。 该病发病机制较为复杂，尘粒引发肺部病变而引发尘肺，其病理过程极为复杂，涉及多种细胞和生物活性物质，其中以免疫反应、细胞和组织的结构损伤与修复等表现反应出来， 是多种因素相互作用及制约的结果，多呈进行性反应。 面对当前尘肺病的流行现状，对其防治已刻不容缓，但时至今日，尘肺病的治疗仍无特效的治疗方法和药物，对其理想的治疗方案正在孜孜以求地寻找之中，因此， 积极对尘肺病的有效治疗方案及机理探索就显得非常迫切、意义重大。

表1 两组治疗前后肺功能比较（）

表1 两组治疗前后肺功能比较（）

注：t 值、P 值为治疗前后 2 组间相比；t 值 #、P 值 # 为治疗前 2 组相比；t 值 *、P 值 * 为治疗后 2 组相比

组别（n） 时间 FVC(%) FEV1(%) PEF(L/min) FEV1/FVC(%)研究组（30） 治疗前治疗后t 值P 值对照组（30） 治疗前治疗后t 值P 值t 值#P 值#t 值*P 值*56.87±3.54 66.17±0.29-14.341＜0.001 56.82±0.51 59.36±0.82-14.407＜0.001 0.077 0.939 42.885＜0.001 58.74±8.73 67.89±9.73-3.834＜0.001 58.92±9.01 60.98±8.73-0.899 0.372-0.079 0.937 2.895 0.005 2.85±0.46 5.31±0.82-14.331＜0.001 2.92±0.55 6.96±1.11-17.863＜0.001-0.535 0.595-6.549＜0.001 55.78±3.81 69.98±5.01-12.357＜0.001 55.63±3.52 61.71±5.45-5.133＜0.001 0.158 0.875 6.097＜0.001 MVV(%)60.34±1.89 70.08±2.39-17.508＜0.001 60.42±2.01 64.39±2.76-6.369＜0.001-0.159 0.874 8.536＜0.001 DLco（%）52.08±9.87 66.87±7.65-6.487＜0.001 52.36±9.76 59.87±7.10-3.423＜0.001-0.110 0.913 3.695＜0.001

表2 两组患者免疫功能比较（）

表2 两组患者免疫功能比较（）

注：t 值、P 值为治疗前后 2 组间相比；t 值 #、P 值 # 为治疗前 2 组相比；t 值 *、P 值 * 为治疗后 2 组相比

组别 时间 CD3＋（%） CD4＋（%） CD8＋（%） CD4＋/CD8＋研究组（n=30）t 值P 值对照组（n=30）t 值P 值t 值#P 值#t 值*P 值*治疗前治疗后治疗前治疗后63.82±8.72 60.93±0.42 1.813 0.075 63.63±5.52 59.87±3.48 3.156 0.003 0.101 0.920 1.656 3.156 35.01±1.76 31.87±3.17 4.743＜0.001 34.94±2.76 30.76±3.92 4.776＜0.001 0.117 0.907 1.206 4.776 28.96±2.18 27.01±2.17 3.472 0.001 28.86±0.62 28.09±2.64 1.555 0.125 0.242 0.810-1.731 1.555 1.26±0.27 1.02±0.02 4.855＜0.001 1.30±0.25 1.16±0.04 3.029 0.005-0.595 0.554-17.146 3.029

表3 两组患者TH1/TH2细胞因子比较(，pg/ml)

表3 两组患者TH1/TH2细胞因子比较(，pg/ml)

注：t 值、P 值为治疗前后 2 组间相比；t 值 #、P 值 # 为治疗前 2 组相比；t 值 *、P 值 * 为治疗后 2 组相比

组别 时间 IL-1β IL-8 IFN-γ IL-10研究组（n=30） 治疗前治疗后t 值P 值对照组（n=30） 治疗前治疗后t 值P 值t 值#P 值#t 值*P 值*1198.87±132.09 1138.76±89.74 2.062 0.044 1197.98±131.08 1178.98±90.98 0.652 0.517 0.026 0.979-1.724 0.090 1721.87±93.29 1021.81±76.93 31.711＜0.001 1718.93±76.45 1342.87±65.38 20.492＜0.001 0.134＜0.001-17.418＜0.001 899.08±28.76 602.83±23.21 43.905＜0.001 891.73±27.69 801.83±19.87 14.448＜0.001 1.008 0.318-35.674＜0.001 728.76±88.73 519.87±89.83 9.062＜0.001 725.48±83.87 549.08±77.98 8.437＜0.001 0.147 0.884-1.207 0.232

表4 两组生命质量比较(，分)

表4 两组生命质量比较(，分)

注：t 值、P 值为治疗前后 2 组间相比；t 值 #、P 值 # 为治疗前 2 组相比；t 值 *、P 值 * 为治疗后 2 组相比

组别 时间 呼吸症状 活动受限 疾病影响 总分研究组（n=30）t 值P 值对照组（n=30）t 值P 值t 值#P 值#t 值*P 值*治疗前治疗后治疗前治疗后12.38±1.38 22.83±2.01-23.476＜0.001 12.42±1.65 15.49±1.98-6.524＜0.001-0.102 0.919 14.249＜0.001 17.84±1.54 23.37±2.08-11.703＜0.001 17.91±1.62 19.83±2.11-3.953＜0.001-0.172 0.864 6.544＜0.001 18.94±1.63 28.93±2.36-19.41＜0.001 18.87±1.73 22.39±2.26-6.774＜0.001 0.161 0.873 10.963＜0.001 49.16±4.55 75.13±6.45-18.021＜0.001 49.20±5.00 57.71±6.35-5.767＜0.001-0.032 0.975 10.541＜0.001

中医将尘肺列为“肺痹”、“肺痿”的范畴，其主要病因病机为外感金石燥毒侵入人体后， 损伤肺络，肺失宣降，肺司呼吸功能受损，出现胸闷气短，主气功能失常则气机阻滞，气阻日久，血脉瘀滞，肺通调水道功能失常，则水湿停聚成痰，痰阻更加重了气滞血瘀，燥邪最易伤津耗气，日久必然气阴亏虚，脾助肺通调水道，肾助肺主气司呼吸，肺病日久，必损伤脾肾，肺脾肾三脏俱损，则先后天俱损，无以化生气血，反过来又加重了气阴亏虚，水停气滞血瘀之证，阴虚日久伤及肾阳，终至肾阴肾阳具虚，后期肾不纳气则喘息，呼吸困难，气阴亏虚，瘀血阻络贯穿始终[6]。 故治则为益气活血，补肺固肾。 田立岩等[7]研究表明，采用补肺活血胶囊治疗尘肺病，可有效改善患者的肺功能；孙世超[8]等研究表明， 补肺活血胶囊联合穴位天灸治疗痰瘀阻肺型矽肺Ⅰ期有其独特优势, 可改善患者胸闷、喘息、咳嗽、咳痰等临床症状,减少半年内感冒次数,通过内外同治调和经络气血,提高抵御外邪能力,治疗效果明显,降低毒副作用。 本研究结果提示，治疗后，2 组 FVC、FVC1、FEV1/FVC、PEF、MVV及DLco 均较治疗前有所改善， 其中研究组FVC、FVC1、FEV1/FVC、PEF、MVV 及 DLco 均高于对照组（P＜0.05），提示补肺活血胶囊可有效改善 II 期尘肺病患者的肺功能， 这可能是由于补肺活血胶囊中黄芪具有补气升阳、益卫固表之功效[9]；赤芍具有活血化瘀，凉血止血，清热解毒，柔肝止痛之功效[10]；补骨脂具有补肾助阳、纳气平喘之功效，诸药合用共达益气活血，补肺固肾之功效[11]。

当肺部发生免疫反应或炎症时， 为控制和增强肺部反应能力肺巨噬细胞会释放多种介质[12]。肺巨噬细胞可间接或直接的发挥调节T 辅助淋巴细胞(Th)淋巴亚群(Th1，Th2)的增殖分化[13]，这一过程主要通过多种细胞介质的异常释放，从而增强ThZ细胞的免疫调节能力,促使B 淋巴细胞和ThZ 细胞激活， 以促使B 细胞增殖分化成熟为抗体分泌浆细胞，且可对Thl 细胞的免疫调节功能起到仰制作用。Th 细胞根据其所分泌的细胞因子主要分为Thl和Th2 两个亚群。 Thl 细胞分泌的细胞因子包括IL-2、IFN-γ 等,ThZ 细胞分泌的细胞因子包括 IL-13、IL-10、IL-4 等, 两类细胞主要通过产生的细胞因子相互调节和制约, 从而维持其在体内的平衡。Tc 细胞也相应的分为Tcl 和Tc2。 有研究发现Thl/Th2 失衡存在于小鼠矽肺模型[14]。 Thl/Th2 失衡存在于多种呼吸系统疾病中， 但其是否也存在于尘肺病中，在尘肺病中起到何种作用机理，是否能够成为药物的作用靶点以及作用的途径， 有待于进一步研究。 本研究结果显示，治疗后，两组患者IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、IL-10 均有所改善， 其中研究组 IL-1β、IL-8、IFN-γ、IL-6、IL-10 均优于对照组（P＜0.05），提示补肺活血胶囊可有效改善 II 期尘肺病患者TH1/TH2 细胞因子水平， 但其具体机制尚不清楚，需后期进一步探索。

II 期尘肺患者在大量吸收生产性粉尘的过程中会引发肺部持续炎症， 进而发展成为弥漫性肺纤维化，在粉尘介导的慢性炎症及纤维化过程中T淋巴细胞、 中性粒细胞及上皮细胞等均可充分发挥重要作用[15]。CD3+T 细胞为成熟的 T 细胞；CD4+T细胞是辅助性T 淋巴细胞,其具有增强吞噬细胞介导的抗感染作用， 可对B 细胞介导的体液免疫应答具有增强作用；CD8+T 细胞是抑制/杀伤性T 淋巴细胞，具有特异性直接杀伤靶细胞的作用。 本研究结果提示，治疗后，两组患者 CD3＋、CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋均有所改善， 其中研究组 CD3＋、CD4＋、CD8＋及 CD4＋/CD8＋均优于对照组（P＜0.05），提示补肺活血胶囊可有效改善II 期尘肺病患者免疫功能。 时婵等研究[16]表明，补肺活血胶囊能够改善尘肺合并COPD 患者的肺功能以及生命质量。 本研究结果提示，治疗后，两组患者生命质量均有所改善，其中研究组生命质量均优于对照组（P＜0.05），提示补肺活血胶囊可有效提高II 期尘肺病患者的生命质量。

综上所述， 补肺活血胶囊可有效改善II 期尘肺病患者的肺功能，同时可改善患者的免疫功能，可调节TH1/TH2 细胞因子水平， 且可提高生命质量，值得临床推广。 但由于本研究所纳入样本量较少， 且为对补肺活血胶囊改善II 期尘肺病患者TH1/TH2 细胞因子水平的具体机制尚不清楚，需后期进一步探索。