云南楚雄地区急性脑梗死患者CYP2C19基因多态性

李文武，吕秀娟

（大理大学第四附属医院神经内一科，云南楚雄 675000）

氯吡格雷能有效地预防动脉粥样硬化患者发生缺血性脑血管事件，是缺血性脑血管病二级预防的重要药物之一。目前研究发现，氯吡格雷抗血小板药效存在个体差异，部分患者经过标准的氯吡格雷治疗后，仍不能避免缺血性脑血管病事件的发生，实验室检测提示血小板聚集功能并未得到有效抑制，称之为氯吡格雷抵抗〔1〕。目前研究认为CYP450同工酶家族中的关键酶CYP2C19参与了氯吡格雷代谢，其基因多态性是决定氯吡格雷抵抗的重要因素〔2〕。现已知CYP2C19等位基因超过25个（*1～*25）呈高度多态性，其中CYP2C19*1，c.681 G＞A和*1，c.636 G＞A为编码正常活性酶的等位基因；CYP2C19*2，c.681 G＞A和CYP2C19*3，c.636 G＞A为功能缺失等位基因；CYP2C19*17，c.-806 C＞T为增强酶活性的等位基因〔3-4〕。研究发现CYP2C19*1、*2、*3等位基因为亚洲人群最常见的突变点〔5〕。经相关文献检索，云南楚雄地区急性脑梗死患者CYP2C19基因多态性未见报道，因此本文对云南楚雄地区急性脑梗死患者采用PCR方法检测CYP2C19*1，CYP2C19*2，CYP2C19*3基因多态性，探讨云南楚雄地区急性脑梗死患者CYP2C19基因多态性分布，为临床上氯吡格雷个体化用药提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料所有病例为2017年3月至2019年3月大理大学第四附属医院神经内一科收治的楚雄地区急性脑梗死患者，共251例，年龄18～75岁，平均年龄（56±2.8）岁；男性157例，女性94例，所有患者均符合中华医学会神经病学分会等制定的中国急性缺血性脑卒中诊治指南中的诊断标准〔6〕。

1.2方法

1.2.1 标本采集 用乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）抗凝采血管抽取患者空腹静脉血3 mL用于基因分型。

1.2.2 DNA提取 按照DNA提取试剂盒（上海凡济生物科技有限公司）说明书提取患者DNA。

1.2.3 基因分析CYP2C19基因位点检测采用美国Life Tech公司Taqman探针检测试剂盒进行分型检测，检测流程参照试剂盒说明书提示进行检测；在美国Life Tech生产的ABI 9700 PCR仪上进行PCR反应（试剂盒由美国Life Tech生产），反应流程参照试剂盒说明书提示进行，PCR反应条件：95℃ 10 min；92 ℃ 15 s，60 ℃ 1 min，60个循环；72℃10 min；反应完成后使用美国ABI 9700 HT型荧光定量PCR仪进行数据扫描。

2 结果

2.1结果判断检测结果使用Gene Mapper IDV 4.1自动分析软件进行判读基因，最终获得*1∕*1，*1∕*2，*1∕*3，*2∕*2，*2∕*3，*3∕*3六种基因型。

2.2CYP2C19等位基因、检测位点、基因型检测结果检测结果见图1。CYP2C19*1，c.681 G＞A，GG纯合突变和*1，c.636 G＞A，GG纯合突变；CYP2C19*2，c.681 G＞A，GG纯合突变；CYP2C19*2，c.681 G＞A，GA杂合突变；CYP2C19*3，c.636 G＞A，GG纯合突变；CYP2C19*3，c.636 G＞A，GA杂合突变。

2.3云南楚雄地区急性脑梗死患者CYP2C19检测CYP2C19*1∕*1基因（GG∕GG）为快代谢型，114例（45.42%）；CYP2C19*1∕*2基因（GG∕GA），*1∕*3基因（GG∕GA），*2∕*2基因（AA∕GG）为中间代谢型，分别为95例（37.85%），13例（5.18%），4例（1.59%）；CYP2C19*2∕*3基因（GA∕GA），*3∕*3 基因（GG∕AA）为慢代谢型，分别为23例（9.16%），2例（0.80%）。

3 讨论

脑梗死是目前严重危害人类健康的主要疾病之一，其高发病率、高致残率及高死亡率，给家庭和社会带来严重的经济负担〔7〕。中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018指出，氯吡格雷可作为非心源性缺血性卒中患者二级预防单用或联合用药的选择〔6〕。作为细胞色素P450一种重要的药物代谢酶CYP2C19是影响氯吡格雷在体内代谢活化的关键酶，其基因多态性决定了该酶活性在个体间的差异性，并影响氯吡格雷药物活性产物的浓度及在体内抗血小板聚集作用〔8〕。CYP2C19基因多态性检测指导氯吡格雷用药个体化已成为目前主要研究的热点，因此检测急性脑梗死患者CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3基因来预测药物疗效，选择合适的抗血小板药物及剂量进行个体化治疗是目前发展的重要趋势。笔者对云南楚雄地区251例急性脑梗死患者进行CYP2C19基因多态性检测，其结果为CYP2C19*1∕*1基因为快代谢型，114例（45.42%）；CYP2C19*1∕*2，*1∕*3，*2∕*2基因为中间代谢型，分别为95例（37.85%），13例（5.18%），4例（1.59%）；CYP2Y19*2∕*3，*3∕*3基因为慢代谢型，分别为23例（9.16%），2例（0.80%）。与文献〔9-11〕报道相比稍偏高，与文献〔12-14〕报道相比稍偏低，其可能原因为样本数量偏少、地区差异性、种族基因异质性以及尚未检测的等位基因突变等因素有关，有待于今后进一步研究。

CYP2C19基因多态性影响药物的药代动力学，快代谢型不降低氯吡格雷抗血小板疗效，可常规剂量服用；中间代谢型可使氯吡格雷药效降低，患者在治疗过程中应增加氯吡格雷药物剂量或者改用其他抗血小板药物以达到抑制血小板聚集治疗目的；慢代谢型使药物疗效明显降低或者出现严重的药物不良反应，建议患者改用其他抗血小板药物。因此，云南楚雄地区急性脑梗死快代谢型患者可常规剂量服用氯吡格雷；中间代谢型患者在治疗过程中应增加氯吡格雷药物剂量或者改用其他抗血小板药物；慢代谢型患者存在抗血小板聚集治疗效果不佳而再发脑梗死风险的建议改用其他抗血小板药物。我们研究发现云南楚雄地区急性脑梗死患者CYP2C19基因多态性分布以快代谢型*1∕*1（GG∕GG），中间代谢型*1∕*2（GG∕GA），慢代谢型*2∕*3（GA∕GA）为主，为临床上氯吡格雷个体化用药提供依据。同时也表明CYP2C19等位基因突变可能是云南楚雄地区急性脑梗死患者氯吡格雷抵抗的独立危险因素之一，临床上应引起重视。

综上所述，云南楚雄地区急性脑梗死患者CYP2C19基因多态性分布以快代谢型*1∕*1（GG∕GG），中间代谢型*1∕*2（GG∕GA），慢代谢型*2∕*3（GA∕GA）为主，同时为临床上氯吡格雷个体化用药提供依据。急性脑梗死人群CYP2C19基因多态性的检测为不同基因型人群服用氯吡格雷的安全性以及为实现个体化抗血小板聚集治疗提供基因组学的依据，使氯吡格雷在临床上应用更安全、有效、经济。