前列腺癌组织中PSA、IL-6、IL-8的表达及作用机制分析

佟双喜

(北华大学附属医院，吉林 吉林 132011)

前列腺癌(PCa)是我国男性较为常见的恶性肿瘤之一，目前，PCa的发病率呈逐年递增趋势，严重威胁男性的生命健康[1].由于PCa发病早期的隐匿性极强，绝大多数患者初次就诊就已处于晚期阶段，丧失了最佳的治疗时间，预后不良[2].因此，PCa的早期诊断及针对性治疗显得尤为重要，亦是改善患者预后的重要途径.前列腺特异性抗原(PSA)作为临床上应用最为广泛的PCa特异性标志物之一，在PCa的筛检、诊断及治疗后监测等方面均发挥着作用[3].白细胞介素-6(IL-6)已被证实与多种肿瘤的发生发展相关，其可能通过影响细胞的黏附能力及肿瘤特异性抗原表达水平间接影响肿瘤的进展过程[4].另有研究[5]表明：白细胞介素-8(IL-8)可能和血管新生存在密切相关，可能介导了肿瘤的发生、发展以及转移等过程.因此，本研究通过探讨PCa组织中PSA、IL-6及IL-8的表达及作用机制，旨在为PCa的早期诊断、临床治疗和预后评估提供新的靶点与思路.

1 对象与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月—2019年12月于北华大学附属医院接受诊治的60例PCa患者，另选取60例前列腺增生(BPH)患者作为对照.PCa患者年龄55～77岁，平均(64.92±4.22)岁；受教育时间3～12 a，平均受教育时间(6.12±2.05)a.BPH患者年龄54～78岁，平均(64.88±4.20)岁；受教育时间3～14 a，平均受教育时间(6.20±2.07)a.两组患者一般资料比较差异不显著(P>0.05)，具有可比性.

纳入标准：所有受试者均经病理学检查确诊；入院前未接受抗肿瘤治疗；均为成年男性.

排除标准：合并膀胱结石或(和)泌尿系统感染者；意识障碍或伴有精神疾病者；依从性较差或无法完成相关研究者.所有受试者均知情同意，并通过医院医学伦理委员会批准.

1.2 研究方法

应用免疫组化法(试剂盒，北京博奥森生物技术开发有限公司)检测不同组织中PSA、IL-6及IL-8(兔抗人PSA、IL-6及IL-8多克隆抗体，Abcam公司，英国)的表达，首先将不同标本以10%福尔马林进行固定处理，行石蜡包埋，4 μm厚度连续切片，随后予以脱蜡水化处理，采用PBS重复冲洗，并完成微波修复抗原.滴加氧化酶阻断溶液，37 ℃条件下孵育10 min，重新应用PBS冲洗，且予以山羊血清完成封闭处理.分别滴加一抗，于4 ℃条件下过夜；滴加二抗，于37 ℃条件下孵育15 min；加入生物素-过氧化物酶溶液，于37 ℃条件下孵育15 min；进行DAB(DAB酶底物显色剂，北京博奥森生物技术开发有限公司)显色以及苏木精复染，在中性树胶封片完成后放置在显微镜下进行观察.

1.3 结果判定

采用双盲法对所有组织切片染色结果进行判定.PSA阳性表达为细胞质或(和)细胞核上出现棕黄色颗粒，且以阳性细胞占比作为判定标准，阳性细胞占比<10%为阴性，阳性细胞占比≥10%为阳性.IL-6、IL-8阳性表达为细胞质或(和)包膜出现棕黄色颗粒，且以阳性细胞占比作为判定标准，阳性细胞占比<10%为阴性，阳性细胞占比≥10%为阳性[6].

1.4 观察指标

对比不同组织中PSA、IL-6及IL-8的表达率，分析PCa组织中PSA、IL-6、IL-8与临床病理特征的关系.

1.5 统计学分析

2 结 果

2.1 不同组织中PSA、IL-6及IL-8的表达率

PCa组织中PSA、IL-6及IL-8的表达率均高于BPH组织的表达率(P<0.05).见表1、图1～6.

表1 不同组织中PSA、IL-6及IL-8的表达率

2.2 PCa组织中PSA和临床病理特征的关系

临床分期T3～T4期、低分化、淋巴结转移PCa组织中PSA表达率显著高于临床分期T1～T2期、中高分化、无淋巴结转移组织的表达率(P<0.05).见表2.

表2 PCa组织中PSA和临床病理特征的关系

2.3 PCa组织中IL-6和临床病理特征的关系

临床分期T3～T4期、低分化、淋巴结转移PCa组织中IL-6表达率显著高于临床分期T1～T2期、中高分化、无淋巴结转移组织的表达率(P<0.05).见表3.

表3 PCa组织中IL-6和临床病理特征的关系

2.4 PCa组织中IL-8和临床病理特征的关系

临床分期T3～T4期、低分化、淋巴结转移PCa组织中IL-8表达率显著高于临床分期T1～T2期、中高分化、无淋巴结转移组织的表达率(P<0.05).见表4.

表4 PCa组织中IL-8和临床病理特征的关系

2.5 PCa组织中PSA、IL-6及IL-8相关性分析

经Pearson相关性分析可知：PCa组织中PSA与IL-6、PSA与IL-8、IL-6与IL-8均呈正相关关系(P<0.05).见表5.

表5 PCa组织中PSA、IL-6及IL-8相关性分析

3 讨 论

相关研究[7-9]证实：PCa为欧美等发达国家男性最为多见的癌症之一，是导致男性死亡的重要原因之一，目前，国内PCa的发病率呈逐年升高趋势.PSA是目前国内外公认的PCa特异性标志物之一，在PCa的诊断中具有重要作用[10-12].然而，年龄、前列腺体积、尿潴留以及前列腺炎等因素均会对PSA产生不同程度的影响，从而导致PSA诊断PCa的特异性降低，我们在临床实际工作中难以单纯依靠PSA完成PCa的诊断.由此，寻找其他可有效诊断PCa的生物学指标显得尤为重要.近年来相关研究[13-14]发现：炎症可能介导了肿瘤的发生、发展过程，其中IL-6与IL-8均是临床上较为常见的炎症因子，且均被证实参与了多种肿瘤的发生、发展过程，可能是有效诊断PCa的潜在生物学标志物[15-16].

本研究结果表明：PCa组织中PSA表达率高于BPH组织(均P<0.05)，且临床分期T3～T4期、低分化、淋巴结转移PCa组织中PSA表达率显著高于临床分期T1～T2期、中高分化、无淋巴结转移组织(均P<0.05)，这与既往研究[17]高度一致.PSA在PCa组织中表达异常升高，且和患者的临床分期、分化程度以及淋巴结转移密切相关，PSA属于单链糖蛋白之一，主要在前列腺腺体的腺泡以及相关上皮细胞内合成，在正常的前列腺上皮细胞内，其表达处于相对均匀状态，然而在PCa组织中其表达明显不均匀，因此，PSA可作为PCa诊断的特异性指标.此外，PCa组织中IL-6表达率高于BPH组织，且临床分期T3～T4期、低分化、淋巴结转移的PCa组织中IL-6表达率显著高于临床分期T1～T2期、中高分化、无淋巴结转移组织(均P<0.05)，这与慕玉东等[18]的研究结果相符.IL-6在PCa组织中存在高表达，且和肿瘤侵袭密切相关，IL-6直接作用于磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B信号通路上，进一步发挥调节细胞生长、凋亡的作用，是肿瘤持续生长的基础.另外，PCa组织中IL-8表达率高于BPH组织，且临床分期T3～T4期、低分化、淋巴结转移的PCa组织中IL-8表达率显著高于临床分期T1～T2期、中高分化、无淋巴结转移组织(P<0.05).马寅锐等[19]研究显示：IL-8在PCa组织中表达异常升高，且和患者病情进展以及淋巴结转移密切相关，IL-8主要源自多种细胞的合成及分泌，其存在于CXCR-1、CXCR-2两种细胞膜受体，前者可经由肿瘤和肿瘤血管内皮细胞表面的上述两种受体，不同程度地刺激肿瘤细胞增生及新生血管形成，进一步为肿瘤生长以及转移创造有利条件.另有细胞模型实验[20]亦表明：IL-8在刺激PCa细胞增殖方面效果明显，通过打击IL-8抑制肿瘤进展，IL-8表达的升高会导致MAPK信号通路被活化，从而加剧了IL-8表达的升高，进一步使肿瘤组织对IL-8敏感性增强，继而加快了疾病的进展.经Pearson相关性分析可知：PCa组织中PSA与IL-6、PSA与IL-8、IL-6与IL-8均呈正相关关系，这提示了PSA、IL-6及IL-8可能通过共同作用导致PCa的发生、发展.

综上所述，PCa组织中存在PSA、IL-6以及IL-8的明显高表达，且上述指标表达水平均和PCa患者临床分期、分化程度以及淋巴结转移存在一定相关性，可能成为PCa诊断、治疗及预后评估的有效生物学指标.