MAP2K4、PKG1及ZlC1在子宫内膜癌患者组织中表达及预后价值

闫丽明 杨 敏 王 媛 李 艳

陕西省延安市延安大学附属医院(716000)

子宫内膜癌发病机制尚未完全揭示[1]。发生与患者体内雌激素和雄激素水平密切相关，且与细胞异常增殖及原癌基因异常激活密切相关[2]。丝裂原活化蛋白激酶4(MAP2K4)是人体重要编码MAP激酶基因家族成员，丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)可介导细胞翻译重要信号系统，该信号通路均参与多种细胞的生理过程，包括肿瘤在内的多种疾病均与MAP2K4等激酶组分异常活化密切相关[3]。目前在肿瘤细胞代谢过程中癌基因可促进肿瘤细胞活化、增殖和转移，其中肿瘤细胞获取能量的重要来源为有氧糖酵解，其异常也是肿瘤发生发展的重要特征[4]。有研究指出，PKG1是人体内重要的糖酵解中ATP生成酶，在多种癌中起到十分重要作用[5]。小脑锌指结构蛋白1(ZIC1)与多种肿瘤的发生发展关系密切，在结直肠癌、胃癌等多种恶性肿瘤中扮演重要角色[6]。但目前MAP2K4、PKG1及ZlC1在子宫内膜癌组织中的表达鲜有报道，因而本文对子宫内膜癌组织中MAP2K4、PKG1及ZlC1表达水平及对病情预后的预测价值进行探讨。

1 资料与方法

1.1 研究对象选择

入组标准：①患者均存完整临床病理数据；②入组前均未接受放化疗方案治疗；③保存完整临床资料且预计生存期≥6个月；④患者术后病理诊断结果均经2名5年以上工作经验病理科医师确认；⑤对本研究知情并签署知情同意书。排除标准：①合并严重心肝肾功能异常；②伴自身免疫疾病者；③3个月内服用激素类药物治疗；④临床资料缺失或主动申请退出本研究。

1.2 一般资料

经伦理委员会批准，收集本院2012年1月-2014年1月收治的子宫内膜癌患者112例临床资料作观察组，患者体质量(56.2±4.9)kg(45～66 kg)，年龄(46.4±6.9)岁(32～58岁)；依照国际产妇科联盟手术分期标准Ⅰ期6例、Ⅱ期40例、Ⅲ期57例、Ⅳ期9例；子宫内膜样腺癌89例、透明细胞癌8例、浆液性乳头状腺癌13例、腺鳞癌2例。选择同期103例行手术治疗的子宫良性病变患者为对照组，体质量(57.0±5.1)kg(44～67 kg)，年龄(47.0±7.0)岁(31～59岁)，两组年龄和体质量比较无差异(P>0.05)。

1.3 检测方法

均采用手术治疗，采集手术病灶区组织并使用石蜡包埋做连续切片，采用链霉亲和素-生物素酶复合物法使用免疫组化法检测病灶组织中MAP2K4、PKG1及ZlC1水平，所用试剂盒均购自联科生物科技有限公司，抗体购自南京福麦斯生物科技有限公司。随访5年，记录患者生存情况。

1.4 结果判定

MAP2K4、PKG1及ZlC1蛋白检测阳性表现为细胞胞浆或细胞核内出现总黄色颗粒，使用400倍高倍镜观察阅片，依照阳性细胞数与着色强度乘积记为总得分。无阳性细胞记0分，阳性细胞数<10%记1分、10%～50%记2分、51%～75%记3分，>75%记4分；着色强度评估，未着色记0分，着色呈淡黄色记1分、呈棕黄色记2分、呈棕褐色记3分。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 组织中MAP2K3、PKG1、ZIC1表达

MAP2K3、PKG1及ZIC1表达评分观察组高于对照组(P<0.05)，观察组中死亡患者各水平均高于存活者(P<0.05)，见表1和图1(见封三)。

表1 两组组织中MAP2K3、PKG1及ZIC1水平表达(分，

2.2 MAP2K3、PKG1及ZIC1表达与患者生存期

观察组中，MAP2K3、PKG1及ZIC1低表达患者生存期高于高表达组(P<0.05)，见图2。

图2 不同MAP2K3、PKG1及ZIC1表达水平患者生存期(A：MAP2K3 B：PKG1 C：ZIC1)

2.3 MAP2K3、PKG1及ZIC1水平与预后相关性

MAP2K3、PKG1及ZIC1是影响子宫内膜癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)，见表2。

表2 MAP2K3、PKG1及ZIC1水平与预后相关性

2.4 各指标预测患者预后价值

MAP2K3、PKG1及ZIC1预测患者预后的敏感度(87.2%、84.6%、89.7%)及特异度(86.3%、89.0%、90.4%)均>80.0%，且ROC曲线下面积AUC(0.919、0.930、0.935)均>0.9。

3 讨论

子宫内膜癌是临床较常见的女性恶性肿瘤，属子宫内膜上皮性恶性肿瘤，且呈年轻化趋势[7]。有研究结果显示，子宫内膜癌的临床发病率约占全部女性生殖道恶性肿瘤的20%，我国每年子宫内膜癌的临床新发病例高达5万以上，且每年死亡1.8万人以上，对女性生命健康安全造成严重威胁[8]。一般情况下早期子宫内膜癌患者多无明显症状，确诊后多已发展晚期，如何有效评估患者预后质量具有十分重要意义[9]。

MAP2K4基因在人上皮性肿瘤中呈明显高表达状态，且在乳腺癌及卵巢癌中高表达状态最为明显。有研究指出，MAP2K4蛋白表达对肿瘤的发生发展有一定促进作用，如乳腺癌、皮肤癌、胃癌、前列腺癌、喉鳞状细胞癌、胰腺癌等[10]。PGK1与多种肿瘤的组织学分级呈正相关关系，且在多种肿瘤的发生发展过程中起十分重要作用[11]。高活跃的糖酵解代谢与恶性肿瘤的生存、增殖及侵袭能力密切相关，而PGK1是调节有氧糖酵解的重要蛋白分子，因而评估病灶组织中PGK1水平可有效评估病情[12]。ZIC1蛋白在人体生长发育过程中起到十分重要作用。有研究指出，包括间叶组织肿瘤、成髓细胞瘤、子宫内膜癌及胃肠肿瘤等发生发展过程中均与ZIC1密切相关，ZIC1蛋白表达异常与胃粘膜恶性肿瘤及肝细胞肿瘤的不良预后密切相关[13]。

本组研究结果显示，观察组患者MAP2K3、PKG1及ZIC1表达高于对照组，且死亡患者高于存活患者；均是影响子宫内膜癌患者预后独立影响因素，预测患者预后的敏感度及特异度均>80.0%，且AUC均>0.9。提示，MAP2K3、PKG1及ZIC1异常高表达可提示患者预后不佳。分析认为，肿瘤细胞由于增殖迅速常导致肿瘤细胞处于局部缺氧缺血环境，导致肿瘤细胞调控细胞内激酶及糖酵解等水平异常增高，进而导致MAP2K3、PKG1及ZIC1调控蛋白表达水平异常；随着患者病情加重导致病灶组织内MAP2K3、PKG1及ZIC1异常状态更加明显，因而MAP2K3、PKG1及ZIC1有望作为评估患者预后质量的重要指标。

综上所述，子宫内膜癌患者病灶组织中MAP2K4、PKG1及ZlC1呈现异常高表达状态，可能作为评估患者病情预后指标。但本研究为单中心小样本分析，仍有待后续深入分析验证此结论。