不同采收期亳白芍淀粉含量比较

韩 婷，胡 雨，许凤清，金传山*

(1.安徽中医药大学第一附属医院，安徽 合肥 230031；2.安徽中医药大学 药学院，安徽 合肥 230012)

白芍始载于《神农本草经》，为毛茛科植物芍药(PaeoniaelactifloraPall) 的干燥根，具有平肝止痛、养血调经、敛阴止汗的功效[1]。白芍主产于我国四川、贵州、安徽、山东、浙江等省[2]，据《中国中药区划》一书记载，主产于亳州沿涡河两岸潮沙土一带的芍药称“亳白芍”。 药材中富含以芍药苷、氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、芍药苷等为主的蒎烷型单萜及其苷类化合物，其内在质量的优劣亦是以该类成分含量的多寡为评价依据[3-8]。白芍传统以质坚实、粗肥匀、粉性足者为佳[9-10]。“粉性”作为白芍外观性状，未见相关研究。研究白芍淀粉含量与质量之间的相关性，将在一定程度上揭示白芍“粉性”描述的科学内涵。本文建立了高氯酸水解-蒽酮法测定亳白芍淀粉的含量，并对7月-11月时间段内采收的亳白芍中淀粉含量进行测定。

1 仪器与材料

UV759CRT紫外可见分光光度计(上海佑科仪器仪表有限公司)；Centrifuge 5810R离心机；MiLLi-QAdvantage 超纯水机(美国 MiLLipore 公司)；HL-200A型打粉机(上海塞耐机械有限公司)；淀粉对照品(中国药品生物制品检定所，批号140602-200313)；蒽酮试剂(实验室现配)，乙醇，高氯酸分析纯，水为超纯水。

白芍药材于2015年7月-11月采于安徽亳州市谯城区十九里镇，经安徽中医药大学彭华胜教授鉴定为毛茛科植物芍药P.lactifloraPall.的干燥根。标本存放于安徽中医药大学炮制研究室，标本号为BS2015YP-1～ BS2015YP-10。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液制备

取淀粉对照品适量，精密称定。置于50 mL 烧杯中，加入2.5 mL水和32.5 mL 50 % 高氯酸溶液，搅拌至完全溶解，转移至容量瓶中，加水定容至50 mL。精密吸取上述溶液1 mL，加水定容至50 mL，得到浓度为41.84 μg/mL的淀粉对照品溶液。

2.2 供试品溶液制备[11]

取亳白芍药材粉末0.1 g，精密称定。置于50 mL 离心管中，加入80%乙醇润湿药材粉末，加5 mL水，摇匀；续加80% 乙醇(25 mL)，震荡混匀后，静置5 min，3 000 rpm 离心5 min，倾出上清液。残渣加30 mL 80% 乙醇溶液重复上述操作1次。沉淀中加入17.5 mL的水-50% HClO4(1∶6，v/v)，震荡10 min，静置，以3 000 rpm离心10 min，上清液转移至50 mL容量瓶中；残渣用17.5 mL 50% HClO4溶液按上述操作提取1次。合并两次提取液，加水定容、过滤，弃去5 mL 初滤液。精密吸取2 mL 滤液转移至100 mL 容量瓶中，加水定容，得到供试品溶液。

2.3 最大吸收波长的确定

精密吸取淀粉标准溶液及随机供试品溶液2 mL，分别置于10 mL具塞试管中，加入6 mL 蒽酮-硫酸溶液，摇匀，冰水中冷却3 min，沸水浴5 min，取出，冷却至室温。用2 mL 蒸馏水同法制得空白液，记录紫外-可见分光光度仪400～800 nm波长范围内吸收曲线。结果表明，对照品及供试品溶液在455 nm处均有最大吸收。

2.4 方法学考察

2.4.1 线性关系考察 精密吸取0.4 、0.6 、0.8 、1.0 、1.2、 1.4、1.6 mL 淀粉标准溶液，置于10 mL 洁净具塞试管中，加水调整各试管溶液均为 2.0 mL，按“2.3”项下方法，在455 nm 波长处测定吸光度。以淀粉质量(μg)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，回归得线性方程：y=0.007 8x-0.010 4，r= 0.999 5。结果表明，淀粉在16.736～66.964 μg范围内呈良好的线性关系。

2.4.2 精密度试验 精密吸取淀粉对照品溶液2.0 mL，置于10 mL 洁净具塞试管中，按“2.3”项下方法，在455 nm 波长处测定吸光度，平行5次，RSD=1.49%(n=5)。结果表明仪器精密度良好。

2.4.3 重复性试验 取亳白芍粉末适量，精密称取，按照“2.2”项制备供试品溶液，平行5份。分别取制备的样品溶液2.0 mL，测定沸水浴显色后溶液的吸光度，计算其淀粉含量。测得亳白芍淀粉平均含量为43.35%，RSD=1.79%。结果表明供试品重现性良好。

2.4.4 稳定性试验 取沸水浴显色后的同一样品溶液，分别在0、20 、40、60 、80 、100 min后测定吸光度，记录吸光度值，计算其淀粉含量，其RSD=1.67%。结果表明样品常温放置，100 min内稳定。

2.4.5 加样回收率试验 称取已知淀粉含量的同一样品6份，分别添加适量淀粉对照品，按“2.2”项下制备进行处理并进行含量测定，计算加样回收率，结果见表1。加样回收率在99.10%～102.14%之间，平均回收率为100.33%，符合含量测定的要求。

表1 加样回收率试验结果

2.5 样品测定

按照上述方法，测定样品溶液的吸光度。计算公式：淀粉(%)={M淀粉/[8M样品(1-W水分)]}%，其中M淀粉是由亳白芍样品溶液的吸光度经过线性公式计算出来的质量，单位是μg；M样品为称样量，单位是g；W水分为样品含水量。分别测定不同采收期亳白芍样品中淀粉的质量分数，结果见表2和图1。结果表明亳白芍药材的采收期不同，其淀粉含量相差较大。亳白芍中淀粉的含量在7月下旬至11月上旬之间呈现先升高后降低的趋势，在9月中旬至10月上旬淀粉含量较高且稳定。

表2 不同采收期亳白芍样品淀粉含量测定结果 (n=3)

图1 淀粉含量与采收期关系

3 讨论

研究采用高氯酸水解-蒽酮法对白芍传统的采收时间内，各采收时间点的亳白芍药材中淀粉的含量进行测定，结果表明亳白芍淀粉的含量在7月下旬至11月上旬之间呈现先升高后降低的趋势，在9月中旬至10月上旬淀粉含量较高且稳定，与白芍传统的采收季节多为农历的8月中旬至9月中旬相一致[12]。对亳白芍不同采收期芍药苷与白芍总苷的含量变化考察时亦发现该时间段内亳白芍的有效成分的含量处于相对稳定的状态[13-14]。

传统上白芍以“粉性足、质坚体沉”为优。借鉴《76种药材商品规格标准》，本试验结合药材的外观性状，得出淀粉含量高低与白芍药材的表面粗糙程度，即药材的表面越糙，其粉性小，淀粉含量也低，反之亦然。由此可见白芍药材表面粗糙程度与淀粉含量的高低直接相关。因此，淀粉含量可以作为白芍“辨状论质”或分级的内控指标之一。至于“粉性足”与其药材质量间的科学内涵有待更为深入的探讨。