气相色谱法测定蒲公英中有机磷农药残留

杨秀虾

摘 要：目的：建立毛细管气相色谱法测定蒲公英药材中14种组分残留。方法：采用QuEChERS法作为样品前处理方法，用气相色谱法测定蒲公英药材中14种有机磷农药残留量。结果：14种有机磷农药在各自线性范围内均具有良好的线性关系，相关系数为0.997 7～1.000 0，在低、中、高3个加标水平的平均回收率为65.5%～107.4%，相对标准偏差为1.8%～14.2%（n=4）。结论：该方法快速、准确、操作简单、灵敏度高，可用于蒲公英药材中上述14种有机磷农药残留的快速筛查与定量分析。

关键词：蒲公英;气相色谱法;有机磷农药;QuEChERS

Abstract：Objective： To establish methods for determination of 14 organophosphorus pesticide residues in dandelion by gas chromatography. Methods： QuEChERS was used as sample pretreatment method， and 14 organophosphorus pesticide residues in dandelion were determined by gas chromatography. Results： 14 pesticides tested showed good linear relationships in their respective linear ranges， with correlation coefficients ranging from 0.997 7 to 1.000 0. Average recoveries at low， medium and high spiked levels were 65.5%～107.4%， and relative standard deviations were1.8% ～14.2% （n=4）. Conclusion This method is rapid， accurate， which is easy to be operated with high sensitivity， and can be used for rapid screening and quantitative analysis of above 14 organophosphorus pesticide residues in dandelion.

Key words：Dandelion; Gas chromatography; Organophosphorus pesticide; QuEChERS

蒲公英系菊科植物蒲公英（Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.），碱地蒲公英（Taraxacum sinwum Kitag.）或同属数种植物的干燥全草[1]。蒲公英味苦、甘，性寒，具有清热解毒、消肿散结、舒筋固齿、养阴凉血之功效，是临床上常用的中药。现代研究表明，蒲公英富含多糖、黄酮、多酚等活性物质，具有抗菌消炎、抗氧化、抗病原微生物及抑制肿瘤等药理活性[2]。蒲公英是一种可作为药食两用的多年生草本植物，分布于我国大部分地区。目前对市售蒲公英农药残留量的分析较少。本文采用毛细管气相色谱，火焰光度检测器（FPD），对其中的敌敌畏、甲胺磷、灭线磷、甲拌磷、特丁硫磷等14种有机磷农药残留量進行了检测，为蒲公英的质量控制提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器

GC-2010 Plus气相色谱仪（日本Shimadzu公司），FPD检测器;LD310-2型电子天平（沈阳龙腾电子有限公司）;IKA MS3涡旋混匀器（德国IKA公司）;TG16-WS型高速台式离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）;SPT-24氮空吹扫浓缩仪（北京斯珀特科技有限公司）;Mili-Q超纯水机（美国Millipore公司）等。

1.1.2 试剂

乙腈、丙酮均为色谱纯;氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸氢二钠、硫酸镁均为分析纯;N-丙基乙二胺（PSA）吸附剂、石墨化炭黑（GCB）填料;实验用水为超纯水;农药标准品：敌敌畏、甲胺磷、灭线磷、甲拌磷、特丁硫磷、氯唑磷、乐果、甲基嘧啶磷、毒死蜱、马拉硫磷、杀螟硫磷、甲基异柳磷、水胺硫磷和丙溴磷均购自德国Dr.Ehrenstorfer公司。

1.2 方法与结果

1.2.1 色谱条件

采用SH-Rtx-1701毛细管色谱柱，其规格为30 m×0.32 mm（内径）×0.25 μm（膜厚）;检测器：FPD;进样口温度：220 ℃;检测器温度：270 ℃;柱温升温程序：初温80 ℃，保持l min;以30 ℃·min-1升温至185 ℃，保持6 min;以30 ℃·min-1升温至210 ℃，保持5 min;以30 ℃·min-1升温至250 ℃，保持3 min;进样方式：不分流进样;进样量：1 μL;载气：高纯氮（纯度>99.999%）;燃烧气：氢气（纯度>99.999%），流速62.5 mL·min-1;助燃气：空气，流速90 mL/min。

1.2.2 样品的制备

取蒲公英约5 g，精密称量，置于50 mL塑料离心管中，加水10 mL涡旋混匀，浸泡30 min。精密加入10 mL乙腈混匀，置于冰浴中5 min，加入1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠、4 g硫酸镁、0.5 g柠檬酸氢二钠及1颗陶瓷均质子，剧烈振荡1 min，置于冰浴冷却后，4 500 r·min-1离心5 min。吸取6 mL上清液加入到内含885 mg硫酸镁、150 mg PSA及15 mg GCB的离心管中，涡旋混匀1 min。4 500 r·min-1离心5 min，准确吸取2 mL上清液于试管中，40 ℃水浴中氮气吹至近干。加入1 mL丙酮复溶，过0.45 μm有机滤膜，滤液供气相色谱测定。

2 结果与分析

2.1 线性关系考察

准确称取适量的标准品（精确至0.1 mg），用丙酮溶解分别制成1 mg·mL-1的对照品储备液，分别精密量取对照品储备液制成混合农药标准品溶液，用丙酮稀释成浓度为0.01、0.02、0.04、0.08、0.10、0.20、0.40 mg·L-1和1.00 mg·L-1的系列标准溶液，用1.2.1中色谱条件检测，空白蒲公英药材色谱图见图1。

14种混合标准品溶液色谱图见图2。以浓度（mg·L-1）为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），得相应有机磷农药的回归方程，结果见表1，在0.01～1.00 mg·L-1浓度范围内相关系数为0.997 7～1.000 0。结果表明，各有机磷农药的质量浓度（X）与峰面积（Y）呈良好线性关系。

2.2 精密度实验

精密吸取1 μL 1 mg·L-1的14种混合标准品溶液，连续进样6次，测定峰面积，计算RSD，结果见表2。

2.3 加样回收率实验

分别称取空白蒲公英样品5 g，各加入浓度1 μg·mL-1的14種有机磷混合标准溶液0.6、0.9、1.2 mL，充分混匀后静置1 h，做0.12、0.18、0.24 mg·kg-1，3个水平的添加回收，每个添加浓度重复4次，按照1.2.2方法进行样品前处理，将所得溶液分别进样，按1.2.1色谱条件检测，计算加样回收率。在这3个添加水平下，14种农药的回收率在65.5%～107.4%，相对标准偏差在1.8%～14.2%，相对标准偏差均<20%，以上指标均符合农药残留检测方法。测定结果见表3。

2.4 检出限

以3倍信噪比（S/N）计算14种农药的定性检出限（LOD），14种农药的检出限列于表1。14种农药的定性检出限为0.002～0.006 mg·kg-1。

2.5 样品测定

按照1.2.2方法进行样品前处理净化，进行3批次蒲公英样品的检测，每批样品平行试验3次，结果3批样品均未检出上述实验所列的14种有机磷农药。

3 结论

本文采用QuEChERS净化方法，乙腈溶剂提取，气相色谱法进行检测，建立了蒲公英中14种有机磷农药的检测方法。该方法操作简便快捷、重现性好、灵敏可靠，适应性强，同时节约大量的有机溶剂和时间，可为蒲公英药材中多种农药残留量的测定提供了一种简单快速筛查的检测方法。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中国药典I部[S].北京：化学工业出版社，2015.

[2]许先猛，董文宾，卢 军，等.蒲公英的化学成分和功能特性的研究进展[J].食品安全质量检测学报，2018，9（7）：1623-1627.