熏倒牛的生药学鉴定＊

柳 娜，刘越敏，谢田朋，曲 馨，景 明

（甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000）

熏倒牛 Biebersteinia heterostemon Maxim.为牻牛儿苗科熏倒牛属植物，作为一种常用的藏药，其药用部位为地上部分。藏名音译为明见赛保,民间又称为臭花椒、狼尾巴，为藏医专用和特色药材之一[1]。《晶珠本草》中记载熏倒牛味辛、苦、性寒，具有消肿止痛、清热解毒、凉血、祛风的功效，用于治疗各种炎症、结核、丹毒、疟疾、咽喉肿痛、胃痛、全身水肿、卒中等症[2]。主要分布在甘肃、青海、宁夏、四川等地区[3]。迄今，关于熏倒牛的研究报道多为其化学成分及药理药效作用等方面，而关于其生药学鉴别特征也未见文献报道。现对熏倒牛的基源、药材性状和不同器官的鉴别特征进行了生药学研究，可为澄清熏倒牛的基源、品种整理和质量标准的制定奠定基础。

1 材料与方法

1.1 实验材料

熏倒牛药材于2018年10月采自定西市安定区团结镇联庄村，由甘肃农业大学陈垣教授鉴定为Biebersteinia heterostemon Maxim.将其根 茎、叶、种子福尔马林溶液浸泡保存备用。

1.2 仪器与试剂

显微成像仪(尼康-80i型，上海德沃斯科技仪器有限公司)；电子天平（型号：ME103E/02，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；无水乙醇、水合氯醛、二甲苯、硅胶、盐酸、切片石蜡、正丁醇、甲酸、乙酸均为分析纯。

1.3 实验方法

1.3.1 熏倒牛原植物形态鉴别

对熏倒牛原植物的根、茎、叶、花等形状、颜色、大小进行观察[4-7]。

1.3.2 石蜡切片鉴别

取熏倒牛的根、茎、叶和种子，用清水洗干净后自然晾干，选出特征完整的药材用刀片切成小段备用，进行梯度脱水后，二甲苯透明处理，再进行包埋与修整，切片和粘片，脱蜡，用番红-固绿染色，最后用中性胶进行封片处理。

1.3.3 粉末鉴定

取熏倒牛的根、茎、叶、果实和种子置于60℃烘箱中烘干，分别粉碎处理后，过60目筛，备用。分别取少量的药材粉末置于干净的载玻片上加入2滴水合氯醛，置于酒精灯上加热透化处理后，静置放凉，滴半滴稀甘油，倾斜45℃盖上盖玻片，挤压出装片中残留气泡，从盖玻片一侧轻轻吸出多余的残液，采用光学显微镜观察各器官中细胞组织的形态特征。

2 实验结果

2.1 熏倒牛的性状鉴别

根粗壮,纺锤形,稀分枝,表皮褐色和黄褐色，上半部分为疏生为枯萎的叶柄的残余覆盖。茎直立，呈圆柱状，有明显的纵棱,表皮黄棕色至棕褐色,密被黑色腺毛和柔毛,质脆,横断面不整齐,髓白色或空心。多叶少枝，有棕色托叶，叶互生,呈倒披针形，,叶片2～3回羽状深裂或全裂；小裂片条状披针形,皱缩；着生长黄褐色柔毛和腺。花序长，叶状苞片，披针形，为单毛所覆盖，边缘全缘，先端渐尖，花瓣5,倒卵形,淡黄色,排列紧密,与萼片等长或稍短。花萼5,宿存,黑色,被腺毛和柔毛。 花期 5～8月，味苦,气浓臭。

2.2 熏倒牛组织切片特征

2.2.1 根

熏倒牛根部横切面木栓层排列3层细胞，射线将维管束分为16～18束不等，维管束由外依次向内为初生韧皮部、次生韧皮部、形成层、次生木质部、初生木质部。如图1所示。

2.2.2 茎

茎横切面组织皮层细胞排列3～4列，维管束被射线分成20～25束不等，形成层明显，维管束由外向内依次为：中柱鞘纤维、韧皮部、形成层、木质部、髓部中空。如图2所示。

图2 熏倒牛茎部显微横切图

2.2.3 叶

熏倒牛叶表皮一层细胞排列紧密的类方形细胞构成，表面由气孔和非腺毛，少为腺毛。类圆柱形栅栏组织细胞紧贴于上表皮细胞，与上表皮细胞垂直。海绵组织细胞间隙大，位于栅栏组织与下表皮细胞之间，下表皮细胞也有一层排列紧密的细胞，细胞下方是2～3层的厚角组织细胞。叶片主脉维管束属于外韧型，导管多为梯纹导管，如图3所示。

图3 熏倒牛叶部显微横切图

2.2.4 种子

熏倒牛种皮为1列棕褐色的厚壁细胞，细胞类方形，外壁互相连接，相邻细胞间有间隙；胚乳细胞多层，排列紧密，内含较多的淀粉粒及脂肪油滴；胚偏于一侧，细胞呈不规则方形环状排列，如图4所示。

图4 熏倒牛种子横切图

2.3 熏倒牛粉末特征

2.3.1 根粉末特征

熏倒牛根的干燥粉末呈棕褐色，用显微镜观察其装片可见细胞组织中的梯纹、网纹导管，多以梯纹导管为主，单个或束聚分布，纤维为长梭形，直径为13～15mm，木栓细胞分布较多，多呈不规则方形，薄壁细胞为长方形，可见清晰的孔纹。

图5 熏倒牛根部粉末特征图

2.3.2 茎粉末特征

熏倒牛茎部的干燥粉末为黄棕色，细胞组织中石细胞、木纤维、导管及木栓组织多呈棕黄色，木纤维为长梭形，直径为 11～15mm，细胞壁厚 2.0～3.0mm，大部分束聚存在。网纹和梯纹导管散在或束聚分布，直径约为10～15mm。石细胞散在，直径为15～22mm，壁厚 3.0～6.5mm，多呈不规则形，孔纹较明显。 木栓细胞破碎或聚集分布。薄壁细胞呈方形或类圆形，可见清晰的孔纹。

图6 熏倒牛茎部粉末特征图

2.3.3 叶粉末特征

熏倒牛叶粉末呈淡绿色，用显微观察粉末装片可见少数不定式气孔，呈镰刀状弯曲的非腺毛散在，顶端呈钝圆形，基部较窄，宽10～13mm。导管以网纹和梯纹导管居多，直径为 6.5～15.5mm，多数呈束聚集。栅栏组织有3～6列细胞排列，薄壁细胞分布较多，多呈类方形，木栓细胞破碎散在，壁厚2.5～3.5mm，纤维细胞表面凸起，有孔沟。

图7 熏倒牛叶部细胞显微特征

2.3.4 种子粉末特征

熏倒牛种子粉末呈棕褐色，种皮栅状细胞呈多角形，直径约为18mm，木质化，壁厚。内种皮细胞呈类方形，壁连珠状增厚，胚乳细胞呈多角形，呈无色，内嵌直径约10mm的糊粉粒，石细胞类圆形散在，胞腔大。

3 讨论

藏药熏倒牛各部位显微特征明显。（1）根部横切面木栓层排列3层细胞，纤维束发达，维管束层次明显。粉末装片可见细胞组织中多以梯纹导管为主，木纤维为长梭形，直径为13～15mm，木栓细胞分布较多，多呈不规则方形，薄壁细胞为长方形，可见清晰的孔纹。（2）茎部横切面皮层细胞排列3～4列，维管束射线较多，木质部与韧皮部界线明显，髓部大，中空。粉末装片中可见木纤维为长梭形 ，大部分束聚存在。网纹和梯纹导管散在或束聚分布，直径约为10～15mm。不规则形石细胞散在，直径为15～22mm，壁厚 3.0～6.5mm，木栓多呈四边形，薄壁细胞呈方形或类圆形，可见清晰的孔纹。（3）叶片切片中栅栏组织细胞紧贴于上表皮细胞，与上表皮细胞垂直，由导管分布。海绵组织细胞间隙大，下表皮细胞也有一层排列紧密的细胞，细胞下方是2～3层的厚角组织细胞。粉末装片可见少数不定式气孔，和非腺毛散在，导管以网纹和梯纹导管居多，直径为 6.5～15.5mm，多数呈束聚集。 栅栏组织有 3～6 列细胞排列，薄壁细胞分布较多，多呈类方形，木栓细胞破碎散在，壁厚 2.5～3.5mm，纤维细胞表面凸起，有孔沟。（4）种子显微切片可见种皮为1列棕褐色的厚壁细胞，胚乳细胞多层，内含较多的淀粉粒及脂肪油滴；胚偏于一侧，细胞呈不规则方形环状排列。粉末装片可见种皮栅状细胞呈多角形，直径约为18mm，木化，壁厚。内种皮细胞呈类方形，壁连珠状增厚，胚乳细胞呈多角形，呈无色，内嵌直径约10mm的糊粉粒，石细胞类圆形散在，胞腔大。以上特征可作为熏倒牛生药学鉴定的依据。